$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Optik Sinir Enjeksiyonu
- Hayvanı intraperitoneal ketamin (75 mg / kg) ve medetomidin (0.5 mg / kg) enjeksiyonu ile uyuşturun.
not: Anestezi indüksiyonunu takiben, ameliyata başlama göstergesi olarak çekilme reflekslerini (çimdik testi, kornea ve palpebral refleks vb.) ve bunların yokluğunu gözlemleyin. Ameliyat boyunca hayvanları sürekli olarak izleyin ve refleksler varsa ek anestezik ilacı (ek yükleme başına başlangıç ketamin dozunun% 10'u) uygulayın. Deneylerde erişkin sıçanlar (>12 hafta) kullanılmaktadır.
- Cerrahi bölgenin cildini tıraş edin. Ameliyat sırasında vücut ısısını korumak için hayvanı bir ısıtma pedine (37 °C) yerleştirin. Povidon-iyotun topikal uygulamasıyla cildi hazırlayın. Cerrahi örtü uygulayın. Genel anestezi altında kornea kuruluğunu önlemek için topikal oftalmik merhem sürün. Steril aletler kullanarak asepsi koruyun.
- Rastgele seçilen bir gözün yörüngesinin üzerindeki deride 1 ila 1,5 cm'lik bir kesi yapın. İnce iris makası kullanarak orbital boşluğa ulaşmak için deri altı dokusunu açın. Konjonktiva ve anterior Tenon'un kapsülünü ameliyat mikroskobu altında açın.
- Optik sinirin yaklaşık 3 mm uzunluğunu ortaya çıkarmak için ekstraoküler kasları ve intraorbital lakrimal bezleri geri çekin. Optik sinirin etrafındaki dura ve araknoid madde tabakalarını bir oftalmik bıçak kullanarak uzunlamasına açın.
- Cam pipeti, kürenin 2 mm arkasından optik sinire yerleştirin. Cam mikropipet bir Hamilton şırıngaya bağlanır.
- % 1 lizolesitin (0.4 - 1.0 μl,% 0.02 Evan Mavisi ile% 30 saniyelik bir süre boyunca yavaşça sinire enjekte edin.
- Cilt kesisini dikin. Enfeksiyonu önlemek için antibiyotik merhem sürün. Diğer gözler, elektrofizyoloji kayıtları için dahili kontroller olarak kullanılabilir.
- Anesteziden kurtulmak için hayvanları bir ısınma pedine yerleştirin.