Embriyonik Civciv Beyninden Beyincik Dilimleri Elde Edilmesi

Özet

Kaynak: Hanzel, M., et al. Civciv Serebellar Dilimlerinin Ex Vivo Kültürü ve Granül Hücre Öncülerinin Uzamsal Olarak Hedeflenmiş Elektroporasyonu. J. Vis. Uzm. (2015).

Video, beyincik dilimlerinin hazırlanışını göstermektedir. Beyinciğin bir civciv embriyosundan izole edilmesi için ayrıntılı bir prosedür gösterir. Dilimler daha sonra daha fazla deneysel analiz için bir doku kıyıcı kullanılarak diseke edilmiş beyincikten hazırlanır.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Tavuk Embriyosunun Diseksiyonu 14. Gün (e14) Beyincik

1. Kahverengi döllenmiş tavukların yumurtalarını 38 °C'de embriyonik 14. güne kadar kuluçkaya yatırın.
2. Yumurta makası kullanarak, civciv embriyosunu ovo içinde dekapite edin ve kafayı buz gibi soğuk Fosfat tampon salin (PBS) içeren bir Petri kabına çıkarın (Şekil 1A).
3. Standart forseps kullanarak, her bir gözün arkasında, doku boyunca tamamen kesiler yapın, gözleri ve üs....

Sonuçlar

Şekil 1. E14 civciv embriyolarından beyincik diseksiyonu. (A) Yumurtadaki civcivin kafasını kesin ve kafasını buz gibi soğuk PBS ile bir petri kabına çıkarın. Gözlerin ve farenksin (kesikli çizgi) arkasında bir kesi yaparak alt çeneyi ve gözleri çıkarın. (B) Cildi kafatasının yüzeyinden çıkarın. (C) Frontal ve parietal kemikleri çıkarın ve (D) beyni çevreleyen mezenkim ve kıkırdaktan çıkarın. (E) D.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
McIlwain doku doğrayıcı	Mickle Laboratuvar Mühendislik Ltd		En iyi sonuç için 300μm'de kesin.