Bir beyin diliminde pedunkülopontin çekirdek nöronlarından gama bandı salınımlarının kaydedilmesi

Özet

Kaynak: Urbano, F. J., et al. Pedunkülopontin Çekirdek Nöronlarında Gama Bandı Salınımlarının Kaydedilmesi. J. Vis. Uzm. (2016).

Video, PPN nöronlarında gama bandı salınımlarını kaydetme yöntemini gösterir. aCSF'de sinaptik blokerli bir sagital beyin bölümü kullanarak, kalsiyum kanallarını açmak için bir yama pipeti aracılığıyla pozitif akım darbeleri kullanır ve uyanıklık için önemli eşik altı aktiviteyi indükler.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Standart-Yapay Beyin Omurilik Sıvısının (aCSF) Hazırlanması

1. Stok Hazırlama Çözelti A
   1. Kimyasalları eklemeden önce temiz 1 L'lik bir behere 700 ml damıtılmış su ekleyin.
   2. 500 ml'lik bir hacmi sürekli karıştırırken, 136.75 g NaCl, 6.99 g KCl, 2.89 g MgS04 ve 2.83 g NaH _2PO4 ekleyin.
   3. 1 L'lik son hacme ulaşmak için daha fazla damıtılmış su ekleyin. Seyreltmeden sonra, her bir bileşiğin nihai konsantrasyon....

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Sakaroz	Sigma-Aldrich	S8501 Serisi	C12H22O11, molekül ağırlığı = 342.30
Sodyum Bikarbonat	Sigma-Aldrich	S6014 Serisi	NaHCO3, molekül ağırlığı = 84.01
Potasyum Klorür	Sigma-Aldrich	P3911 Serisi	KCl, molekül ağırlığı = 74.55
Magnezyum Klorür Hekzahidrat	Sigma-Aldrich	M9272	MgCl2 · 6H2O, molekül ağırlığı = 203.30
Kalsiyum Klorür Dihidrat	Sigma-Aldrich	C3881 Serisi	CaCl2 · 2H2O, molekül ağırlığı =147.02
D-(+)-Glikoz	Sigma-Aldrich	G5767	C6H12O6, molekül ağırlığı = 180.16
L-Askorbik Asit	Sigma-Aldrich	A5960	C6H8O6, molekül ağırlığı =176.12
Sodyum Klorür	Acros Organik	327300025	NaCl, molekül ağırlığı = 58.44
Potasyum Glukonat	Sigma-Aldrich	G4500	C6H11KO7, molekül ağırlığı = 234.25
Fosfokreatin di(tris) tuzu	Sigma-Aldrich	P1937 Serisi	C4H10N3O5P · 2C4H11NO3, molekül ağırlığı = 453.38
HEPES ÜNİVERSİTESİ	Sigma-Aldrich	H3375	C8H18N2O4S, molekül ağırlığı = 238.30
EGTA (EGTA)	Sigma-Aldrich	E0396	[-CH2OCH2CH2N(CH2CO2H)2]2, molekül ağırlığı = 380.40
Adenozin 5'-trifosfat magnezyum tuzu	Sigma-Aldrich	A9187	C10H16N5O13P3 · xMg2+, molekül ağırlığı = 507.18
Guanozin 5'-trifosfat sodyum tuzu hidrat	Sigma-Aldrich	G8877	C10H16N5O14P3 · xNa+, molekül ağırlığı = 523.18
Tetrodotoksin sitrat	Alomone Laboratuvarları	T-550	C11H17N3O8, molekül ağırlığı = 319.27
DL-2-Amino-5-Fosfonovalerik Asit	Sigma-Aldrich	A5282	C5H12NO5P, molekül ağırlığı = 197.13
CNQX disodyum tuzu hidrat	Sigma-Aldrich	C239	C9H2N4Na2O4 · xH2O, molekül ağırlığı = 276.12
Strychnine	Sigma-Aldrich	S0532 Serisi	C21H22N2O2, molekül ağırlığı = 334.41
Mecamilamin hidroklorür	Sigma-Aldrich	M9020	C11H21N · HCl, molekül ağırlığı = 203.75
Gabazin (SR-95531)	Sigma-Aldrich	S106 Serisi	C15H18BrN3O3, molekül ağırlığı = 368.23
Ketamin hidroklorür	Fransa	67457-001-00
mikroskop	Nikon	Tutulma E600FN
Mikromanipülatör	Sutter Aletleri	ROE-200
Mikromanipülatör	Sutter Aletleri	MPC-200
yükselteç	Moleküler Cihazlar	Çoklu kelepçe 700B
A/D dönüştürücü	Moleküler Cihazlar	Dijital veri 1440A
ısıtıcı	Warner Enstrümanları	TC-324B
pompa	Cole-Parmer	Masterflex L/S 7519-20
Pompa kartuşu	Cole-Parmer	Masterflex 7519-85
Pipet çektirme	Sutter Aletleri	P-97
kamera	Q-Görüntüleme	RET-200R-F-M-12-C
Vibratom	Leica Biyosistem	Leica VT1200 S
Soğutma sistemi	Vibratom Aletleri	900R
ekipman
mikroskop	Nikon	Tutulma E600FN
Mikromanipülatör	Sutter Aletleri	ROE-200
Mikromanipülatör	Sutter Aletleri	MPC-200
yükselteç	Moleküler Cihazlar	Çoklu kelepçe 700B
A/D dönüştürücü	Moleküler Cihazlar	Dijital veri 1440A
ısıtıcı	Warner Enstrümanları	TC-324B
pompa	Cole-Parmer	Masterflex L/S 7519-20
pompa kartuşu	Cole-Parmer	Masterflex 7519-85
Pipet Çektirme	Sutter Aletleri	P-97
kamera	Q-Görüntüleme	RET-200R-F-M-12-C

Gazetesi Gazetesi Gazetesi Gazetesi Serisi Gazetesi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Uçağı Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Gazetesi Gazetesi Serisi Gazetesi Serisi Serisi Serisi Uçağı Serisi Serisi Serisi Serisi Uçağı