Anjiyotensin II ile İndüklenen Hipertansiyon Fare Modelinde Renal Arterlerin Sempatik Denervasyonu

Bu makalede

Özet

Kaynak: Wang, M., et al., Anjiyotensin II İnfüzyonunun Neden Olduğu Geliştirilmiş Renal Denervasyon Hafifletilmiş Hipertansiyon. J. Vis. Uzm. (2022)

Bu video, anjiyotensin II ile indüklenen hipertansif bir fare modelinde, sempatik sinir fonksiyonunu bozmak ve kan basıncını azaltmak için fenol kullanan renal arter sempatik denervasyonu için bir prosedürü göstermektedir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Bilateral renal denervasyon

Ang II infüzyonundan 1 hafta sonra yüksek kan basıncı (BP) ≥140 / 90mmHg veya sistolik BP / diyastolik BP'de% 25 artış olan fareleri seçin.
Ameliyattan önce hayvan ağırlığını kaydedin ve renal denervasyon ameliyatı için minimum 24 g ağırlığındaki hayvanları seçin.
Fareleri sodyum pentobarbital kullanarak uyuşturun. Negatif ayak parmağı sıkıştırma refleksi ile anestezi derinliğini onaylayın.
Bir tıraş makinesi ile karın üzerindeki tüyleri alın. Herhangi bir cerrahi kontaminasyonu önlemek için bu prosedürü dikkatli ve kapsamlı bir şekilde gerçekleştirin.
Fareleri ameliyat masasına yerleştirin, karnı yukarıda tutun ve uzuvlarını bantla sabitleyin. Karın cildini povidon-iyot ile dezenfekte edin, ardından% 70 etanol içeren üç mendil uygulayın.
Bir neşter bıçağı kullanarak 2 cm'lik bir ventral orta hat abdominal kesi yapın. Sol renal arteri ortaya çıkarmak için 37 °C tuzlu suya batırılmış gazlı bezle bağırsağı geri çekin. Kavisli cımbız kullanarak yağı renal arterden dikkatlice ama açık bir şekilde inceleyin. (Şekil 1A-C).
Tartım kağıdını steril keskin bir makasla renal arter ile aynı boyutta bir dikdörtgen şeklinde kesin. Referans olarak, tartım kağıdını Şekil 1C'deki noktalı çizgiyle gösterildiği boyutta kesin.
NOT: Aynı şekli korumak için tartı kağıdının birkaç parçasını aynı anda kesmeye çalışmak ameliyatın kritik bir parçasıdır.
Tartım kağıdını en az 30 saniye boyunca %10'luk fenol/etanol çözeltisine batırın. Sol renal arterin yüzeyini örtün ve damarı tartı kağıdı ile sarın ve 2 dakika tutun (Şekil 1D). Tartı kağıdının çevredeki böbrek ve bağırsağa temas etmesini önlemek için çevre dokuları korumak için gazlı bez kullanın.
NOT: Fenol çözeltisi plastik tüplerde stabildir, ancak cam şişelerde stabil değildir. Bu nedenle, çözelti her deney için taze olarak hazırlanmalıdır.
Aynı işlemi sağ renal arter için de uygulayın. Tuzlu suya batırılmış tartı kağıdı ile sahte ameliyatı gerçekleştirin.
Kasları başlangıç pozisyonlarına yeniden konumlandırın ve kesintili bir dikişte 6-0 Vicryl sütürlerle peritonu kapatın. Daha sonra kesintili 4-0 naylon dikişlerle cildi kapatın. Tamamen iyileşene kadar tüm fareleri izleyin.

2. Ameliyat sonrası bakım

Kesiğe povidon-iyot uygulayın ve hayvanı iyileşme ve ameliyat sonrası izleme için ısıtılmış bir elektrikli battaniyeye yerleştirin.
Kızarıklık, şişme ve ağrı veya karın enfeksiyonu olup olmadığını değerlendirmek için fareleri günde iki kez izleyin. RDN prosedüründen yaklaşık 1 saat önce ve 24 saat sonra tüm farelere meloksikam (0.5 mg / kg, SC) sağlayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

figure-results-1
Şekil 1: Tartım kağıdı ile RDN prosedürü. (A,B) C57BL/6 (ex vivo) farelerden renal arterin anatomik görüntüleri. (C) İki noktalı çizginin içinde kalan kısım, tartı kağıdının kapladığı alanı ifade eder. (D) Bilateral renal arter yüzeyinin fenol/etanol çözeltisine batırılmış uygun tartım kağıdı ile kaplanması. Filtre kağıdını noktalı çizgini...