Bir Sıçan Modelinde Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı Gerçekleştirme

Özet

Kaynak: Kuts, R., et al. Sıçanların Motor Korteksinde Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı. J. Vis. Uzm. (2020)

Bu video, bir lazer kullanarak sıçan motor korteksinde hassas, kontrollü beyin hasarı oluşturmak için bir prosedürü göstermektedir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Lazer kaynaklı beyin hasarı deneysel prosedürü

1. Sıçanı oksijende% 2 izofluran karışımı ile uyuşturun ve spontan ventilasyona izin verin. Geri çekilme refleksinin olup olmadığını görmek için kuyruğu forseps ile sıkıştırarak yeterli anestezik derinliği kontrol edin.
2. Rektal sıcaklık ayarlı bir ısıtma yastığı kullanarak, deney prosedürü boyunca farenin çekirdek vücut sıcaklığını 37 ° C'de tutun.
3. Yerel saçları bir tıraş makinesiyle alın ve% 70 alkol ve% 0.5 klorheksidin glukonat ile dezenfekte edin. Dezenfeksiyon adımını iki kez daha tekrarlayın.
   NOT: Ameliyat kesisi yaklaşık 3 cm genişliğinde olmalıdır. Kesi alanının etrafındaki tüyleri en az 2 cm çıkarın.
4. Fareyi yüzüstü pozisyonda stereotaksik bir kafa tutucusuna yerleştirin. Kafa derisini yanal olarak yansıtmak ve Bregma ile Lambda arasındaki alanı ortaya çıkarmak için 3 cm'lik bir kesi yapın.
5. Burun konisinden anesteziyi koruyun.
6. Neodimyum-YAG (Nd-YAG) lazer (tepe dalga boyu 1064 nm) kullanarak, sağ hemisferin üzerindeki kafatasının açıkta kalan bölgesine 1 s darbe süresi ile 50J X 10 nokta uygulayın.
7. Bir lazer ışını üretmek için cihazın lazer üreten kısmının açıkta kalan alandan 2 mm uzakta olduğundan emin olun. 50J X 10 nokta, farklı enerji/yüzey kombinasyonlarının dikkatli bir şekilde değerlendirilmesinden sonra seçildi. Bu kombinasyon etkilidir ve bir saniyeden daha kısa bir süre uygulandıktan sonra kafatasında kemik tahribatına neden olmaz.
   NOT: 2 mm, lazer ışınının terminali (içinden geçtiği optik kablodan) ile kafatası kemiği arasındaki mesafedir. Odaklama merceği kullanılması durumunda, ışını istenen hasar alanına odaklamak için merceğin eğim açısı dikkate alınarak mesafe hesaplanmalıdır. Uygun eğitim ve göz koruması da dahil olmak üzere bir lazer cihazı kullanırken uygun güvenliği sağlayın.
8. Fareyi cihazdan çıkarın ve kafa derisini 3-0 ipek cerrahi dikişlerle kapatın.
9. Anesteziyi bırakın ve fareyi iyileşmesi için kafesine geri koyun. Ameliyattan hemen sonra postoperatif ağrıyı azaltmak için lokal olarak 0.1 mL% 0.25 bupivakain uygulayın.
   not: Doğru yapılırsa tüm prosedür 5 dakikadan az sürmelidir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Beyin ve Doku Matrisleri	SIGMA - ALDRICH	15013
Dijital Tartı	SIGMA - ALDRICH	RS 4000
Etanol 96 %	ROMİK		Yanıcı Sıvı
Termometreli ısıtıcı	Isıtma Pedi-1	Modeli: ISITMA PEDİ-1/2
İnfüzyon Manşeti	Abn	IC-500 Serisi
İzofluran, USP %100	Piramamal Yoğun Bakım A.Ş.	NDC 66794-017
Neşter bıçakları 11	SIGMA - ALDRICH	S2771 Serisi
Sharplan 3000 Nd:YAG (neodimyum katkılı itriyum alüminyum granat) lazer makinesi	Lazer Endüstrileri Ltd
Stereotaksik kafa tutucu	KOPF (Türkçe)	900 LITRE

Serisi