Endovasküler Perforasyon Yoluyla Bir Fare Modelinde Subaraknoid Kanama İndüksiyonu

Özet

Kaynak: Liu, S., et al. Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) ile Kombine Subaraknoid Kanama için Endovasküler Perforasyon Modeli.J. Vis. Uzm. (2021).

Video, bir fare modelinde endovasküler perforasyon yoluyla subaraknoid kanamanın indüksiyonunu göstermektedir. Ortak karotis artere ve bifurkasyonuna erişmek için anestezi uygulanmış farenin boyun bölgesinde bir kesi yapılır. İntrakraniyal arter dalını delmek için arterlerden bir filament sokulur ve subaraknoid kanamaya neden olur.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Hayvan hazırlama

1. İntraperitoneal ketamin (70 mg / kg) ve ksilazin (16 mg / kg) enjekte ederek anesteziyi indükleyin. Derin anestezinin hızlı bir şekilde indüksiyonuna katkıda bulunarak normal vücut ısısını koruyun. Ayak parmağınızı çimdikleme gibi bir ağrı uyaranı ile yeterli sedasyonu test edin ve bir reaksiyonun olmadığını doğrulayın.
2. Farenin ense kıllarını bir ustura ile dikkatlice tıraş edin, %70 etanol ve ardından betadin/klorheksidin ile temizleyin ve lokal ağrı kontrolü için cilt yüzeyine %1 lidokain uygulayın.
3. Fareyi sırtüstü pozisyona getirin. Uzuvları ve kuyruğu sabitlemek için bant kullanın, boynun derisini ameliyatın karşı tarafına nazikçe gerin. Aynı anda boynu hafifçe kaldırın.
4. Operasyon sırasında gözlerin dehidrasyonunu önlemek için oftalmik merhem (örn.% 5 dekspantenol) kullanın.

2. SAH indüksiyonu

1. Boyun derisini steril bir neşter ile çeneden göğüs kemiğinin üst kenarına (1,5 cm) kadar açın ve tükürük bezlerini çevredeki bağ dokusundan künt olarak ayırın.
2. Kas grubunu trakeanın bir tarafı boyunca [bu durumda sağ tarafı] ayırın ve besleyici kan damarları ve venüllerle kaplı ortak karotis arter (CCA) kılıfını açığa çıkarın. CCA ve sinirler birbirine yakın yerlerde bulunur.
3. CCA'yı ayırın ve ücretsiz bir 8-0 bırakın CCA'nın etrafına önceden bağlanmadan ipek sütür. Kolayca zarar görebileceği için vagal sinirin korunmasına dikkat edin (Şekil 1A).
4. CCA, internal karotis arter (ICA) ve dış karotis arterin (ECA) üçlü bifurkasyonu, diyastazın alt arka üçte birlik kısmı boyunca görülebilir. ECA'nın distal ucunu inceleyin ve damarı mümkün olduğunca iki kat daha uzak bir şekilde bağlayın.
5. ECA'yı iki kez bağlanmış segmentin orta noktasında ayırın ve bir damar kütüğü oluşturun.
6. ECA güdükünün etrafındaki filament için bir ligasyonu önceden düzenleyin, başarılı filament yerleştirilene kadar kapatmayın.
7. ICA ve CCA'yı geçici olarak tıkamak için bir sütür veya mikro klips kullanın (Şekil 1B).
8. Mikrovasküler makas kullanarak ECA'da küçük bir kesi (ECA çapının yaklaşık yarısı) yapın. ECA'ya 5-0 (alternatif olarak 4-0) prolen filament yerleştirin ve CCA'ya ilerletin.
9. ICA ve CCA üzerindeki mikro klipsi gevşetirken ECA üzerindeki bağı hafifçe kapatın (Şekil 1C).
10. Filamenti yavaşça geri çekin ve ECA kütüğünü kraniyal yönde ayarlayın, filamenti çatallanma yoluyla ICA'ya istila edin (Şekil 1D).
11. Filament ucunu medial olarak trakeal orta hatta ~ 30 ° ve yatay düzleme ~ 30 ° açıyla doğrultun. Filamenti ICA'nın içinde ileri doğru itin. Anterior serebral arter (ACA)- orta serebral arter (MCA) bifurkasyonuna ulaşıldıktan sonra dirençle karşılaşılır (~9 mm).
12. Sağ ACA'yı delerek filamenti 3 mm daha ilerletin. Filamenti derhal ECA kütüğüne çekin ve kanın subaraknoid boşluğa akmasına izin verin.
13. Filamenti yaklaşık 10 saniye bu konumda tutun (Şekil 1E). Kas titremeleri, ipsilateral miyozis, nefes nefese kalma, değişmiş kalp ritmi ve idrar kaçırma varlığı başarılı cerrahinin destekleyici kanıtları olabilir.
14. Aşırı kan kaybını önlemek için CCA'yı geçici olarak kapatın. Filamenti anında dışarı çekin ve ECA'yı önceden ayarlanmış sütür ile bağlayın. CCA'yı tekrar açın ve reperfüzyona ve subaraknoid boşluğa daha fazla kan efüzyonuna izin verin (Şekil 1F).
15. Kanama sızıntısı olup olmadığını kontrol ettikten sonra, ameliyat sonrası cilt enfeksiyonlarını önlemek için yarayı çevreleyen cildi dezenfekte edin ve yarayı emilmeyen 4-0 polyester elyaf sütür ile dikin.
16. Bilinç yeniden kazanılana kadar fareyi termal bir kutuya yerleştirin. Hayvan tamamen uyanana kadar bekleyin ve sternal yaslanmayı sürdürmek için yeterli bilinci yeniden kazandığından emin olun. Tamamen iyileşene kadar hayvanları diğer farelerin şirketine iade etmeyin.
17. Postoperatif ağrıyı gidermek için 200-300 mg / kg vücut ağırlığı parasetamol uygulayın.
18. Ameliyattan sonra fareleri günlük olarak kontrol edin.

Sonuçlar

Şekil 1: Cerrahi tekniğin adım adım görüntüleri.(A) Açıkta kalan sağ karotis arter anatomisinin tasviri: CCA ve bunun ICA ve ECA'ya çatallanmasının yanı sıra ECA'nın küçük dalları (OA ve STA) tanımlanır. (B) ECA çevre dokudan mobilize edilir ve kesilmeden önce iki dikişle bağlanır. Üçüncü bir ligasyonun, çatallanmanın yakınına onu tıkamadan gevşek bir şekilde yerleşti...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Göz kremi	Bayer	815529836	Bepanthen
Ligasyon sütürü (5-0)	Smı		İpek siyah USP
Mikroskop için ışık kaynağı	Zeiss	CL 6000 LED
Ketamin	CP-ilaç	797-037	100 mg / mL
Parasetamol (40 mg / mL)	bene Arzneimittel	4993736
Prolen filament (5-0)	Erhicon (Erhicon)	EH7255
jilet	Kuyu	HS61
Cerrahi alet (İnce Makas)	FST (Türkçe)	14060-09
Cerrahi alet (forseps # 1)	AESCULAP (AESCULAP)	FM001R
Cerrahi alet (forseps#2)	AESCULAP (AESCULAP)	FD2855R
Cerrahi alet (forseps # 3)	Hamam Takımı	HCS 082-12
Cerrahi alet (İğne tutucu)	FST (Türkçe)	91201-13
Cerrahi alet (Vannas Yaylı Makas)	FST (Türkçe)	15000-08
Cerrahi mikroskop	Zeiss	Stemi 2000 C
Yara sütürü (4-0)	Erhicon (Erhicon)	CB84D (CB84D)
Ksilmet	CP-ilaç	797-062	20 mg / mL

Serisi Serisi Serisi Serisi