Nöropatoloji

Beyin atrofisini tespit etmek için, çeşitli yaşlardaki nörodejeneratif fare modellerinden deparafinlenmiş beyin bölümlerini taşıyan slaytlarla başlayın.

Bu NP'leri görselleştirmek için, deparafinize edilmiş, sabit bir insan beyni bölümü alın.

Bölümleri yıkamak için çift damıtılmış su ekleyin.

Lipofuscin de dahil olmak üzere hücre yapılarını stabilize etmek için dokuyu osmiyum tetroksit ile tedavi edin.

Proteinleri tampona bırakmak için dokuyu homojenize edin. Proteaz inhibitörleri, proteaz aktivitesini bloke ederek protein bozulmasını önler.

Bir deterjan, bir indirgeyici madde ve bir izleme boyası içeren bir yükleme tamponu ekleyin.

Normal prionları sindirmek için proteolitik bir enzim ile inkübe edin ve dirençli agregaları sağlam bırakın.

Endojen peroksidazları inhibe etmek ve spesifik olmayan lekelenmeyi önlemek için hidrojen peroksit çözeltisi ile inkübe edin.

Bu bölümler, hipokampal nöronlarda bulunan tau proteininin anormal agregatları olan nörofibriler yumaklar içerir.

Heparan sülfatı görselleştirmek için, amiloid plakları içeren hastalıklı bir insan hipokampal doku bölümü ile başlayın.

Hücresel kalıntıları peletlemek için numuneyi santrifüjleyin ve süpernatanı toplayın.

Bu protokol, nöronal kanser hücrelerinden proteinlerin ekstraksiyonunu ana hatlarıyla belirtir. Hücreler bir tampon ile yıkanır ve enzimatik ve mekanik bozulma yoluyla parçalanır. Ekstrakte edilen protein açısından zengin süpernatant, santrifüjlemeden sonra toplanır.

Bu video, mikroskopi için sıçan kortikal nöronlarının floresan olarak boyanması prosedürünü göstermektedir. Yapısal bütünlüğü analiz etmek ve nöronal fonksiyon ve sağlığı incelemek için çok önemli olan F-aktin yoğunluğunu hesaplamak için F-aktin ve dendritik proteinleri hedefler.

Bu video, yoğunluk gradyanlı santrifüjleme ve amiloid olmayan proteinlerin sindirimi kullanılarak fare beyin dokusu ekstraktından amiloid fibrilleri izole etme protokolünü göstermektedir.

Bu video, fare birincil serebellar granül nöronlarında reaktif oksijen türleri (ROS) kullanılarak bir nöronal yaralanma modelinin oluşturulmasını özetlemektedir. Yüksek konsantrasyonlarda hidrojen peroksit ekleyerek oksidatif stresi indükleme sürecini detaylandırır. ROS maruziyeti DNA ipliği kırılmalarına ve genomik instabiliteye neden olur. Ek olarak, hücresel proteinlerin oksidasyonu işlevlerini bozarken, lipid peroksidasyonu membran bütünlüğünü tehlikeye atar. Bu kaskad, sitokrom c...

Bu video, mikroglia kullanarak nanopartiküllerin nörotoksik etkilerini değerlendirmek için bir yöntem göstermektedir. Mikroglia'yı nanopartiküllerle aktive etme, mikroglia'dan türetilmiş proinflamatuar sitokinleri izole etmek için şartlandırılmış medyayı filtreleme ve şartlandırılmış besiyeri ile hipotalamik nöron toksisitesini test etme adımlarını ana hatlarıyla belirtir.

Video, mekanik yaralanma yoluyla Drosophila larva segmental sinirlerinde nörodejenerasyonun indüklendiğini göstermektedir. Anestezi uygulanmış larvaların ventral kütikülü, segmental sinirlerin yaralanmasına neden olmak için forseps kullanılarak sıkıştırılır. Yaralı larvalar yiyecekle korunur, bu da yaralanmanın sinirlerdeki motor nöronların dejenerasyonuna neden olmasına ve nöromüsküler kavşaklarının (NMJ'ler) bozulmasına neden olmasına izin verir.

Bu video, nörotoksin 6-hidroksidopamini (6-OHDA) beyne enjekte ederek Parkinson hastalığının bir sıçan modelini oluşturma prosedürünü göstermektedir. Medial ön beyin demetine (MFB) nörotoksin infüzyonu, özellikle motor kontrolden sorumlu dopaminerjik nöronları hedef alır, bu da onların yok olmasına ve Parkinson hastalığı semptomlarının tekrarlanmasına yol açar.

Bu videoda, İnsan embriyonik kök hücrelerinin nöral organoidlere dönüştürülmesi için aşamalı bir protokol gösterilmektedir. Yöntem, nöronal rozet oluşumunun indüklenmesini, ardından tam gelişmiş nöral organoidler elde etmek için kontrollü olgunlaşmayı ve hidrofobik bir zar üzerinde son kültürlemeyi içerir.

Bu video, Parkinson hastalığını incelemek için bir model sağlamak üzere insan embriyonik kök hücrelerinin (hESC'ler) dopaminerjik nöronlara farklılaşmasını göstermektedir. hESC'ler, 3D nöroküreler oluşturmak için bir mikro kuyu plakasında bir nöral indüksiyon ortamında kültürlenir. Bunlar daha sonra dopaminerjik progenitör nöronlara farklılaşmayı teşvik etmek için bir nöral indüksiyon ortamında kültürlenir. Nöronların son olgunlaşması, hava-sıvı arayüz koşulları altında bir kültür ekinde...

Bu video, amiloid-β (Aβ) agregatları tarafından nöronal büyüme konisi çöküşünün in vitro değerlendirmesini göstermektedir. Nöronların Aβ agregatları ile tedavi edilmesi, hücre iskeletinin destabilizasyonuna neden olarak aksonların ucundaki büyüme konilerinin çökmesine neden olur. Tedavi edilen hücreler, büyüme konisi çöküşünün derecesini değerlendirmek için kontrol hücreleri ile karşılaştırılır.

Video, Matris destekli Lazer Desorpsiyon/İyonizasyon Görüntüleme Kütle Spektrometresi (MALDI-IMS) kullanılarak amiloid-beta (Aβ) peptitlerinin birikimini analiz etmek için Alzheimer hastalığı hastalarından insan kortikal beyin dilimlerinin hazırlanmasına yönelik bir prosedürü göstermektedir. Adımlar, slaytların hazırlanmasını, iyonlaşmayı arttırmak için dokunun işlenmesini ve amiloid-beta peptitlerin uzamsal dağılımının analiz edilmesini içerir.

Bu video, alfa-sinüklein (αS) agregatları ile tedavi edilen nöronların immün boyamayı göstermektedir. Nöronlar ilk olarak αS agregatları ile muamele edilir. Daha sonra sabitlenir, geçirgen hale getirilir ve bir bloke edici çözelti ile muamele edilir. Birincil antikorlar eklenir, ardından floresan olarak işaretlenmiş bir ikincil antikorlar ve bir nükleer leke gelir. Numune daha sonra monte edilir ve mikroskop altında gözlemlenir.

Bu video, lazer yaralanması kullanılarak yetişkin zebra balıklarında retina dejenerasyonunu indüklemek için bir prosedürü göstermektedir. Lazer, retinadaki fotoreseptör hücrelerini hedef alarak hücre ölümünü ve dejeneratif bir süreci tetikler. Bu hasar, Müller glia (MG) hücrelerini aktive eder ve retinal rejenerasyona yardımcı olan kök hücre progenitörlerine farklılaşmalarına yol açar.

Bu video, Alzheimer hastalığında görülen nöronal hasarı taklit ederek amiloid toksisitesi oluşturmak için yetişkin zebra balıklarının ön beynine monomerik amiloid peptitlerin enjekte edilmesi prosedürünü...

Bu video, bir siklik adenozin monofosfat (cAMP) biyosensörü ve lüminesans tespiti kullanarak transfekte edilmiş hücrelerde koku reseptörü aktivasyonunu ölçmek için kullanılan protokolü gösterir. Yöntem, koku alma nöronlarındaki reseptör-ligand etkileşimlerini ve sinyal yollarını incelemek için uygulanır.

Bu video, hipokampus bölgesinde toplu olarak toksik amiloid plak oluşumuna yardımcı olan amiloid-beta peptitleri, alüminyum klorür ve bir nöroinflamatuar büyüme faktörü enjekte etme prosedürünü göstermektedir. Bu, Alzheimer hastalığının karakteristiği olan sıçanlarda hafıza bozukluğuna neden olur.

Bu video, Alzheimer hastalığının bir fare modelini oluşturmak için amiloid beta'nın dentat girusa kesin stereotaksik infüzyonunu göstermektedir. Amiloid beta proteinlerinin doğru koordinat tayini ve kontrollü iletimi, nöronal bozulmaya neden olur, hafıza işlemeyi bozar ve Alzheimer hastalığının gelişimine katkıda bulunur.

Bu video, nöroinflamasyonu indüklemek için alfa-sinüklein fibrillerinin bir fareye enjeksiyonunu göstermektedir. Fibriller, mutasyona uğramış alfa-sinüklein proteinlerini eksprese eden transgenik bir fareye intraperitoneal olarak enjekte edilir. Merkezi sinir sistemine ulaştıktan sonra, fibriller nöronlara girer ve mutasyona uğramış proteinlerin toplanmasını indükler. Agregalar komşu nöronlara, mikroglialara ve astrositlere yayılır. Agregaların tanınması, nöroinflamasyonu indüklemek için...

Bu video, kırmızı floresan proteini ile etiketlenmiş prion benzeri proteinleri eksprese eden C. elegans'ın in vivo görüntüleme prosedürünü göstermektedir. Protokol, zaman atlamalı konfokal mikroskopi için bir agaroz ped üzerinde nematodların hareketsiz hale getirilmesini, protein agregasyonunu ve hücreler içinde ve arasında taşınmayı ortaya çıkarmayı içerir. Bu teknik, nörodejeneratif hastalıklarla ilgili protein agregasyonunu incelemek için çok önemlidir.

Bu video, Parkinson hastalığını modellemek için sıçan substantia nigra'ya viral bir vektör enjekte etme sürecini göstermektedir. Sıçanın hazırlanması, viral vektörün substantia nigra'ya mikroenjekte edilmesi ve kurtarma prosedürü için adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu videoda, donmuş ölüm sonrası insan beyni dokusundan deterjanda çözünmeyen protein agregatlarının izole edilmesi ve zenginleştirilmesi süreci açıklanmaktadır. Çözünmeyen agregaları ayırmak ve saflaştırmak için homojenizasyon, deterjan arıtma, sonikasyon ve ultrasantrifüjleme dahil olmak üzere temel adımları gösterir. Son adım, daha fazla analiz için agregaların üre tamponu içinde çözündürülmesini içerir.

Bu video, genetiği değiştirilmiş Drosophila beyinlerindeki protein agregatlarının görüntülenmesini ve miktarının belirlenmesini göstermektedir. Beyinler sabitlenir, yıkanır ve montajdan önce solma önleyici bir madde ile muamele edilir. Görüntüler konfokal bir mikroskop kullanılarak yakalanır ve mutant protein agregatlarının iletimini gözlemlemek için nicelleştirilir.

Bu video, immünofloresan kullanarak normal ve diyete bağlı obezite (DIO) yetişkin zebra balığı beyin dokusunda oreksin ve kanabinoid reseptörlerinin birlikte lokalizasyonunu araştırmak için bir protokolü göstermektedir.

Bu video, alfa-sinüklein önceden oluşturulmuş fibrillerle önceden tedavi edilmiş embriyonik fare dopamin nöronlarında alfa-sinüklein birikimini ölçme sürecini göstermektedir. İmmünofloresan kullanarak alfa-sinüklein agregatları içeren dopamin nöronlarını sabitleme, boyama ve nicelik belirleme adımlarını ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, florojenik bir peptit testi kullanılarak korku koşullandırılmış ve kontrol sıçan beyinlerinden lateral amigdalanın farklı hücre altı bölmelerindeki proteazom aktivitesinin nasıl ölçüleceğini göstermektedir. Proteazom, florojenik peptit substratını parçalayarak, nükleer ve sinaptik protein fraksiyonlarındaki proteazom aktivitesini değerlendirmek için bir plaka okuyucu kullanılarak nicelleştirilen floresan molekülleri serbest bırakır. Artan nükleer aktivite, gen ekspresyonundaki...

Bu video, bir dopamin dönüşüm inhibitörü ile birlikte levodopa uygulayarak bir Parkinson sıçan modelinde levodopa kaynaklı diskinezileri indükleme sürecini göstermektedir. Tekrarlanan enjeksiyonlar beyin nöronlarını aşırı uyararak motor disfonksiyona neden olur.

Bu video, infraorbital siniri bağlayarak bir sıçan modelinde orofasiyal nöropatik ağrının indüksiyonunu göstermektedir. Bu, sinir hasarı ve iltihaplanma ile sonuçlanır, anormal ağrı sinyaline neden olur ve orofasiyal ağrı testini incelemek için kullanılabilecek kronik ağrı durumlarını taklit eder.

Bu video, yaşlanan hücrelerde yüksek olan beta-galaktosidaz aktivitesini boyayarak kortikal organoid bölümlerde yaşlanan nöronları tespit etme yöntemini göstermektedir. Enzim, mavi bir ürün üretmek için bir substratı parçalar, ardından lekeli nöronların mikroskobik gözlemi yapılır.

Bu video, iki noktalı Lizofosfatidilkolin (LPC) enjeksiyonu kullanılarak bir fokal demiyelinizasyon fare modelinin oluşturulmasını göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir farenin kafatası açığa çıkar. Enjeksiyon koordinatları belirlenir ve hedeflenen bölgelerde LPC enjeksiyonlarını mümkün kılmak için bir delik açılır. LPC, inflamasyon yoluyla nöronların fokal demiyelinizasyonunu indüklerken, iki noktalı bir enjeksiyon sürdürülebilirliğini sağlar.

Bu video, bir sıçan hipokampal bölümünde biyositin dolu bir internöronun görselleştirilmesi sürecini göstermekte ve spesifik antikorlar ve floresan mikroskobu kullanılarak nörokimyasal kimliğini vurgulamaktadır.

Bu videoda rektal aspirasyon biyopsi kesitlerinde S-100 proteini için immünohistokimyasal boyama gösterilmektedir. Antijen ile alınan bölümler bloke edilir ve primer ile tedavi edilir, ardından Hirschsprung hastalığının bir belirteci olan S-100'e karşı ikincil antikorlar gelir. Hedeflenen hücreleri boyamak için kromojenik substrat eklenir. Numuneler kurutulur ve mikroskop altında görselleştirmeden önce monte edilir.

Bu video, lizolesitin enjeksiyonları kullanılarak fare omurilik nöronlarında demiyelinizasyonu indükleme yöntemini ve ardından oligodendrosit öncü hücrelerinin göçü ve farklılaşması yoluyla remiyelinasyonu göstermektedir. İşlem, nöronal sinyal iletimini bozar ve daha sonra yavaş yavaş geri yükler.

Bu video, protein agregasyonunu incelemek için sarı floresan proteini (YFP) ile etiketlenmiş mutant bir insan tau proteinini kodlayan bir lentivirüs ile insan nöronal hücrelerinin dönüştürülmesi sürecini göstermektedir. Nöronlarda görünür sitoplazmik tau agregatlarının oluşumuyla sonuçlanan viral girişten mutant tau ekspresyonuna kadar olan adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, nöronal hücrelerin mitokondriyal solunum zinciri kompleksleri, mitokondriyal DNA ile ilişkili protein ve mitokondriyal dış zar proteini için antikorlarla etiketlenmesini ve ardından seviyelerini ölçmek için akış sitometrisini göstermektedir.

Bu video, tetrasiklin ile indüklenebilir bir sistem kullanılarak genetik olarak değiştirilmiş insan hücrelerinde γ-sekretaz aktivitesini ölçme prosedürünü göstermektedir. İşlem, tetrasiklin ile APP gen ekspresyonunun indüklenmesini, amiloid β peptitlerin üretilmesini ve lusiferaz üretiminin aktive edilmesini içerir. Lusiferaz-substrat reaksiyonundan kaynaklanan biyolüminesans daha sonra ölçülür ve γ-sekretaz aktivitesini yansıtır.

Bu protokol, fare beyin bölümlerindeki locus coeruleus bölgelerini tanımlamak için immünohistokimyanın kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Dopamin β-hidroksilazı yeşil florofor işaretli antikorlarla hedefleyerek, norepinefrin üreten nöronlar mikroskop altında yeşil floresan olarak görselleştirilir.

Video, bir fare beyninin interstisyel sıvısından (ISF) hücre dışı proteinleri toplamak için bir mikrodiyaliz probu kullanma sürecini göstermektedir. Yüksek moleküler ağırlıklı kesik yarı geçirgen bir membran ile donatılmış bir mikrodiyaliz probu, implante edilmiş bir kılavuz kanül aracılığıyla anestezi uygulanmış bir farenin beynine yerleştirilir. Pompalara bağlı prob, fizyolojik bir tamponun beyin dokusunu perfüze etmesine ve İDF ile karışmasına izin verir. İDF'deki proteinler yarı geçirgen...

Bu video, tekrarlanan immobilizasyon yoluyla bir farede kronik stresi indükleme yöntemini göstermektedir, bu da kortikosteron salınımına ve nöronlarda glutamat reseptör aktivitesinin azalmasına yol açar, bu da depresyon benzeri davranışa neden olur.

Bu video, nörodejenerasyonu taklit etmek için sıçan beyin hemisyllerini nörotoksik bir peptit ile hazırlama ve tedavi etme prosedürünü göstermektedir. Protokol, aynı anatomik düzlemde kontrol ve tedavi edilen dilimleri doğrudan karşılaştırarak nörodejeneratif olayların analiz edilmesine izin verir.

Bu video, bir nöropeptit reseptör agonisti ile uyararak nörotransmitter salınımını incelemek için transfekte edilmiş dorsal kök ganglion hücrelerinin kullanımını göstermektedir.

Bu video, fare beyninin bölümlerinin Meynert bölgesinin çekirdek bazalisindeki kolinerjik liflerin immünohistokimyasal boyanmasını göstermektedir. Bölümler bloke edilir ve kolin asetiltransferaza karşı primer ile tedavi edilir, ardından biyotinile edilmiş sekonder antikorlar takip edilir. İkincil antikorlara bağlanan avidin-biotin-peroksidaz kompleksleri eklenir, ardından kromojenik substrat gelir. Kesitler daha sonra kurutulur ve mikroskop altında görselleştirmeden önce monte edilir.

Bu video, fare beyinlerinden toplanan sinaptozomlarda dopamin alımının değerlendirmesini göstermektedir. Dopamin taşıyıcıları aracılığıyla dopamin alımı için sinaptozomları hazırlamak, bunları değişen konsantrasyonlarda radyoaktif işaretli dopamin ile tedavi etmek, sinaptozomları izole etmek ve dopamin alımını ölçmek için radyoaktiviteyi ölçmek için adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, biyositin dolu internöronlar içeren sabit sıçan beyin dilimlerinin boyanması prosedürünü göstermektedir. Protokol, avidin-biotin kompleksi (ABC) ile inkübasyon, HRP ve kromojenik substrat ile boyama, osmiyum tetroksit ile yapıların korunması ve görüntüleme için dokunun reçineye gömülmesini içerir.

Bu video, serotonin sendromundan etkilenen sıçan beyin dokusunda oligonükleotid probları kullanılarak serotonin reseptörü RNA sentezinin tespitini göstermektedir. Protokol, mikroskop altında serotonin reseptörü RNA ekspresyonunu görselleştirmek ve ölçmek için doku ön işlemi, prob hibridizasyonu, enzimatik tespiti içerir.

Bu videoda, motor kontrol için gerekli olan paralel lifler, tırmanan lifler ve Purkinje hücreleri arasındaki sinaptik etkileşimleri araştırmak için bir fare serebellar beyin dilimi kullanıldı. Tırmanan liflerin uyarılması, Purkinje hücrelerinde uzun süreli depresyona (LTD) neden oldu, sinaptik kuvveti zayıflattı ve paralel lif stimülasyonuna yanıtın azalmasına neden oldu.

Bu video, glial hücrelerin tek hücreli görüntülenmesi için transgenik bir Drosophila beyninin immünofloresan boyamasını göstermektedir. Beyin, glial spesifik bir rekombinaz sisteminin kontrolü altında farklı antijenik epitop kombinasyonları ile kaynaşmış zar hedefli proteinleri eksprese eder. İzole ve sabit beyinler, antijenik epitoplara özgü primer antikorlarla boyanır, ardından florofor konjuge sekonder antikorlar gelir. Bu etiketleme, çeşitli beyin bölgelerinde farklı glial hücre alt...

Bu video, bir sıçanda işitsel korteksi kesmek için stereotaktik olarak yönlendirilen bir cerrahi prosedürü göstermektedir. Adımlar, stereotaktik bir çerçeveye sabitlenmiş anestezi uygulanmış bir sıçandaki anatomik işaretlerin tanımlanmasını, işitsel korteksin üzerindeki kafatasında bir pencere oluşturulmasını, kortikal katmanların aspire edilmesini ve ablasyonun ses işleme üzerindeki etkisini değerlendirmek için ameliyat sonrası bakım sağlanmasını içerir.

Bu videoda, hücre iskeleti organizasyonunu görselleştirmek ve analiz etmek için değişen sertlikteki hidrojeller üzerinde kültürlenen nöral krest hücrelerinin falloidin boyamasını göstermek için floresan mikroskobu kullanarak floresan boyama gerçekleştirme prosedürünü açıklıyoruz.

Bu video, Bis-sülfosüksinimidil suberat veya BS3 kullanılarak nöronal yüzey proteinlerinin çapraz bağlanmasını göstermektedir. İzole edilmiş ve soğutulmuş fare beyni koronal olarak bölümlere ayrılmıştır. İstenilen bölge bölümlerden çıkarılır, kıyılır ve BS3 ile muamele edilir. BS3, GABA reseptörleri gibi yüzey proteinlerini çapraz bağlar ve iç proteinleri değiştirmeden bırakır. Reaksiyon, daha fazla analiz için numuneler işlenmeden önce glisin ile söndürülür.

Video, floresan rezonans enerji transferi (FRET) tabanlı bir hücre içi glikoz sensörü kullanarak Drosophila larva motor nöronlarında glikoz alımını ölçmek için bir tekniği göstermektedir. Ventral sinir kordonunu ortaya çıkarmak için larvaları diseksiyona tabi tuttuktan sonra, motor nöronlar, sensörün donör floroforu tarafından yayılan floresan yoluyla görselleştirilir. Glikoz ile uyarıldığında, sensörün donörü ve alıcısı floroforları arasındaki FRET, alıcıdan floresan emisyonunu tetikleyerek,...

Bu video, birincil ve ikincil antikorlar kullanılarak floresan olarak işaretlenmiş astrositlerle sabit bir fare beyin dokusu bölümünün immün boyama prosedürünü gösterir ve konfokal mikroskopi yoluyla lekeli astrositlerin görüntülerini yakalar.

Bu video, lazer yakalama mikrodiseksiyonu kullanılarak Purkinje hücrelerinin bir insan ölüm sonrası serebellar dokusundan nasıl izole edileceğini göstermektedir.

Bu videoda, aşağı akış analizleri için donmuş fare beyin dokusu kesitlerinin hazırlanmasına yönelik ayrıntılı bir adım adım protokol gösterilmektedir.

Bu video, TNF-α kullanılarak erken evre intervertebral disk (IVD) hastalığı için bir proinflamatuar ve dejeneratif organ kültürü modelinin geliştirilmesini göstermektedir. TNF-α'in intervertebral diske enjekte edilmesi prosedürünü ana hatlarıyla belirtir ve TNF-α'nin IVD'nin iltihaplanmasını ve bozulmasını indüklediği mekanizmaları açıklar.

Bu video, donmuş sıçan beyin dokusunun enzimatik sindirim ve mekanik öğütme kullanılarak tek hücreli bir süspansiyona ayrışmasını göstermektedir. Hazırlanan hücreler, akış sitometrisi veya gen ekspresyon analizi gibi sonraki uygulamalar için etanol ile sabitlenir ve geçirgenleştirilir.

Video, fare beyin dokusundan izole edilen hücre zarı proteinlerinin palmitoilasyon durumunun analizini göstermektedir. İşlem, palmitoillenmemiş sisteinlerin açığa çıkarılmasını ve bunların bloke edilmesini, daha sonra palmitoillenmiş sisteinlere bağlanan ve izole edilen proteinlerin palmitoilasyon durumunun değerlendirilmesine yardımcı olan bir polimer kullanılmasını içerir.

Bu video, nörotoksik amiloid-beta salgılayan hücreleri kapsülleyen polimer mikro boncukların üretilmesi için bir yöntemi göstermektedir. Hücre-polimer süspansiyonu, kalsiyum çapraz bağlama yoluyla elde edilen polimer jelleşmesi ile bir mikroboncuk üretim cihazı aracılığıyla işlenir ve hücrelerin etrafında küresel mikro boncuklar oluşturur. Polimer, hücre çoğalmasına izin verirken, kontrollü, uzun süreli amiloid-beta salınımına izin vererek Alzheimer hastalığındaki birikimini simüle eder.

Video, sabit bir ölüm sonrası insan beynini simetrik olarak incelemek ve daha fazla analiz için daha küçük doku blokları hazırlamak için adım adım bir prosedürü göstermektedir.

Bu video, mitokondri alımı kalsiyum olarak floresandaki gerçek zamanlı değişiklikleri izleyerek mitokondriyal kalsiyum tutma kapasitesini değerlendirme prosedürünü göstermektedir. Bu test, apoptoz ve nörodejeneratif hastalıklar dahil olmak üzere mitokondriyal fonksiyon ve kalsiyumla ilgili süreçleri incelemek için yararlıdır.

Bu video, fare beynine sürekli ilaç infüzyonunun kan şekeri seviyeleri üzerindeki etkisini göstermektedir. Glikoz metabolizması, açlık bir farenin kuyruğundan kan toplanarak ve oral glikoz uygulamasından önce ve sonra glikoz seviyelerinin ölçülmesiyle değerlendirilir. İnsülin toleransı, fareye insülin enjekte edilerek değerlendirilir ve glikoz seviyeleri belirli aralıklarla kaydedilir.

Bu videoda, anestezi uygulanmış bir sıçan, iridokorneal açıyı bloke etmek için manyetik bir alan altında manyetik boncukların ön kamaraya enjekte edildiği oküler bir prosedüre tabi tutulur. Bu tıkanıklık trabeküler ağı tıkar, sulu hümör drenajını engeller ve göz içi basıncının artmasına neden olarak retina ganglion hücrelerine ve optik sinire zarar verir. Bu, glokom benzeri bir durum geliştirir.

Kaynak: Kummari, E., et. al., Lazer Yakalama Mikrodiseksiyonu - Bireysel Dopamin Nöronlarının ve Tüm Ventral Tegmental Alanın İzolasyonunun Bir Gösterimi., J. Vis. Uzm. (2015)Bu videoda, sonraki lazer yakalama mikrodiseksiyonu için beyin dokusu kesitlerindeki dopamin nöronları için immünohistokimya protokolünü gösteriyoruz.

Kaynak: Bennett, S. A., ve diğerleri, Maya Nörodejeneratif Proteinopati Modellerinde Histon Translasyon Sonrası Modifikasyon Değişikliklerinin Karakterize Edilmesi. J. Vis. Uzm. (2019). Bu video, nörodejeneratif proteinleri aşırı eksprese eden maya hücrelerindeki histon modifikasyonlarını değerlendirme prosedürünü göstermektedir. Adımlar, hücre lizizi, santrifüjleme, elektroforez, membran transferi ve modifiye histonların antikor bazlı tespitini içerir.

Kaynak: Yan, Z., et al. Xiaoyaesan'ın Kronik Stresli Fareler Üzerindeki Anti-Depresyon Etkisinin Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2019). Video, kronik strese bağlı depresyonun bir fare modelini oluşturma ve depresif davranışları değerlendirme sürecini göstermektedir. Çeşitli stresörlerin kronik uygulaması, kortikosteron salınımını tetikleyerek nöronal aşırı uyarılmaya ve nihayetinde nöronal ölüme yol açar, bu da farelerde depresyon benzeri semptomlara neden olur.

Kaynak: Bétemps, D., et al., İnsan A53T Mutasyona Uğramış α-sinükleini Aşırı İfade Eden Transgenik Farelerin Beyninde Gelişmiş ELISA ile Hastalıkla İlişkili α-sinükleinin Tespiti. J. Vis. Uzm. (2015). Bu video, ELISA kullanılarak transgenik farelerden alınan beyin dokusunda nörodejeneratif hastalıkla ilişkili protein α-sinükleini tespit etme prosedürünü göstermektedir. Adımlar, hastalıkla ilişkili formlarını ölçmek için doku homojenizasyonu, santrifüjleme ve α-sinüklein proteininin ELISA...

Kaynak: Wulf, M., et.al. Nöromelanin granüllerinin proteomik profilinin LC-MS/MS Analizi için Lazer Mikrodiseksiyon Tabanlı Protokol. J. Vis. Uzm. (2021). Bu video, insan ölüm sonrası beyin dokusundan izole edilen nöromelanin granüllerinden (NMG'ler) peptit örneklerinin analizini göstermektedir. Peptitler önce yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) kullanılarak ayrılır ve daha sonra kütle-yük oranlarını (m/z) belirlemek için kütle spektrometresi ile analiz edilir. Hedeflenen peptitler,...

Kaynak: Zhi, L. ve ark., Yetişkin Farelerden Alınan Akut Striatal Dilimlerde Oksijen Tüketim Oranının Ölçümü. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, fare striatal beyin dilimlerinde mitokondriyal oksijen tüketim oranının (OCR) nasıl ölçüleceğini göstermektedir. Doku plakasını ve sensör kartuşunu hazırlama, bunları akı analizörüne yükleme adımlarını detaylandırır ve OCR modellerinin altında yatan hücresel süreçleri açıklar.

Kaynak: Josiah, S. S., ve diğerleri. Western Blotting Kullanılarak Nöronal K-Cl Ko-Taşıyıcı KCC2'nin İşlevleri ve Aktivitelerinin İncelenmesi. J. Vis. Uzm. (2022). Video, bir hücre lizatında fosforile potasyum-klorür kotransporter 2 (KCC2) proteinini tespit etme ve miktarını belirleme adımlarını göstermektedir. Bu işlem, fosforile edilmiş KCC2'yi izole etmek için immünopresipitasyonu ve izole edilen proteini ölçmek için kemilüminesansı içerir.

Kaynak: Lani-Louzada, R., et al. Kemirgenlerde cerrahi olarak indüklenen glokom için limbal vasküler pleksusun tam daire koterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, limbal vasküler pleksusun tam daire koterizasyonuna tabi tutulan kimyasal olarak sabitlenmiş sıçan retinalarından retinal ganglion hücrelerinin nicelleştirilmesini göstermektedir. İşlem, geçirgenlik, antikor boyama ve nükleer karşı boyamayı içerir, ardından yüksek göz içi basıncının retinal ganglion hücresi canlılığı üzerindeki...

Kaynak: Jensen, V. N., et al. Nöromüsküler Hastalığın Fare Modellerinde Solunum Kası Aktivitesi ve Ventilasyonun Tekrarlanan Ölçümü. J. Vis. Uzm. (2017). Bu video, serbestçe hareket eden bir ALS fare modelinde eşzamanlı pletismografi ve elektromiyografi sinyallerini kaydetme yöntemini göstermektedir. Prosedür, ALS faresindeki aksesuar kasların rolünü araştırmak için solunum modellerini izlemek için bir pletismografi odasının yanı sıra kas aktivitesini yakalamak için implante edilmiş...

Kaynak: Jiang, X., et al. Deneysel miyopinin bir murin modelinin teşviki ve değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, özel bir lens çerçevesinin takılması yoluyla bir farede miyopiye neden olma prosedürünü göstermektedir. Çerçeve, diş yapıştırıcısı ile açıkta kalan kafatasına sabitlenir ve odak noktasını retinanın arkasına kaydırmak için içbükey lensler yerleştirilir. Bu kurulum, miyopiye yol açan göz küresi uzamasını uyarır.

Kaynak: Jolly, S., et.al. Fare Beyin Bölümlerinde Üç Genin Ekspresyonunun Tespiti için Çift Floresan In Situ Hibridizasyonunun İmmünoetiketleme ile Birleştirilmesi. J. Vis. Uzm. (2016). Bu video, fare beyni bölümlerindeki iki RNA hedefinin ekspresyonunu görselleştirmek için çift floresan in situ hibridizasyonun kullanımını göstermektedir. Protokol, floresein, izotiyosiyanat ve digoksijenenin ile etiketlenmiş problar kullanılarak RNA'nın sıralı tespitini ve ardından duyarlılığı artırmak için...

Kaynak: Baleriola, J., et. al., Yüksek Çözünürlüklü In Situ Hibridizasyon Kullanılarak Beyin Bölümlerinde Aksonal Lokalize mRNA'ların Tespiti. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, floresan in situ hibridizasyon ve antikor boyama kullanılarak sabit fare hipokampal dilimlerinde kolinerjik aksonlar içinde mRNA'nın tespitini göstermektedir. Floresan mikroskobu, kolinerjik nöronlarda prob etiketli mRNA'ların ve kolin asetiltransferazın mekansal lokalizasyonunu ortaya çıkarır.

Kaynak: Zhang, J., et al. Retinal Şerit Sinapslarında Membran Reseptörlerinin Yüksek Çözünürlüklü Kantitatif İmmünogold Analizi. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, retinal sinapslarda nörotransmitter reseptör lokalizasyonunu görselleştirmek için bir elektron mikroskobu tekniğini göstermektedir. Retina bölümleri, membrana bağlı nörotransmitter reseptörleri sergileyen ve kolera toksin alt birimi B (CTB) ile işaretlenmiş retinal ganglion hücreleri içerir. İşaretleyiciler altın nanopartikül konjuge...

Kaynak: de March, C. A. et. al., Buhar Fazındaki Bir Koku Maddesi Tarafından Koku Reseptörü Aktivasyonunun Gerçek Zamanlı İn Vitro İzlenmesi. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, lüminesans ölçümü kullanarak rekombinant memeli hücrelerinde koku reseptörlerinin gerçek zamanlı aktivasyonunu izleme yöntemini göstermektedir. Koku bağlanması, G-protein aktivasyonunu ve cAMP üretimini tetikler, substrat bağlanması üzerine ışıldama yayan glosensör proteinlerini aktive eder ve reseptör yanıtının kantitatif bir...

Kaynak: Alluri, H., et al. Kan-Beyin Bariyeri Disfonksiyonunu İncelemek İçin İn Vitro İskemi-Reperfüzyon Yaralanma Modeli Olarak Oksijen-Glikoz Yoksunluğu ve Reoksijenasyon. J. Vis. Uzm. (2015). Video, sıçan beyni mikrovasküler endotel hücrelerinde (RBMEC'ler) sıkı bağlantı proteinlerinin ve stres liflerinin floresan lokalizasyonunu göstermektedir. Stresli tek tabakada, sıkı bağlantı proteinlerini etiketlemek için floresan etiketli antikorlar kullanılırken, florofor etiketli falloidin stres...

Kaynak: Eid, L. & Parent, M. İmmünohistokimya ve Elektron Mikroskobu için İnsan Olmayan Primat Beyin Dokusunun Hazırlanması. J. Vis. Uzm. (2017). Bu video, elektron mikroskobu için önceden gömme immünohistokimya kullanılarak aldehitle sabitlenmiş insan olmayan primat beyin dokusunun hazırlanmasını göstermektedir. Spesifik bir nöronal proteinin immüno-etiketleme adımlarını ana hatlarıyla belirtir, ardından renkli bir çökelti üreten bir peroksidaz reaksiyonu ile hedef proteinin elektron...

Kaynak: Evilsizor, M. N., et. al., Kriyoseksiyonlu Sıçan Beyin Dokusunda İmmünohistokimya için Primer: Mikroglia ve Nöronlar için Örnek Boyama. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, mikroglia ve nöronların mekansal düzenlemesini görselleştirmek için kriyoseksiyonel sıçan beyin dokusu üzerinde adım adım bir immünohistokimya boyama prosedürünü göstermektedir.

Kaynak: Kirchner, K.N., et al., Sıçan Beyin Dokusu için Hidrofobik Doku Temizleme Yöntemi. J. Vis. Uzm. (2020). Bu video, bir sıçan beyin dokusu örneğinin hidrofobik doku temizleme yöntemini göstermektedir. Numune metanol içinde sırayla dehidre edilir, lipitleri ve pigmentleri çözmek için bir diklorometan ve metanol karışımı ile muamele edilir ve tam doku temizliği için dibenzil etere aktarılır, bu da ince kesit almadan ayrıntılı görüntüleme sağlar.

Bu bakterileri tespit etmek için, açıkta kalan protein antijenleri ve inaktive edilmiş endojen fosfataz ile deparafinize edilmiş, rehidre edilmiş, bakteri ile enfekte olmuş bir insan beyni bölümü alın.

Virüs, serebral korteksteki piramidal nöronları enfekte eder ve eksprese edilen viral proteinler, inklüzyon cisimcikleri olarak bilinen intrasitoplazmik granüler yapılar içinde lokalize olur.

Parafini çıkarmak için yıkayın, ardından azalan alkol konsantrasyonlarını kullanarak dokuyu yeniden sulandırın.

Bu video, bir astrosit kültüründen hücre yüzeyi ve hücre içi proteinlerin izolasyonunu göstermektedir. Astrosit kültürü, endositozu inhibe etmek için buz üzerine yerleştirilir ve daha sonra hücre yüzeyi proteinleri bir biyotinilasyon reaktifi ile etiketlenir. Hücreler, biyotinile hücre yüzeyi proteinlerini ve biyotinile edilmemiş hücre içi proteinleri serbest bırakmak için parçalanır. Son olarak, streptavidin kaplı boncuklar, biyotinile hücre yüzeyi proteinlerini hücre içi proteinlerden ayırmak...

Bu video, yenidoğan fare beyninde murin sitomegalovirüs (MCMV) dağılımını incelemek için intraserebroventriküler enjeksiyon sürecini göstermektedir. Görünürlük için gelişmiş bir yeşil floresan proteini (EGFP) ifade etmek üzere tasarlanan MCMV, bir fare yavrusunun beyninin yan ventrikülüne enjekte edilir. Enjekte edilen virüs, beyin omurilik sıvısında dolaşır ve marjinal bölge, koroid pleksus ve subventriküler bölge dahil olmak üzere periventriküler bölgedeki hücreleri enfekte eder.

Bu video, gelişmekte olan bir beyinde Zika virüsü enfeksiyonunun in vitro modelinin kurulmasını göstermektedir. Kök hücrelerin rozetleri, nöral progenitör hücreler (NPC'ler) ve nöronlar içeren insan serebral organoidleri Zika virüsü ile enfekte olur. Virüs NPC'leri enfekte eder ve apoptozu tetikleyerek organoid gelişimini bozar.

Video, nöroinflamasyonu indüklemek için zebra balığı larvalarının beyinlerine lipopolisakkaritlerin (LPS) mikroenjeksiyonunu göstermektedir. Larvalar agaroz kaplı bir tabağa yerleştirilir, iğne beyin ventriküllerine yerleştirilir ve LPS enjekte edilir. Enjekte edilen LPS, nöroinflamasyona yol açan bir bağışıklık tepkisini tetikler.

Bu video, mitokondrilerinde bir floresan proteini eksprese eden genetik olarak değiştirilmiş astrositlerde mitokondriyal sağlığın değerlendirmesini göstermektedir. Protein, floresansı yeşilden kırmızıya değiştiği için mitokondriyal sağlıktaki değişiklikleri izlemeye yardımcı olur, bu da stres veya hasarı gösterir. Görüntüler çeşitli parametreler kullanılarak yakalanır ve analiz edilir.

Bu video, deneysel modelde aktif bir HIV enfeksiyonu oluşturmak için virüs RNA'sının konakçı genomuna entegre olduğu, çoğaldığı ve yayıldığı bir farenin beyninin korteksine kimerik HIV virüslerinin enjekte edilmesi prosedürünü göstermektedir.

Bu video, CNS enfeksiyonu olan bir fare modelinin oluşturulmasını gösterir. Emziren bir yavruya virüs hem intrakraniyal hem de intraperitoneal olarak enjekte edilir. Virüs yayılır ve CNS'yi enfekte ederek nöronal hücre ölümüne ve iltihaplanmaya neden olur. Yavru, hastalık ilerledikçe enfeksiyon semptomları açısından değerlendirilir.

Bu video, bir fare modelinde nöroinflamasyon oluşumunu göstermektedir. Mikro yaraları olan anestezi uygulanmış bir fare alınır ve yaralara bir psödokuz virüsü (PRV) aşısı uygulanır. Virüs periferik sinirleri enfekte eder, dorsal kök gangliyonlarına (DRG) yayılır ve ayrıca omurilik ve beyni enfekte eder. Sinir sistemindeki nöronların enfeksiyonu, nöronal hasara neden olan ve nöroinflamasyona yol açan bir bağışıklık tepkisine yol açar.

Video, nörodejenerasyonu indüklemek için yetişkin bir farede Zika virüsü süspansiyonunun intraserebral enjeksiyonunu göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir fare, stereotaksik bir çerçeveye sabitlenir ve enjeksiyon için açıkta kalan kafatasına bir delik açılır. Zika virüsünün bir süspansiyonu beyin dokusuna enjekte edilir. Viral enfeksiyon iltihaplanmaya neden olarak nörodejenerasyona yol açar.

Bu video, Listeria monocytogenes ile enfekte olmuş perfüze fare beyninden enfektif bakteri yükünün niceliğinin ölçülmesini göstermektedir.

Bu videoda, serbest FITC ve FITC yüklü ferritin ile bir zar eki üzerinde astrositler ve endotel hücreleri kullanılarak in vitro kan-beyin bariyeri (BBB) modeli aracılığıyla nüfuzu incelemek için bir yöntem gösterilmektedir. FITC-ferritin, endotel hücreleri üzerindeki reseptörlere bağlandı ve membran bariyerini alt odaya geçerken, serbest FITC sınırlı geçirgenlik gösterdi ve üst odacıkta kaldı.

Bu video, insan fetal nöral kök hücrelerini Zika virüsü ile enfekte etmek için bir prosedürü göstermektedir. Enfekte olmuş hücreler daha ileri çalışmalar için kullanılabilir.

Bu video, kan-beyin bariyerini (BBB) geçen patojenleri incelemek için bir in vitro modeli göstermektedir. Sıkı bağlantıları ifade eden mikrovasküler endotel hücreleri, üst odacıkta bir endotel tabakası oluştururken, nöronlar, astrositler ve mikroglia, gözenekli bir zarla ayrılmış alt odacıktaki beyin parankimini temsil eder. BBB modelindeki virüs enfeksiyonu, kandan beyne geçen patojeni taklit eder. Nörotropik bir virüs ortaya çıktıktan sonra, transsitoz yoluyla BBB'yi geçer, sinir hücrelerini...

Kaynak: Funes, S., et. al., İnsan Mikroglia Benzeri Hücreler: İnsan Sinaptozomları Kullanılarak İndüklenmiş Pluripotent Kök Hücrelerden ve İn Vitro Canlı Hücre Fagositoz Testinden Farklılaşma. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, pH'a duyarlı floresan boya etiketli sinaptozomlar kullanarak mikroglia benzeri hücrelerin fagositik kapasitesini incelemek için bir testi göstermektedir.

Parafini çözmek için dokuyu ksilene daldırın.

Hasarlı BBB'yi geçen ve beyne ulaşan florofor etiketli albümini intravenöz olarak enjekte edin.

Doku, nörolojik bozuklukların temel göstergeleri olan beyin damar duvarlarında amiloid fibrilleri ve anormal protein agregatlarını gösterir.

MCCH, beyne giden kan akışının azalması ile karakterizedir. Bu, serebral kan damarlarının endotel hücre tabakasına oksijen ve besin tedarikini sınırlayarak hücrelere zarar verir.

Hücre karışımını hücre dışı bir matris veya ECM çözeltisi içinde süspanse edin.

Bilateral ortak karotis arterleri ortaya çıkarmak ve gevşek bir şekilde bağlamak için bir boyun kesisi yapın.

Bu video, beyne göç eden otoreaktif T hücrelerini aktive etmek için miyelin türevi peptitleri bir adjuvan ile enjekte ederek deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) indükleme yöntemini göstermektedir. Boğmaca toksini, kan-beyin bariyeri geçirgenliğini artırmak için uygulanır ve bu T hücrelerinin ve diğer bağışıklık hücrelerinin beyne girmesine izin verir. Bu bağışıklık hücreleri demiyelinizasyona neden olarak sinir iletiminin bozulmasına ve EAE gelişimine yol açar.

Bu video, bir EAE fare modelinde kan-beyin bariyeri bozulmasını değerlendirmek için bir prosedürü göstermektedir. Farklı boyutlardaki floresan boyalar retro-orbital olarak enjekte edilir ve beynin kan damarlarında dolaşır. Daha küçük boya, boşluklardan beyin dokusuna sızarken, daha büyük boya, yalnızca bozulma şiddetli olduğunda girer ve bariyer hasarının derecesi ile ilişkilidir.

Bu video, elektrik stimülasyonu kullanarak anestezi uygulanmış bir sıçanın ponsunda doku hasarını veya enfarktüsünü indüklemek için bir prosedürü göstermektedir.

Bu videoda, döllenmiş zebra balığı embriyoları stereo mikroskop altında dekoryona tabi tutulur ve daha sonra bir kolesterol sentezi inhibitörüne maruz bırakılır, bu da larvalarda kan damarı yırtılmalarına ve beyin kanamalarının gelişmesine yol açar. Farklı kırmızı lekelerle tanımlanabilen hemorajik larvalar daha sonra daha fazla analiz için mikroskop altında ayrılır.

Bu video, lipopolisakkarit (LPS) kullanan bir sıçan modelinde kan-beyin bariyeri (BBB) bozulmasını ve serebral mikrokanamaları indükleme sürecini göstermektedir. BBB geçirgenliğinin artmasına ve ardından beyin dokusu hasarına yol açan bağışıklık tepkilerinin sırasını vurgular.

Bu video, bir sıçan modelinde Serebral mikrokanamaları (CMH'ler) tespit etmek için yapılan bir testi göstermektedir. CMH'ler, sızan kırmızı kan hücreleri (RBC'ler) tarafından tanımlanan kan-beyin bariyerinin bozulmasına bağlı beyin kanamalarıdır. Bir sıçan modelinde, sabit beyin dokusu kriyodare ile korunur, kesitlere ayrılır ve RBC'ler için hematoksilen-eozin ile boyanır, bu da CMH'lerin mikroskobik görüntülenmesine izin verir. Sızan eritrositler mikroskop altında kırmızı-turuncu olarak...

Video, yenidoğan hipoksik-iskemik beyin hasarını incelemek için bir fare modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Cerrahi olarak iskemiyi indükleme ve beyin hasarını şiddetlendirmek için hayvanı hipoksiye maruz bırakma adımlarını ana hatlarıyla belirtir. Son olarak, ortaya çıkan beyin lezyonlarının nasıl değerlendirileceğini gösterir ve fare modelinin daha fazla bilimsel araştırma için hazırlanmasını sağlar.

Bu video, elektrik sinyallerini ölçmek ve karşılaştırmak için iyon seçici ve iyontoforez mikroelektrotları kullanarak bir beyin dilimindeki hücre dışı boşluğun nasıl karakterize edileceğini gösterir. Bu işlem, boşluğun hacim fraksiyonunu ve bükülme derecesini belirlemeye yardımcı olur.

Bu videoda, glutamat Oksidaz ile kaplanmış bir Çoklu Elektrot Dizisi (MEA), anestezi uygulanmış bir farenin beyin dokusuna implante edilmiştir. Glutamat çözeltisi, MEA'nın glutamat seviyelerini tespit ettiği hücre dışı boşluğa enjekte edilir ve astrositler tarafından glutamat alımının gerçek zamanlı olarak izlenmesini sağlar.

Bu videoda, serebral kavernöz malformasyonları (CCM'ler) indüklemek için loxP bölgeleri ve bir östrojen reseptörüne kaynaşmış Cre rekombinaz ile çevrili Ccm2 genini taşıyan genetik olarak değiştirilmiş bir fare yavrusu kullanılmaktadır. 4-hidroksitamoksifen uygulaması, endotel hücrelerinde Cre'yi aktive ederek Ccm2'nin silinmesine ve beyinde CCM'lerin oluşumuna yol açar.

Bu video, inme araştırmalarında inflamasyon tepkilerini incelemek için beyin hücrelerinin ve sızmış bağışıklık hücrelerinin iskemik fare beyin dokularından enzimatik sindirim yoluyla izole edilmesi, ardından hücre kalıntılarının ve miyelinin yoğunluk gradyanlı santrifüjleme ile uzaklaştırılması prosedürünü göstermektedir.

Video, bir fare modelinde endovasküler perforasyon yoluyla subaraknoid kanamanın indüksiyonunu göstermektedir. Ortak karotis artere ve bifurkasyonuna erişmek için anestezi uygulanmış farenin boyun bölgesinde bir kesi yapılır. İntrakraniyal arter dalını delmek için arterlerden bir filament sokulur ve subaraknoid kanamaya neden olur.

Bu video, yenidoğan intraventriküler kanamasının bir sıçan modelini oluşturmak için bir yöntemi göstermektedir. Bu prosedürde, anestezi uygulanmış bir sıçan yavrusu beynin lateral ventrikülüne hemoglobin enjekte edilir. Hemoglobin oksidatif strese neden olur ve intraventriküler kanamayı simüle ederek heme serbest bırakır. Reaktif oksijen türleri ve enflamatuar sitokinler tarafından yönlendirilen beyin dokularında ortaya çıkan hasar, intraventriküler kanamanın yaygın bir sonucu olan ventriküler...

Bu video, iskemik inmeyi modellemek için yaşlı sıçanlarda ortak karotis arter veya CCA ligasyonu ile kalıcı distal orta serebral arter oklüzyonu veya MCAO gerçekleştirme prosedürünü göstermektedir. Bu, beyne giden kan akışını engelleyerek nöronal ölüme yol açar ve inme mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri incelemek için bir model oluşturur.

Bu video, bir subaraknoid kanama sıçan modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçan, intrakraniyal basıncı ve serebral kan akışını ölçmek için problarla implante edilir. Hedef bölge belirlenir ve iğne ön kiazmatik bir pozisyonda yerleştirilir. Otolog kan daha sonra subaraknoid boşluğa enjekte edilir, kafa içi basıncı arttırır ve serebral kan akışını azaltır ve model oluşturulur.

Bu video, bir kan-beyin bariyeri (BBB) endotel modeli boyunca lenfosit transgöçünün deneysel bir araştırmasını göstermektedir. İnsan beyni mikrovasküler endotel hücrelerinin (HBMEC'ler) tek tabakası in vitro olarak üretilir ve lenfositleri içeren periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC'ler) monotabakaya eklenir. Hücreler daha sonra lenfosit transgöçüne izin vermek için inkübe edilir ve göç eden hücreler akış sitometrisi kullanılarak ölçülür.

Bu video, orta serebral arter tıkanıklığına maruz kalan sıçanlardan alınan beyin dilimlerinde enfarktüs bölgesi ve beyin ödeminin değerlendirmesini göstermektedir. Enfarktüslü alanlar redoks boyaması kullanılarak tanımlanırken, görüntü analiz yazılımındaki mavi filtre ve eşik fonksiyonu, etkilenen hemisferdeki enfarktüs bölgesini ve ödemi ölçer.

Bu video, in vitro olarak fare beyni mikrovasküler endotel hücrelerinde transendotelyal elektrik direncini (TEER) değerlendirmek için bir yöntemi göstermektedir. Yüksek bir TEER değeri, sağlam endotel hücre bağlantılarını gösterirken, aktive edilmiş T hücrelerinin eklenmesi, bağlantı bariyerinin bozulmasını yansıtan TEER değerini düşürür.

Bu video, anjiyotensin II ile indüklenen hipertansif bir fare modelinde, sempatik sinir fonksiyonunu bozmak ve kan basıncını azaltmak için fenol kullanan renal arter sempatik denervasyonu için bir prosedürü göstermektedir.

Bu video, bir diş cıvatası kullanarak orta serebral arteri (MCA) tıkayarak bir sıçan modelinde iskemik inmeyi indükleme sürecini göstermektedir. Prosedür, karotis arterlerin bağlanmasını, dış karotis artere bir diş cıvatasının yerleştirilmesini ve MCA'dan beyne kan akışının bloke edilmesini, nöronal ölüme yol açmayı ve iskemik inmeyi taklit etmeyi içerir.

Bu video, sağ ortak karotis arteri bloke ederek ve fareyi düşük oksijenli bir ortama maruz bırakarak bir fare modelinde trombotik bir inmeyi çoğaltma prosedürünü göstermektedir. Bu işlem beyne giden kan ve oksijen akışını azaltarak kan pıhtısı oluşumuna ve beyin hasarına neden olur.

Bu video, beyaz madde içinde hedeflenen beyin koordinatlarına bir nitrik oksit inhibitörü enjekte ederek anestezi uygulanmış bir farede beyaz madde inmesini indüklemek için kesin tekniği göstermektedir. Bu, kan damarı daralmasına ve kan akışının engellenmesine yol açarak nöronal hasara ve beyin felci ile sonuçlanır.

Kaynak: Wanderer, S., et al. Tavşanda arteriyel kese mikrocerrahi bifurkasyon anevrizması modeli. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, elastaz ile tedavi edilmiş bir damar kesesi kullanılarak bir tavşanda deneysel bir anevrizma modelinin oluşturulmasını göstermektedir. Sağ CCA'nın bir segmenti çıkarıldıktan sonra, kese elastaz ile muamele edilir, daha sonra kan akışını eski haline getirmek için sol CCA'ya dikilir. Zayıflamış kese duvarlarında ortaya çıkan stres, anevrizma oluşumuna neden olur.

Kaynak: Sharma, T. P., et al., İnsan Donör Arka Segmentlerinde Göz İçi ve İntrakraniyal Basıncın Modülasyonu için Translaminar Otonom Sistem Modeli. J. Vis. Uzm. (2020). Bu video, translaminar otonom bir sistemde göz içi ve kafa içi basınçları simüle ederek translaminar basıncın retinal ganglion hücre sinyali üzerindeki etkilerini incelemek için bir insan gözünün hazırlanması prosedürünü göstermektedir.

Kaynak: Lani-Louzada, R., ve ark., Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, bir sıçan modelinde yüksek göz içi basıncının (GİB) indüksiyonunu ve izlenmesini göstermektedir. İşlem, limbal kan damarlarının koterize edilmesini içerir, bu da damar tıkanıklığı ve yüksek GİB ile sonuçlanır. Daha sonra sıçanın iyileşmesine izin verilir ve GİB, karşılaştırma için hem deneysel hem de kontrol gözlerinde düzenli...

Kaynak: Jungen, C., et al. Ex Vivo Langendorff Sisteminde İntrakardiyak Nöronların Kardiyak Elektrofizyoloji ve Aritmogenez Üzerindeki Etkisi. J. Vis. Uzm. (2018). Video, kalbin aritmiye duyarlılığını değerlendirmek için intrakardiyak sinir sistemini uyarmak için ex vivo bir tekniği göstermektedir. Bir perfüzyon aparatı kullanılarak, izole edilmiş bir fare kalbi oksijenli bir tampon ile perfüze edilir. İntrakardiyak sinir sistemi daha sonra aritmileri indüklemek için yüksek bir frekansta...

Kaynak: Hakim, M. A. et al., Fare Beyin Parankiminin Arteriolar Endotelinin İzolasyonu ve Fonksiyonel Analizi. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, bir fare beyninden izole edilen bir arteriyolar endotel tüpünün fonksiyonel analizini göstermektedir. Hem başlangıçta hem de farmakolojik stimülasyona yanıt olarak hücre içi kalsiyum seviyelerini ve zar potansiyelini ölçmek için adımları ana hatlarıyla belirtir.

Kaynak: Tang, X. et. al., Otolog Kanın İkili Enjeksiyonu ile Masif Pontin Kanaması. J. Vis. Uzm. (2021)Bu protokol, masif pontin kanamasını modellemek için bir sıçanın beyninin pontin bölgesine otolog kanın kontrollü infüzyonunu tanımlar. Amaç, lokalize basıncı artırarak lokalize bir beyin kanamasını simüle etmektir.

Kaynak: Alluri, H., et.al. Kan-beyin bariyeri disfonksiyonunu incelemek için in vitro iskemi-reperfüzyon hasarı modeli olarak oksijen-glikoz yoksunluğu ve reoksijenasyon. J. Vis. Uzm. (2015). Video, hipoksik ve besin yoksunluğundan yoksun koşulları simüle ederek oksijen-glikoz yoksunluğunun ve ardından yeniden oksijenasyonun sıçan beyni mikrovasküler endotel hücreleri (RBMEC'ler) üzerindeki etkisini göstermektedir. Bu koşullar, ATP'nin tükenmesine, hücre içi kalsiyumun artmasına ve hücre...

Kaynak: Gucciardo, E., et. al., Proliferatif Diyabetik Retinopatide Fibrovasküler Komplikasyonlar için Ex Vivo Doku Kültürü Modeli. (2019)Bu video, fibrin jel içine gömülü fibrovasküler dokunun ex vivo kültürleri için bir immün boyama protokolünü detaylandırmaktadır. Bu, proliferatif diyabetik retinopati ile ilişkili vasküler değişikliklerin ayrıntılı olarak görselleştirilmesini...

Kaynak: Talley Watts, L., et al. İn Vivo Konfokal Optik Görüntüleme ile Rose Bengal Fototrombozu: Tek Damar İnme Modeli. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, bir fare beyninde kan pıhtısı oluşumunu indüklemek için bir tekniği göstermektedir. Kraniyal bir pencereye ve inceltilmiş bir kafatasına sahip anestezi uygulanmış bir fare, yüksek yoğunluklu ışık kullanılarak ışığa duyarlı bir boyanın aktivasyonu yoluyla fototromboza uğrar. Bu süreç, damar duvarlarına zarar veren ve pıhtı oluşumunu tetikleyen ve...

Kaynak: Kuts, R. et al. Sıçanların Motor Korteksinde Lazere Bağlı Beyin Hasarı. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, sıçanlarda lazerin neden olduğu beyin hasarını takiben kan-beyin bariyeri (BBB) bütünlüğünün değerlendirilmesini göstermektedir. Kuyruk damarına bir izleme boyası enjekte edilir, bu da beyne dolaşmasına ve hasarlı BBB yoluyla dokuya sızmasına izin verir. Beyin daha sonra boyayı serbest bırakmak için çıkarılır ve işlenir. Boyanın floresan yoğunluğu, lazerin neden olduğu BBB hasarının...

Astrositler, kök hücrelerin nöronlara ve astrositlere olgunlaşmasını ve farklılaşmasını artıran sinyal molekülleri salgılar.

Bu videoda, periventriküler endotel hücrelerinden (PVEC'ler) gelen kemoçekici ipuçlarına yanıt olarak nöronlar arası göçü test etmek için bir yöntem gösterilmektedir. İnternöronlar, her iki tarafta PVEC'ler ve kontrol hücreleri ile merkezi bir bölmeye yerleştirilir. PVEC'lere yönelik artan göç, kemoçekici sinyallerine olumlu bir yanıt olduğunu gösterir.

Bu video, organoid olgunlaşmanın göstergesi olan çeşitli serebellar nöronlarda eksprese edilen spesifik hedef antijenleri tanımlamak için serebellar organoid dilimlerinin immünofloresan boyamasını göstermektedir.

Bu video, canlı nöronların yeşil ve ölü nöronların kırmızı göründüğü floresein diasetat (FDA) ve propidyum iyodür (PI) ile ikili boyama kullanarak karışık bir serebellar granül nöron ve glial hücre kültüründen nöronları tanımlama yöntemini gösterir.

Bu video, mutant Drosophila beyinlerinin mantar cisimciklerindeki fenotipik kusurları görselleştirmek için ayrıntılı bir immün boyama protokolünü göstermektedir. Protokol, mantar gövdesinin uygun morfolojik ve fonksiyonel gelişimini kolaylaştıran aksonal rehberlikte yer alan bir protein olan Fas2'ye karşı antikorların kullanılmasını içerir.

Bu video, EdU dahil edilmesi kullanılarak beyin dokusu kesitlerinde yeni çoğalan nöral kök hücrelerin boyanması prosedürünü ve ardından spesifik proteinleri görselleştirmek için immünofloresan ile hücre dinamiklerinin ve proliferasyonunun anlaşılmasını geliştirme prosedürünü göstermektedir.

Bu video, nükleer belirteç ekspresyonunu değerlendirmek ve hücre proliferasyonunu ve sinyalleşme aktivitesini belirlemek için floresan mikroskobu kullanılarak fare embriyonik kraniyofasiyal dokularından kriyoseksiyonların immünofloresan boyamasını göstermektedir.

Bu video, nöronal veziküllerin hareketlerini görselleştirmek için belirli floresan proteinlerle nasıl etiketlendiğini gösterir. İlk olarak, bir floresan proteini kodlayan bir plazmit, bir transfeksiyon ajanı ile inkübe edilir ve daha sonra bir nöron kültürüne sokulur. Daha sonra, veziküllerin hareketini izlemek için nöronların görüntüleri elde edilir ve analiz edilir.

Bu video, RA raportör hücreleri kullanılarak nörosfer hücrelerinden retinoik asit (RA) salgılanmasının ölçümünü göstermektedir. Nörosfer hücrelerinin RA raportör hücrelerle birlikte kültürlenmesi ve RA seviyelerini ölçmek için kolorimetrik bir RA testi gerçekleştirilmesinde yer alan adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, immünofloresan ve konfokal mikroskopi kullanarak nöronal popülasyon dağılımını görselleştirmek ve analiz etmek için embriyonik murin gastrointestinal sisteminin immün boyamayı göstermektedir.

Bu video, in vivo çalışmalar için medial ganglionik üstünlük (MGE) hücrelerinin viral etiketlenmesini ve transplantasyonunu göstermektedir. MGE hücrelerinin bir viral raportör ile transdüksiyonu, bu transdüksiyonlu hücrelerin bir fare yavrusunun korteksine nakledilmesi ve belirli internöron alt tiplerinde muhabir ekspresyonunun etkinleştirilmesi ile ilgili adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, yenidoğan sıçan beyninden oksitosin reseptörü açısından zengin çekirdeklerin izolasyonunu göstermektedir. Koronal dilimleme, ardından oksitosin reseptörü açısından zengin beyin çekirdeklerinin tanımlanması ve hassas bir şekilde delinmesi, daha fazla analiz için oksitosin reseptörü açısından zengin çekirdeklerin etkili bir şekilde ekstraksiyonunu sağlar.

Kaynak: Pericoli, G. et. al., Pediatrik Diffüz Orta Hat Gliomunun Canlı 3D Hücreli İmmünositokimya Testleri. J. Vis. Uzm. (2021)Bu video, anti-CD44 antikorları ile immünohistokimyasal etiketleme kullanarak pediatrik diffüz orta hat glioma hücre göçünü gözlemlemek için canlı hücre görüntülemeyi göstermektedir.

Kaynak: Jantzie, L. L., et. al. Sıçanlarda Prenatal Hipoksi-iskemi ile İntramniyotik Lipopolisakkarit Kullanılarak Prematüre Ensefalopatisinin Modellenmesi. J. Vis. Uzm. (2015)Bu video, uterus kan akışını kısıtlayarak ve LPS enjekte ederek, erken doğum çalışmalarıyla ilgili nöroinflamasyonu ve bozulmuş beyin gelişimini modelleyerek fetal sıçanlarda hipoksik-iskemik ve inflamatuar durumları indüklemek için bir protokol göstermektedir.

Kaynak: Larpthaveesarp, A., et. al. P10 Sıçanlarda Neonatal İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, bir sıçan yavrusunda Orta Serebral Arter Oklüzyonu modelinin kurulmasını göstermektedir. İç karotis arter (ICA) açığa çıkar ve kan akışını sınırlamak için bir bağ sabitlenir. Orta Serebral Artere ulaşmak için IKA'dan bir oklüd yerleştirilir. Daha sonra daha fazla analizden önce yavrunun iyileşmesine izin verilir.

Hastalık, otoreaktif bağışıklık hücrelerinin miyelin proteinlerine saldırmasını tetikler ve nöronal aksonları çevreleyen miyelin kılıfını bozar.

Kontrol bölümü, konsantrik plazma zarı katmanları içeren sıkıca paketlenmiş miyelin kılıflara sahip aksonlar sergiler. Yaralı bölüm, büyük boşluklarla dekompresyona uğramış miyelin sergiler.

Stres, duyguları düzenleyen bir beyin bölgesi olan medial prefrontal korteksteki nöronal aksonları çevreleyen lipid açısından zengin miyelin kılıfını bozarak oligodendrosit fonksiyonunu bozar.

Bu video, hedef proteine özgü antikor kaplı manyetik boncuklar kullanılarak kök hücre türevli motor nöron lizatlarından hedef protein ile çapraz bağlanmış DNA fragmanlarının immünopresipitasyonunu göstermektedir.

Bu video, Drosophila'nın dorsal longitudinal kaslarındaki nöromüsküler kavşakların yapısal bütünlüğünü değerlendirmek için bir protokolü göstermektedir. Prosedür, nöronların ve kasların iki farklı antikorla boyanmasını ve mutant ve vahşi tip sinekler arasındaki floresan modellerinin karşılaştırılmasını içerir. Mutant sineklerde nöronal lekelenmede bir azalma, kas yapısı bozulmadan kalırken nörodejenerasyonu gösterir.

Bu video, floresan etiketli nöronlara sahip bir test kimyasalının Caenorhabditis elegans üzerindeki nörodejeneratif etkilerinin değerlendirilmesini göstermektedir. Normal nöronlar, bozulmamış soma ve süreçlerin parlak floresansını gösterirken, azalmış floresan, şişmiş soma ve noktalanmış süreçler nörodejenerasyonu gösterir.

Bu video, TRPV1 agonisti resiniferatoksin (RTX) kullanılarak farelerde küçük bir fiber nöropati modeli oluşturmak için bir yöntemi göstermektedir. RTX'in farelere uygulanmasında yer alan adımları ana hatlarıyla belirtir ve RTX'in küçük çaplı duyusal nöronlarda nöronal ölümü nasıl indüklediğini ve böylece nöropati modelini nasıl oluşturduğunu açıklar.

Bu videoda, deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) kullanılarak multipl sklerozun bir fare modeli oluşturulmuştur. Fareye, otoreaktif T hücrelerini aktive eden bir bağışıklık tepkisini tetikleyen bir nöronal peptit ve bir adjuvan içeren bir emülsiyon enjekte edilir. Bunu, otoreaktif T hücrelerinin beyne sızmasına izin vererek kan-beyin bariyeri geçirgenliğini artırmak için bir boğmaca toksini (PTX) enjeksiyonu takip eder. Bu infiltrasyon, multipl sklerozun demiyelinizan durumunu taklit ederek...

Bu video, aquaporin-4'ü hedefleyen aktive edilmiş Th17 hücrelerini bir fare modeline aktararak felç oluşturma prosedürünü göstermektedir. Merkezi sinir sisteminde, aktive edilmiş Th17 hücreleri, aquaporin-4 eksprese eden astrositlerle etkileşime girerek, farede kuyruk ve uzuv felcine yol açan bir bağışıklık tepkisini tetikler.

Bu video, Boğmaca toksini ve miyelini taklit eden peptitler ve adjuvanlar içeren bir aşının uygulanması yoluyla bir fare modelinde motor disfonksiyonu değerlendirme sürecini ve ardından motor fonksiyonu değerlendirmek ve immün aktivasyon ve demiyelinizasyona bağlı olarak ortaya çıkan sinir hasarını değerlendirmek için koşu bandı testlerini göstermektedir.

Bu video, sağ beyin lezyonu olan bir hemiparkinson sıçanında motor fonksiyonu değerlendirmek için merdiven testini göstermektedir. Lezyon dopamin sinyalini bozar, sol pençe kontrolünü bozar, bu da sol merdivenlerde daha fazla pelet kalmasına neden olur ve bu da motor disfonksiyonu gösterir.

Bu video, vahşi tip veya ALS-mutant insan TDP-43 proteinini eksprese eden C. elegans'daki motor disfonksiyonu değerlendirmek için bir radyal hareket testinin kullanımını göstermektedir. Farklı seviyelerde vahşi tip veya mutant TDP-43 ekspresyonuna sahip solucanların sürünmesine izin verilir ve hareketleri, tahlil plakası üzerindeki merkezi noktadan kat edilen radyal mesafe ile ölçülür. Test, farklı C. elegans suşlarının kat ettiği mesafeye bağlı olarak hafif, orta ve şiddetli motor bozukluklar...

Bu video, kültürlenmiş motor nöronlar, Schwann hücreleri ve miyotüpler kullanılarak kasın değerlendirilmesini ve ardından kasılmayı engellemek için bir nöromüsküler bloker ile tedaviyi göstermektedir. Renk kodlu zaman hareketi grafikleri, renk kodlu bir zaman hareketi grafiğini gösterir. Kırmızı en hızlı hareketi, mavi ise en yavaş hareketi gösterir.

Bu video, Yakınlık Ligasyon Testi (PLA) kullanılarak Drosophila nöromüsküler kavşakta (NMJ) protein-protein etkileşimlerinin görselleştirilmesini göstermektedir. Vücut duvarlarını izole ettikten sonra, etkileşen proteinler birincil antikorlar ve PLA ile konjuge ikincil antikorlar ile incelenir. Etkileşen proteinlerin yakınlığı, probların konektör oligonükleotidleri ile bağlanmasını kolaylaştırır, dairesel DNA oluşturur ve bu daha sonra yuvarlanan daire amplifikasyonu ile amplifiye edilir.

Kaynak: Wagner, K. et al., eGFP Etiketli Proteinler Kullanılarak Drosophila fotoreseptör hücrelerinde membran protein kaçakçılığının incelenmesi. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, eGFP etiketli TRPL proteinleri kullanılarak Drosophila fotoreseptör hücrelerinde membran protein trafiğinin görselleştirilmesini göstermektedir. Görüntüleme için transgenik sineklerin hazırlanmasını, fotoreseptör hücrelerinin floresan görüntülerinin yakalanmasını ve rabdomerelerde nispi eGFP floresansının ölçülmesiyle...

Kaynak: Deseure, K., et al. Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Sıçanın İnfraorbital Sinirinin (IoN-CCI) Kronik Daralma Yaralanması. J. Vis. Uzm. (2015). Bu video, infraorbital siniri daraltarak bir sıçan modelinde nöropatik ağrıyı indüklemek için bir yöntemi göstermektedir. İnfraorbital siniri açığa çıkardıktan ve onu daraltmak için ligatürleri bağladıktan sonra, yaralanma bölgesindeki bağışıklık tepkisi, ağrı sinyallerini beyne ileten komşu nöronların uyarılabilirliğini arttırır.

Kaynak: Brakkee, E. M., et al. Sıçanlarda Tibial Nöroma Transpozisyon Modelinde Cerrahi ve Davranışsal Test. J. Vis. Uzm. (2023). Bu videoda, bir sıçan tibial nöroma transpozisyonu (TNT) modeli oluşturmak için bir prosedür gösterilmektedir. Anestezi uygulanmış bir sıçanın arka bacağındaki tibial siniri açığa çıkardıktan sonra, siniri kesin. Daha sonra, deri altı bir tünel oluşturun, kopan siniri tünelden geçirin ve yerine dikin. Reinnervasyon için bir hedefin yokluğunda, kopmuş sinirden...

Kaynak: Lee, D. et. al., Farelerde Gürültüye Bağlı İşitme Kaybı için Değiştirilmiş Deneysel Koşullar ve İşitme Fonksiyonu ve Dış Tüylü Hücre Hasarının Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2023)Bu video, farelerde gürültüye bağlı işitme kaybı prosedürünü göstermektedir. Yüksek sesli ses, iç kulaktaki tüy hücrelerine zarar verir ve işitme yollarını bozarak işitme bozukluğuna neden olur.

Kaynak: Lee, D., et. al. Farelerde Gürültüye Bağlı İşitme Kaybı için Değiştirilmiş Deneysel Koşullar ve İşitme Fonksiyonunun ve Dış Tüylü Hücre Hasarının Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2023)Bu video, bir farede işitsel beyin sapı tepkisinin (ABR) ölçümünü göstermektedir. Elektrotlar başın üzerine, kulağın arkasına ve anestezi uygulanmış bir farenin kuyruğunun yanına yerleştirilir. Çeşitli yoğunluklarda akustik uyaranlar verilir ve üretilen elektrik sinyalleri dalga formları olarak kaydedilir.

Kaynak: Olmstead, D. N., et al., Farelerde Fasiyal Sinir Aksotomi: Yaralanmaya Motonöron Tepkisini İncelemek İçin Bir Model. J. Vis. Uzm. (2015). Bu video, bir farede fasiyal sinir ezilme prosedürünü göstermektedir, burada önemli yer işaretlerinden künt diseksiyon, stilomastoid foramende fasiyal sinir gövdesini ortaya çıkarır. Forseps daha sonra sinir gövdesini sıkıştırmak, aksonal hasara neden olmak ve nöronal sinyal iletimini bozmak için kullanılır.

Kaynak: Cheah, M., et al. Duyusal akson rejenerasyonu için bir model olarak dorsal kök ganglion enjeksiyonu ve dorsal kök ezilme yaralanması. J. Vis. Uzm. (2017). Bu video, dorsal kök gangliyonlarına (DRG'ler) viral bir süspansiyon enjekte etmek ve anestezi uygulanmış bir sıçanda dorsal kök ezmesi yoluyla kontrollü bir aksonal yaralanmayı indüklemek için adım adım bir prosedürü göstermektedir. Protokol, DRG'lerin açığa çıkarılmasını, aksonal rejenerasyonu kolaylaştırmak için büyümeyi teşvik...

TUNEL testini kullanarak apoptotik hücre ölümünü tespit etmek için, beyin dilimini proteinaz-K enzimi ile tedavi edin.

Floresan mikroskobu kullanarak, aksonal şişliklerde ve bağlantı kopmalarında ilerleyici bir artış gösteren yaralı siniri görselleştirin.

İlaç kapsüllemesi, tümör hücresi özgüllüğünü arttırır ve nörotoksisiteyi azaltır.

Bu video, farelerde Travmatik Beyin Hasarı (TBI) oluşumunu göstermektedir. Kafatası açığa çıkarıldıktan sonra, TBI bölgesi işaretlenir. Fare daha sonra TBI cihazının altına yerleştirilir. Darbe, metal çubuğun kaldırılması ve kafatası ile temas halinde olan çarpma tertibatının üzerine serbestçe düşmesine izin verilmesiyle sağlanır.

Bu video, nöronal olgunlaşmayı ve bağlantıyı analiz etmek için mikroakışkan bir çip içinde kültürlenen sıçan hipokampal nöronlarının immünofloresan boyamayı göstermektedir.

Bu video, fare primer serebellar granül nöronlarında bir nöronal yaralanma modelinin oluşturulmasını göstermektedir. Uyarıcı bir nörotransmitter reseptör agonisti olan NMDA ve bir ko-agonist olan glisin kullanarak nöronal hasarın indüklenmesinde yer alan adımları ana hatlarıyla belirtir. NMDA ve glisin, spesifik nöronal reseptörlere bağlanarak aşırı uyarılmasına neden olur ve nöronal hücre hasarına ve ölümüne yol açan büyük bir hücre içi kalsiyum akışına neden olur.

Bu video, belirli bir presinaptik proteinin dağılımını ölçmek için bir fare beyin diliminin immünofloresan boyamasını göstermektedir. İşlem, spesifik olmayan bölgelerin bloke edilmesini, hedef protein için birincil antikorların ve bir referans işaretleyicinin uygulanmasını, ardından ikincil antikor etiketlemesini ve nükleer karşı boyamayı içerir. Referans işaretleyici, tutarlı bir taban çizgisi sağlayarak doğru niceleme sağlar ve presinaptik proteinin dağılımı, konfokal mikroskopi kullanılarak...

Bu videoda, yüksek çözünürlüklü görüntüler üretmek için hem taramalı elektron mikroskobu (SEM) hem de transmisyon elektron mikroskobu (TEM) unsurlarını birleştiren bir teknik olan büyük ölçekli taramalı transmisyon elektron mikroskobu (STEM) kullanarak zebra balığı larva beyin hasarını araştırmak için bir yöntem gösterilmektedir. Beyin hasarını tanımlamak için numunelerin hazırlanması ve yüksek çözünürlüklü STEM görüntülerinin elde edilmesiyle ilgili adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, anestezi hazırlığından fasiyal sinir yaralanması indüksiyonuna kadar adımları detaylandıran bir sıçan modelinde cerrahi protokolü göstermektedir. Bu protokol, tıbbi araştırmalarda sinir rejenerasyonu ve cerrahi teknikleri incelemek için yararlıdır.

Bu video, orta hat kafatası kesisi yaparak, kafatasını delerek ve beyin korteksini ortaya çıkarmak için kemik flecini çıkararak ve travmayı indüklemek için yüksek basınç uygulayarak bir farede açık kafatası travmatik beyin hasarına neden olma prosedürünü göstermektedir. Yara daha sonra fare modelini sonraki deneylere hazırlamak için dikilir.

Bu video, doğal beyin ölümünü taklit eden bir balon kateter aracılığıyla kontrollü kafa içi basıncı artırarak bir fare modelinde beyin ölümünü indükleme prosedürünü göstermektedir.

Bu video, bir lazer kullanarak sıçan motor korteksinde hassas, kontrollü beyin hasarı oluşturmak için bir prosedürü göstermektedir.

Bu video, primer nöral kök ve progenitör hücrelerin yanı sıra nöronlardaki modifiye sialoglikoproteinlerin biyotinilasyonunu ve floresan etiketlemesini ve bunların floresan mikroskobu kullanılarak görselleştirilmesini göstermektedir.

Bu videoda, kontrollü basınçlandırma yoluyla bir polimer diyaframı parçalayarak bir şok dalgası oluşturmak için bir şok tüpü cihazı kullanılmaktadır. Şok dalgası, güvenli bir torbada bulunan beyin dilimlerini etkiler ve beyin diliminde travmatik yaralanmaya neden olur.

Bu video, geri dönüştürülmüş sinaptik veziküllerin optik analizi için kültürlenmiş nöronların hazırlanması prosedürünü göstermektedir. İşlem, sinaptik vezikül proteinlerinin floresan etiketlemesini ve nöronlar içindeki geri dönüştürülmüş vezikülleri etiketlemek ve görselleştirmek için immün boyamayı içerir.

Bu video, insan kaynaklı pluripotent kök hücre türevli nöronlarda (hiPSCN'ler) gerilme yaralanmasını indükleme sürecini göstermektedir. Hücreler, silikon bir zar takılı dipsiz, çok kuyulu bir plakaya alınır. Hücre iskeleti bozulmasını ve hücre zarı hasarını indüklemek için zar üzerine kontrollü mekanik stres uygulanır ve hücrelerde gerilme yaralanması fenotipine neden olur.

Bu video, anestezi uygulanmış Drosophila sineklerinde gazla çalışan bir çarpma tertibatına sahip bir çarpma cihazı kullanarak kapalı kafa travmatik yaralanması meydana getirme prosedürünü göstermektedir. Yaralanma nöronal fonksiyonu etkiler ve yürüme yeteneğini bozar.

Bu video, farelerde kafatasına maruz kalma ve beyin lezyonu oluşturmayı içeren kortikal bıçak yaralanması prosedürünü göstermektedir. CNS travmasını, inflamasyonunu ve onarım mekanizmalarını incelemek için astrositlerin nöroprotektif bir tepkisi olan reaktif astrogliozu indükler.

Videoda, yanal sıvı perküsyon cihazı (LFPI) kullanarak travmatik beyin hasarının (TBI) bir fare modelini oluşturmak için bir yöntem gösterilmektedir. Fareye anestezi uygulandıktan sonra, kafatası üzerinde bir pencere oluşturularak beyin açığa çıkarılır. Pencereye tuzlu su dolu bir kanül takılır ve daha sonra LFPI'ye bağlanır. Cihazın sarkacı, travmatik bir beyin hasarına neden olan bir basınç darbesi oluşturmak için serbest bırakılır.

Bu video, bir fare modelinde travmatik beyin hasarını (TBI) indükleme prosedürünü göstermektedir. Kafatasında bir açıklık oluşturmak için açıkta kalan bir kafatasına sahip anestezi uygulanmış bir fare alınır ve daha sonra bir darbe cihazı kullanılarak kontrollü bir kortikal yaralanma indüklenir. Yaralanma beyin dokusuna zarar vererek bilişsel işlev ve motor koordinasyonun bozulmasına neden olur.

Bu video, sıçanlarda torasik omurilik hemiseksiyonu yapmak için cerrahi prosedürü göstermektedir. T8 omurilik segmentini ortaya çıkarmak, bir taraftaki nöral yolları bozmak için hemiseksiyonu gerçekleştirmek ve ameliyat sonrası bakım sağlamak için adımları ana hatlarıyla belirtir.

Bu video, yüksek güçlü bir lazer kullanarak Drosophila larvalarında hedeflenen nöronal hasarı indüklemek için bir yöntemi göstermektedir. Larvaları mikroskop altında konumlandırdıktan sonra, düşük güçlü bir lazer floresan nöronları tarar ve daha sonra lokalize hasarı indüklemek için lazer gücü artırılır. Yaralanma, artan floresan ve yaralanma bölgesinde bir krater ile doğrulanır.

Video, Drosophila'da kapalı kafa travmatik beyin hasarını (TBI) indüklemek için Yüksek Etkili Travma (HIT) cihazının kullanımını göstermektedir. TBH, nöronal fonksiyonu etkileyen mekanik beyin travmasına neden olur ve bu da zamanla nörodejenerasyon ve mortaliteye yol açar.

Bu video, drosophila beyninde penetran travmatik beyin hasarının indüksiyonunu göstermektedir. Yeni çıkan sinekler seçilir, uyuşturulur ve floresan donanımlı bir stereo mikroskop altında konumlandırılır. GFP eksprese eden mantar gövdesi tanımlanır ve yaralanmaya neden olmak için bir Minutien pimi yerleştirilir. Sineklerin daha ileri çalışmalar için iyileşmesine izin verilir.

Kaynak: Shandra, O. et al., Tekrarlayan Yaygın Travmatik Beyin Hasarının Fare Modelinde Travma Sonrası Epilepsinin İndüklenmesi. J. Vis. Uzm.

Bu video, bir lateral sıvı perküsyon yaralanması (FPI) cihazı kullanılarak bir sıçanda travmatik beyin hasarının (TBI) indüksiyonunu göstermektedir. Prosedür, üzerine bir kanülün tutturulduğu dura materyali ortaya çıkarmak için anestezi uygulanmış bir sıçanın kafatasında bir delik oluşturmayı içerir. Sıçan daha sonra beyne ulaşan bir basınç dalgası üreten, nöral hücre ölümüne ve vasküler hasara neden olarak TBH'yi taklit eden bir basınç dalgası üreten cihaza...

Kaynak: Yang, Z., et.al. Farelerde tekrarlayan sarsıntılı kafa travması modeli. J. Vis. Uzm. (2016). Bu video, bir elektromanyetik darbe cihazı kullanılarak bir farede tekrarlayan sarsıntılı kafa yaralanmalarının indüksiyonunu göstermektedir. Prosedür, darbe ucunun anestezi uygulanmış bir farenin kafatasındaki interfrontal ve lambdoid sütürler arasına yerleştirilmesini ve darbe derinliğini hassas bir şekilde ayarlamak için bir prob ucunun kullanılmasını içerir. Darbe, hafif travmatik beyin...

Kaynak: Logsdon, A. F., et al. Kemirgenlerde Kapalı Kafa Hafif Travmatik Beyin Hasarının Klinik Öncesi Değerlendirmesi için Düşük Yoğunluklu Patlama Dalgası Modeli. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, basınçlı gaz şoku tüpü kurulumu kullanan bir fare modelinde kapalı kafa hafif travmatik beyin hasarının indüksiyonunu göstermektedir. Üretilen basınç dalgası polyester zarı yırtarak farenin kafasına bir şok dalgası gönderir ve bu da kafatası içinde hızlı beyin hareketine neden olarak hafif bir travmatik...

Kaynak: Macheda, T., et. al. Farelerde Hafif Travmatik Beyin Hasarının Elektromanyetik Kontrollü Kapalı Kafa Modeli. J. Vis. Uzm. (2022)Bu video, stereotaksik çerçeve kullanan bir fare modelinde kapalı kafa yaralanmasına neden olma prosedürünü göstermektedir. Kontrollü etki, hafif travmatik beyin hasarını taklit ederek, araştırmacıların yaralanma sonrası refleksleri ve davranışları ölçerek nörolojik etkileri ve iyileşmeyi incelemelerine olanak tanır.

Kaynak: Elzat, E. Y. Y., et al., Minimal İnvaziv Tekniğe Dayalı Bir Fare Kontüzyonu Omurilik Yaralanması Modelinin Oluşturulması. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, bir omurilik yaralanması koaksiyel platformu kullanılarak bir fare modelinde T9 seviyesi omurilikte bir kontüzyon yaralanmasını indükleme yöntemini göstermektedir. T9 seviyesindeki omuriliğe bir ağırlık düşer ve bu da hemen doku renk değişikliğine ve şişmeye neden olan bir kontüzyon oluşturur.

Kaynak: Lakshman, N., et al. Minimal Omurilik Yaralanması Fare Modelinde Endojen Nöral Kök Hücre Aktivasyonunu Değerlendirmek İçin Bir Nörosfer Testi. J. Vis. Uzm. (2018). Bu video, bir fare omurilik yaralanması modelinde nöral kök hücrelerin (NSC'ler) aktivasyonunu ve göçünü göstermektedir. Omuriliği ortaya çıkarmak için, anestezi uygulanmış bir fareden omurganın torasik bölgesinden bir omur çıkarılır. Daha sonra omuriliğin beyaz maddesinde, merkezi kanalı koruyan bükülmüş bir iğne...

Kaynak: Kumar, S., et. al. Omurilik Yaralanması Sonrası Basınç Ülserlerinin Fare Modeli. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, farelerde omurilik yaralanmasının ayrıntılı bir indüksiyonunu göstermektedir. Anestezi uygulanan fare, T9-T10 omurlarını ortaya çıkarmak için diseke edilir ve dikenli süreçleri çıkarılır. Açıkta kalan omurilik daha sonra yaralanmaya neden olmak için kesilir. Cerrahi alan daha sonra kapatılır ve farenin iyileşmesine izin verilir.

Bu video, başarılı içselleştirmeyi doğrulamak için biyotinilasyon ve ardından hücre lizisi, streptavidin bazlı protein ekstraksiyonu, denatürasyon ve Western blot analizi kullanarak fare kortikal astrositlerinde hedef protein içselleştirmesini değerlendirmek için bir yöntem gösterir.

Bu videoda, desenli protein bölgeleri üzerinde hipokampal nöronları kullanarak protein aktivitesini değerlendirmek için bir yöntem gösterilmektedir. Nöronlar, test protein bölgelerinde itme ve kontrol protein bölgelerinde bağlanma sergileyerek çekici veya itici protein aktivitesinin etkilerini vurgular.

Bu video, anestezi uygulanmış bir sıçanda episkleral ven içine hipertonik salin enjekte edilerek glokom indüksiyonunu göstermektedir. Salin, Schlemm kanalı yoluyla trabeküler ağa girer ve sulu hümör çıkışını engelleyen ve göz içi basıncını artıran doku skarlaşmasına neden olur. Yüksek basınç retinal ganglion hücrelerine zarar vererek glokoma yol açar.

Beyin fonksiyonu için gerekli olan glutamik asit dekarboksilaz veya GAD enzim izoformları dahil olmak üzere proteinleri serbest bırakmak için dokuyu bir homojenizatör ile homojenize edin.

Bu video, anestezi uygulanmış bir hayvanda optik sinire cerrahi olarak erişme ve fokal demiyelinizasyonu indüklemek için hassas bir şekilde lizolesitin verme prosedürünü göstererek daha fazla çalışma için nöropatolojik koşullar yaratır.

Dilimi floresan yanlış nörotransmiterler veya FFN'ler içeren aCSF'de inkübe edin.

Bu video, Theiler'in Murin Ensefalomiyelit Virüsü (TMEV) ile enfekte olmuş bir farede elleçlemeye bağlı nöbetlerin indüksiyonunu göstermektedir. Hiperuyarılabilir nöronlara sahip olan enfekte fare, dış fiziksel uyaranlara maruz kalır. Bu maruziyet strese neden olarak nöronlarda anormal elektriksel aktiviteye yol açar ve bu da nöbetlerle sonuçlanır.

Bu video, epilepsi ile ilişkili gen mutasyonlarına sahip transgenik bir farede, kontrollü bir odada vücut ısısını kademeli olarak artırarak ısıya bağlı nöbetleri indükleme prosedürünü göstermektedir. Bu protokol, epilepsi için nöbet mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri incelemek için kullanılır.

Bu video, kortikal uyarıcı piramidal nöronlarda ışıkla aktive olan katyon kanallarını eksprese eden transgenik bir fareden alınan koronal kortikal dilimlerde iktal olayların indüksiyonunu göstermektedir. Dilim bir kayıt odasına yerleştirilir ve yüzeysel kortikal tabakaya bir kayıt elektrodu yerleştirilir. Potasyum kanallarını tıkayan nöbet indükleyici bir ilaçla perfüzyon üzerine, nöronlar hipereksitabl hale gelir ve spontan iktal olaylar oluşturur. İsteğe bağlı iktal olaylar oluşturmak için,...

Bu video, bir GABA-A reseptör antagonisti olan pentilentetrazol (PTZ) enjeksiyonları kullanılarak farelerde epilepsiyi indükleme sürecini göstermektedir. PTZ'nin tekrarlanan intraperitoneal uygulaması, klorür iyonu akışını inhibe ederek, inhibitör nörotransmisyonu bozarak ve nöbetleri tetikleyen nöronlarda hipereksitabiliteye yol açarak nöbet eşiğini aşamalı olarak düşürür. Bu süreç, kronik epilepsiyi taklit eden tutuşma ve spontan nöbetlerin gelişmesine neden olur.

Kaynak: Soukupová, M., et al. Serbest hareket eden sıçanlarda EEG kayıtları sırasında uyarıcı amino asitlerin mikrodiyalizi. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, kronik epilepsi indüksiyonu olan sıçanlarda hücre dışı uyarıcı nörotransmitter seviyelerinin değerlendirmesini göstermektedir. Beyne bir mikrodiyaliz probu implante ettikten ve elektroensefalografi (EEG) kullanılarak nöbet olmadığını doğruladıktan sonra, epileptik sıçanlarda yüksek nörotransmitter seviyelerini değerlendirmek için hücre dışı...

Kaynak: Schönherr, S., et. al. Fare Amigdalasındaki Glutamat Reseptörlerinin Girişe Özgü Düzenlemesini İncelemek için Kombine Optogenetik ve Donma Kırığı Replika İmmün Etiketleme. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, elektron mikroskobu için fare beyin dokusunun donarak kırılmış kopyalarının immüno-etiketlemesini göstermektedir. Kırılmış ve kaplanmış kopyalar, reseptörleri açığa çıkarmak için sindirilir. Primer ve altın etiketli sekonder antikorlar, spesifik nöronal membran reseptörlerini etiketlemek...

Bu videoda, glioblastoma ve mikroglia hücreleri bir polimer matris çözeltisi ile karıştırılır ve hücreleri gömerek bir jelin oluştuğu gözenekli bir oda ekine aktarılır. Mikroglia, glioblastoma hücrelerinin gözenekli ek yoluyla göçünü uyararak, tümör hücresinin çevre dokuya istilasını taklit eder, Hücreler daha sonra sabitlenir ve daha fazla analiz için hazırlanır.

Bu videoda, floresan olarak işaretlenmiş mitokondrinin santrifüjleme yoluyla glioblastoma kök hücrelerine (GSC'ler) transferini sağlayan bir yöntem gösterilmektedir. Donör mitokondrinin başarılı alımı ve fonksiyonel entegrasyonu, konfokal mikroskopi kullanılarak floresanın tespit edilmesiyle doğrulanır.

Kaynak: Guyon, J., et al. Glioblastoma için bir 3D sferoid modeli. J. Vis. Uzm. (2020)Video, tümör hücresi istilasının üç boyutlu küresel bir modelinin oluşturulmasını göstermektedir. Sferoidler, insan beyni tümör hücrelerinden oluşur ve bir kollajen matrisine gömülür. Küresel periferdeki tümör hücreleri, kollajeni parçalamak için proteazlar salgılayan ve çevredeki matrisi istila etmek için ilerleyen istilacı bir fenotip benimser.

Kaynak: Lim, M., et al. Kanser hücrelerinin iç karotis arter enjeksiyonu ile beyin metastazının modellenmesi. J. Vis. Uzm. (2022)Bu videoda, anestezi uygulanmış bir fare, beyne hedeflenen iletimi kolaylaştırmak için kanser hücrelerinin ortak karotis artere (CCA) enjekte edildiği cerrahi bir prosedürden geçiyor. Prosedür, enjekte edilen hücreleri iç karotis artere (ICA) yönlendirmek için karotis arterlerin hassas bir şekilde dikilmesini ve manipüle edilmesini içerir ve zamanla beyinde tümör...

Kaynak: Ear, P. H., et. al. İnce Bağırsak Nöroendokrin Tümör Sferoidlerinin Kurulması ve Karakterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2019)Bu video, ince bağırsak nöroendokrin tümör sferoidlerinin immünofloresan boyamasını göstermektedir. Sferoidler sabitlenir, geçirgen hale getirilir ve bloke edilir ve daha sonra birincil ve ikincil antikorlarla inkübe edilir. Floresan mikroskobu altında monte edilmeden ve görüntülenmeden önce leke çekirdeklerine bir boya eklenir.

Kaynak: Mudduluru, G., et. al. Kanser Hücresi Göçü ve İstilasının Empedans Tabanlı Gerçek Zamanlı Ölçümü. J. Vis. Uzm. (2020)Bu video, glioblastoma hücre istilasını ve göçünü ölçmek için empedans tabanlı bir testi göstermektedir. Hücreler hücre dışı matrisi bozar, mikro gözenekli zarlardan geçer ve elektrotlara yapışarak empedans oluşturur. Bu gerçek zamanlı analiz, kanser araştırma uygulamaları için istilacı potansiyellerini yansıtıyor.

Kaynak: Bolcaen, J., et. al., Bir Mikro Işınlayıcı Kullanılarak Bir Glioblastoma Sıçan Modelinin PET ve MRI Kılavuzlu Işınlaması. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, beyin tümörüne neden olan glioblastoma hücrelerini prefrontal kortekse stereotaktik olarak enjekte ederek bir glioblastoma sıçan modeli oluşturma prosedürünü göstermektedir.

Kaynak: Mendez, F. M. et al., Murin Beyin Tümörü Nörosferleri Kullanılarak Doğal Kromatin İmmünopresipitasyonu. J. Vis. Uzm. (2018). Bu video, doğal kromatin immünopresipitasyonu kullanılarak bir fare beyin tümöründen türetilen nörosfer hücrelerinden protein-DNA komplekslerinin izolasyonunu göstermektedir. Aşağı akış analizi için DNA'yı serbest bırakmak için kromatin hazırlama, immünopresipitasyon, yıkama ve protein sindirimi adımlarını detaylandırır.

Kaynak: Núñez, F. J., et al. Parafin Gömülü 3D Glioma Nörosfer Kültürlerinde İmmünohistokimya ile Gliomdaki Biyobelirteçlerin Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2019). Bu video, parafine gömülü beyin tümörü nörosferlerinde tümör biyobelirteçlerini etiketlemek için immünohistokimyasal bir tekniği göstermektedir. Nörosfer bölümleri parafin uzaklaştırma ve rehidrasyona tabi tutulur, ardından biyobelirteç bölgelerini ortaya çıkarmak için tedavi uygulanır. Birincil ve ikincil antikorlar daha sonra bu...