$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Sıçanlarda tek taraflı orta serebral arter oklüzyonu/reperfüzyonu (MCAO/R) modelinin kurulması
NOT: Operasyon sırasında, kan damarının kırılmasını önlemek için mikroforsepsleri nazikçe kullanın. Damar izole edildiğinde farenin boynundaki sinirlere ve diğer kan damarlarına zarar vermekten kaçının. Tüm sağkalım cerrahi prosedürleri için uygun aseptik tekniğin sunulmasına özen gösterilmelidir. Videonun ilerleyen bölümlerinde gösterilen teknik, tüm prosedür boyunca uygulanmalıdır.
- Ameliyat boyunca, sıçanların vücut ısısını küçük bir hayvan termostatında 37.0 ± 0.5 ° C'de tutun. Dört adet 6 cm 5-0 sütür hazırlayın.
- Küçük bir hayvan anestezi makinesinin (atık gaz arıtma cihazı ile) oksijen akış hızını 0.4−0.6 L / dak ve izofluran konsantrasyonunu% 5 olarak ayarlayın. Fareyi anestezi makinesine yerleştirin.
- Hayvan bayıldıktan sonra, fareyi cerrahi bir sabitleme masasına yerleştirin. Sıçanın ağzını anestezi makinesinin maskesine bağlayın (oksijen akış hızı değişmeden kalır; izofluran konsantrasyonunu% 3 olacak şekilde ayarlayın). Ekstremite gerginliği, kornea refleksleri ve ağrı eksikliğini gözlemleyerek hayvanın derin anesteziye girdiğini doğrulayın.
- Uzuvlarını ameliyat masasına yatmak için kağıt bandajlarla (veya başka aletlerle) sabitleyin.
- Boyun ceketini elektrikli tıraş makinesiyle çıkarın ve% 75 alkolle sterilize edin (iyodofor daha iyidir). Sıçanın ağzını bir kanca ile sabitleyin.
- Oftalmik makasla boynun merkezi uzunlamasına şekli boyunca 2−3 cm kesin.
- Ortak karotis arteri ayırın. Deri altı kaslarını oftalmik forseps ile ayırın. Görüş alanını tam olarak ortaya çıkarmak için ev yapımı bir ekartör kullanın. Trakeanın ön kasını oftalmik forseps ile ayırdıktan sonra, ortak karotis arter görünene kadar sağ sternokleidomastoid tendon boyunca ayırın.
- Ortak karotis arteri, dış karotis arteri ve iç karotis arteri oftalmik forseps ile izole edin. Ana karotis arteri (sert düğüm), kalp ucundan uzak dış karotis arteri (sert düğüm) ve iç karotis arteri (gevşek düğüm) 5-0 dikişle bağlayın. Kalbin ucuna yakın dış karotis arteri 5-0 dikişlerle hizalayın.
- Bir dişli cıvata takın. Oftalmik makas kullanarak dış karotis arterde küçük bir açıklık kesin ve yavaşça bir diş cıvatası yerleştirin. Gevşek bir düğüm halinde olan dış karotis arterin dikişini boşaltın ve dış karotis arteri kesin.
- İç karotis arterin gevşek düğümünü gevşetin ve diş cıvatasını orta serebral arterin başlangıcına (dikiş işaretli) yerleştirmeye devam edin. Ardından, açıkta kalan dişli cıvatayı kesin.
- İskemik süreye ulaşıldıktan sonra (2-3 saat), dış karotis arterin kırığını bir mikroforseps ile sabitleyin ve diş cıvatasını başka bir mikroforseps ile yavaşça dışarı çekin. Dişli cıvatanın ön ucu iç karotis arterden tamamen çekildiğinde, 5-0 dikişle kaplı dış karotis arteri bağlayın ve ardından dişli cıvatayı tamamen dışarı çekin.
- Ortak karotis arteri gevşetin ve enfeksiyonu önlemek için yaranın yüzeyine ~ 50.000 U penisilin sodyum tozu sürün. Deri altı kasları ve cildi 4 dikişle dikin.
- Sıçanı kafese geri yerleştirdikten sonra ameliyat sonrası su kıtlığını önlemek için 1 mL'lik bir şırınga (SQ-PEN enjeksiyonu daha iyidir) kullanarak sıçana oral olarak ~ 0.2 mL steril salin verin.