Zebra Balığı Larvalarında İlaca Bağlı Kanamanın Modellenmesi

Özet

Kaynak: Crilly, S., et al. Hemorajik inmenin patolojik sonuçlarını incelemek için zebra balığı larvalarını kullanma. J. Vis. Uzm. (2019)

Bu videoda, döllenmiş zebra balığı embriyoları stereo mikroskop altında dekoryona tabi tutulur ve daha sonra bir kolesterol sentezi inhibitörüne maruz bırakılır, bu da larvalarda kan damarı yırtılmalarına ve beyin kanamalarının gelişmesine yol açar. Farklı kırmızı lekelerle tanımlanabilen hemorajik larvalar daha sonra daha fazla analiz için mikroskop altında ayrılır.

Protokol

NOT: Bu çalışmada kullanılan transgenik hatlar arasında makrofaj spesifik soy mpeg1:mCherry (kurum içinde inşa edilmiştir), nötrofil spesifik mpo: GFP ,eritroid spesifik gata1:dsRed ve ubiq:secAnnexinV-mVenus, vahşi tip, sedef (mitfa^w2/w2) ve mutant (bbh^m292) arka planlarında hücre ölümü (evde yeniden türetilmiştir) için bir raportördür.

1. Gün 0: Yumurta üretimi ve toplanması

1. 1 erkek ve 1-2 dişi yetişkin zebra balığından üretilen üreme kutularında doğal yumurtlamadan döllenmiş embriyoları toplayın.
   

Sonuçlar

Şekil 1: Beyin hasarı, lokomotor ve nöroinflamatuar sonuçları karakterize etmek için deneysel zaman çizelgesinin grafiği. ICH, intraserebral kanama; BBH, kabarcık kafalı.

Şekil 2: ICH+ beyin kanaması fenotipleri. Transgenik bir gata1:DsRed muhabir sedef .......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
24 kuyulu plakalar	Sigma-Aldrich	CLS3527
28 °C inkübatör	ÖYS	210
Atorvastatin	Sigma-Aldrich	PZ0001-5mg
Üreme kutuları	Thoren Su Sporları Sistemleri	10011
Daniovision gözlem odası	Noldus	Yok
E3 orta 1x			%4 Anında Okyanus, 1 L dH2O'da 500 μL metilen mavisi
EthoVision XT yazılımı	Noldus	Versiyon 11
Anında okyanus	Anında Okyanus	SS15-10
mikroskop	Leica Belediyesi	MZ95	diseksiyon mikroskobu
P1000 pipet	Gilson	F144059M
P1000 pipet uçları	Yıldız Laboratuvarı	S1122-1830 Serisi
Pasteur pipetleri	Yıldız Laboratuvarı	E1414-0300
Petri kapları	Corning	101VR20
Pipet Çocuğu	Integra Biyolojik Bilimler	PIPETBOY
Ultra ince diseksiyon forseps	Ağar bilimsel	AGT502
Zen yazılımı	Zeiss	Sürüm 2.3

Gazetesi Gazetesi Serisi Serisi Serisi