Lipopolisakkarit Kullanılarak Bir Sıçan Modelinde Serebral Mikrokanamaların İndüksiyonu

Özet

Kaynak: Li, D., et al. Sıçanlarda Lipopolisakkarit Enjeksiyonunun Neden Olduğu Subakut Serebral Mikrokanamalar. J. Vis. Uzm. (2018).

Bu video, lipopolisakkarit (LPS) kullanan bir sıçan modelinde kan-beyin bariyeri (BBB) bozulmasını ve serebral mikrokanamaları indükleme sürecini göstermektedir. BBB geçirgenliğinin artmasına ve ardından beyin dokusu hasarına yol açan bağışıklık tepkilerinin sırasını vurgular.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Malzemeler

1. LPS enjeksiyonunun hazırlanması
   1. Salmonella typhimurium'dan türetilen 25 mg LPS tozuna 25 mL damıtılmış su ekleyin ve 1 mg / mL'lik bir nihai konsantrasyona ekleyin. Enjeksiyonu 4 °C.
      'de steril bir tüpte saklayın Dikkat: LPS toksiktir.

2. Hayvanlar

1. LPS'yi 10 haftalık (ortalama ağırlık: 280 ± 20 g) erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanlarına intraperitoneal enjeksiyonla uygulayın.
   Dikkat: Sıçanlar başka bir kuruluştan satın alınırsa, adaptif faz 7 günden az olmamalıdır.

3. LPS Enjeksiyonları

1. LPS'yi her bir sıçana 1 mg / kg'lık bir dozda intraperitoneal olarak enjekte edin ve sıçanları ev kafeslerine geri koyun.
   not: Anestezi gerekli değildir.
2. Altı saat sonra, sıçanlara aynı dozda LPS enjeksiyonu enjekte edin.
3. On altı saat sonra aynı dozda LPS'yi sıçanlara enjekte edin.
   Dikkat: SD sıçanlara 1 mg / kg'lık bir dozda LPS enjekte etmek% 5'lik bir mortalite oranı ile sonuçlanabilir. Ölüm oranı, genç veya yaşlı sıçanlarda veya hamile dişi sıçanlarda daha da artabilir.
4. LPS enjeksiyonundan sonra fareleri kafeslerine geri koyun ve yiyecek ve içeceğe ad libitum erişimi sağlayın.
   not: Sıçanlar belirgin bir sistemik enflamatuar yanıt sergileyecektir ve bu nedenle kafesler deney boyunca temiz kalmalıdır. Sıçanlar, ilk LPS enjeksiyonundan sonra ağırlık, genel görünüm ve tutum açısından sık sık (2x gün) izlenmelidir. Sıçanlar kambur bir duruş, hareket etme isteksizliği, önemli kilo kaybı (% >20) veya porfirin boyaması sergilemeye başlarsa, 7 günlük çalışma bitiş noktasından önce insancıl bir şekilde ötenazi yapılmalıdır.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Lps	Sigma-Aldrich	L-2630	inflamasyon indüksiyonu için
Fosfat tampon salin (PBS)	Solarbio	P1022 Serisi	Deneyde yaygın olarak kullanılan bir tür tampon çözeltisi

Gazetesi Serisi