Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bir Sıçan Yavrusu Beyninden Rhinal Cortex-Hipokampus Dilimlerinin Hazırlanması

1.1K görüntülenme

⸱

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

Kaynak: Valente, C. A., et al., Rhinal Cortex-Hipokampus Organotipik Dilim Kültürlerinde Bir Epileptogenez Modeli. J. Vis. Uzm. (2021)

Video, bir sıçan yavrusunun beyninden rinal korteks-hipokampus dilimleri elde etmek ve bunları daha fazla analiz için ortamla doldurulmuş çok kuyulu bir plaka içinde zarlı ekler halinde kültürlemek için bir yöntemi göstermektedir.

Protokol

Hayvan örneklerini içeren tüm prosedürler, uygun hayvan etik inceleme komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.

1. Rinal korteks-hipokampus dilimlerinin hazırlanması

NOT: Rinal korteks-hipokampus dilimlerinin hazırlanmasında P6-7 Sprague-Dawley sıçanları kullanılır.

  1. Kültür kurulumu ve besiyeri hazırlama
    1. Kültürden bir gün önce gerekli besiyerini hazırlayın ve 4 °C'ye yerleştirin.
    2. Diseksiyon ortamını hazırlayın: Gey'in Dengeli Tuz Çözeltisinde (GBSS) 25 mM glikoz.
    3. Kültür ortamını hazırlayın:% 50 Opti-MEM,% 25 HBSS,% 25 At ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Rinal korteks-hipokampus organotipik dilimlerinin hazırlanması için ayrıntılı prosedür. (A) Beyni kafadan çıkarın ve sırt yüzeyi yukarı bakacak şekilde buz gibi GBSS'ye yerleştirin. (B) Forsepsleri beyinciklere yerleştirin. Beyni orta hattan açın ve hipokampus üzerindeki fazla dokuyu çıkarın. (C) Oklarla gösterildiği gibi hipokampusun altında.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmedi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Neşter sapı için bıçaklarGüzel Bilim Araçları10011-00
Beyin/Doku Dilim Odası SistemiWarner Enstrümanları
Hücre kültürü ekleri, 30 mm, hidrofilik PTFEKırlangıç SASPICM03050
Konvansiyonel kuluçka makinesiTermo Bilimsel HeraeusBB15, Fonksiyon Hattı37 °C ve %5 CO2'ye ayarlayın
D (+) - Glikoz monohidratMerck Kırlangıç1.08342.1000
D-(+)-Glikoz çözeltisi, suda %45SigmaG8769
di-Sodyum hidrojen fosfat dihidratMerck Milipore1.06580.1000
Dumont #5 İnce Forseps Biologie InoxGüzel Bilim Araçları11254-20
Dumont #5 Forseps Standart InoxGüzel Bilim Araçları11251-20
Dumont #7 Forseps Standart DumoxelGüzel Bilim Araçları11271-30
Dumont Medical #7S Forseps Kısa Eğri InoxGüzel Bilim Araçları11273-22
Gentamisin stok çözeltisi, 50 mg / mLThermo Fisher Bilimsel15750-037
Gey'in Dengeli Tuz Çözeltisi (GBSS)Biyolojik Endüstriler01-919-1A
Cam ElektrotlarBilim ÜrünleriGB150F-10Yuvarlak ipuçları ev yapımı
Cam Pastör pipetleri, 230 mmVWR Uluslararası612-1702
At Serumu, Isı İnaktive Edilmiş (HS)Thermo Fisher Bilimsel26050-088
İris Spatula KavisliGüzel Bilim Araçları10092-12
Laboratuvar Kültürü Sınıf II Biyolojik Güvenlik KabiniHERASafeHS 12
L-Glutamin çözeltisi 200 mM (Q)Thermo Fisher Bilimsel25030-024
Nörobazal-A Orta (NBA)Thermo Fisher Bilimsel10888-022
Opti-MEM® I İndirgenmiş Serum OrtamıThermo Fisher Bilimsel31985-047
Platin 5 bıçakGür
Kalitatif Filtre Kağıdı, Selüloz, Grade 1, 55 mmNe adam1001-055Orta tutma 11μm
Kalitatif Filtre Kağıdı, Selüloz, Grade 1, 90 mmNe adam1001-090Orta tutma 11μm
Neşter sapıGüzel Bilim Araçları91003-12
TC ile İşlem Görmüş Steril 6 Kuyulu PlakalarCorningCORN3516
Sıcaklık kontrolörüMEDİKAL SİSTEMLER A.Ş.TC-102
Doku DoğrayıcıMickle Laboratuvar Mühendislik A.Ş. LTD.MTC/2350 μm'ye ayarlayın
Serisi Serisi Serisi Serisi

Daha fazla makale keşfet

Rinal Korteks DilimleriDoku DoğrayıcıMembranlı İnsetlerÇok Kuyucuklu PlakaSoğuk GBSSKültür BesiyeriDoku İyileşmesiDilim Hazırlama