Meyve Sineği Larva Beyin Eksplantlarının Diseksiyonu ve Montajı

Bu makalede

Özet

Kaynak: Sheng, C., et al. Gelişen Drosophila Nöronlarında Hızlı Dendritik Dal Dinamiklerinin Hızlandırılmış Canlı Görüntüleme ve Niceliklerinin Ölçülmesi. J. Vis. Uzm. (2019).

Bu video, Drosophila larvalarından elde edilen beyin eksplantlarının diseksiyonunu ve montajını göstermektedir. Göz disklerine bağlı merkezi sinir sistemi (CNS) larvalardan çıkarılır ve daha sonra fizyolojik bir tuzlu su çözeltisi içinde bir cam lam üzerine monte edilir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Larva Beyin Eksplantlarının Diseksiyonu ve Montajı

Fizyolojik dış tuzlu su çözeltisinde (120 mM NaCl, 4 mM MgCl₂, 3 mM KCl, 10 mM NaHCO₃, 10 mM Glikoz, 10 mM Sükroz, 5 mM N- [Tris(hidroksimetil)metil]-2-aminoetansülfonik asit (TES), 10 mM 4- (2-hidroksietil) -1-piperazineetansülfonik asit (HEPES), 2 mM Ca^{2 +}, pH 7.2) içinde larva beyinlerini diseksiyon mikroskobu altında (4.5x büyütme gücü) iki çift #5 standart uç diseksiyon forseps....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Dendrit dinamiği görüntüleme ve miktar tayini protokolünün iş akışı. (A) Protokol, numune hazırlama, görüntü toplama, görüntü işleme ve dendrit dinamiğinin yarı otomatik miktar tayinini kapsayan altı adım içerir. (B) Sırt tarafı yukarı bakacak şekilde monte edilmiş bir larva beyin eksplantı içeren bir görüntüleme odasını gösteren şematik bir diyagram. Beyi.......