Yöntem makalesi

Bir fare modelinde hipoksi ve iskemi yoluyla trombotik inme inmesinin indüklenmesi

8 Temmuz 2025

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Sun, Y. Y., et al., Geçici Serebral Hipoksi-iskemiye Dayalı Bir Trombotik İnme Modeli. J. Vis. Uzm. (2015).'

Bu video, sağ ortak karotis arteri bloke ederek ve fareyi düşük oksijenli bir ortama maruz bırakarak bir fare modelinde trombotik bir inmeyi çoğaltma prosedürünü göstermektedir. Bu işlem beyne giden kan ve oksijen akışını azaltarak kan pıhtısı oluşumuna ve beyin hasarına neden olur.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Kurulum

  1. Ameliyattan en az 15 dakika önce ameliyat yatağını 37 °C'de bir ısı pompasına bağlı bir ısıtma pedi üzerinde hazırlayın. Cerrahi yatağa 3 ml'lik bir şırınganın namlusunu kullanarak bir boyun rulosu yerleştirin. Anestezi gazını medikal havada% 2 izofluran ile hazırlayın.
  2. Otoklavlanmış forseps, makas, mikro iğne tutucular, kanama durdurucu, pamuklu çubuklar ve dikişler hazırlayın. Ayrıca, doku tutkalı ve göz merhemi hazırlayın.
  3. Hipoksi sistemini ve sıcaklık kontrol cihazlarını bir ısıtma lambası ve rektal prob ile kurun. %7,5 O2 içinde %92,5 N2 ile dengelenmiş %2 izofluran içeren hipoksi gazı hazırlayın.
  4. Ameliyattan bir saat önce, fareler yavaş salınan bir Meloksikam'ın (4.0 mg / kg) deri altı enjeksiyonu ile analjeze edilir.

2. Geçici Serebral Hipoksi-iskemi (Şekil 1B)

  1. 22 ila 30 g ağırlığındaki 10-13 haftalık erkek C57BL/6 fareyi anestezi indüksiyon odasında% 3 izofluran ile hayvan ayak sıkışmasına yanıt vermeyene kadar uyuşturun ve ardından elektronik bir tıraş makinesi kullanarak sağ boyundaki tüyleri alın.
  2. Fareleri, 2 L / dak'lık bir akış hızında tıbbi havada% 2 izofluran ile bağlı cerrahi yatağa yerleştirin. Boyun boyunca uzanan güvenli ön ayaklar, tıbbi bant kullanarak yanlarda yuvarlayın.
  3. Kesi için cerrahi bölgeyi betadin, ardından alkol ve ardından pamuklu çubuklarla temizleyin.
  4. Diseksiyon mikroskobu altında, orta hat derisinden yaklaşık 0,2 cm lateralde düz forseps ve mikro makas kullanarak 0,5 cm sağ servikal kesi yapın.
  5. Sağ ortak karotis arteri (RCCA) ortaya çıkarmak için fasyayı ve dokuyu ayırmak için bir çift ince tırtıklı forseps kullanın. Bir çift ince düz forseps kullanarak RCCA'yı vagal sinirden dikkatlice ayırın.
  6. RCCA'da iki önceden kesilmiş 5-0 ipek sütür (serbest bırakılabilir) canlı düğümleyin ve ardından 4-0 Naylon monofilament sütürler (Şekil 1C) kullanarak cildi dikin.
  7. Kuruluğu önlemek için her iki gözünüze de göz merhemi sürün.
  8. Fareleri hızlı bir şekilde hipoksi sistemine aktarın ve burunlarını ve ağızlarını 30 dakika boyunca 0,5-1 L/dk akış hızında %7,5 O2 içinde %2 izofluran içeren bir yüz maskesine koyun.
    1. Hipoksi sırasında, rektal sıcaklığı 37,5 ± 0,5 °C'de kontrol etmek için ısıtma lambalı sıcaklık kontrol cihazları kullanın. Solunum hızını 80-120 nefes / dk'da izleyin. Hipoksi sırasında vücut ısısını 37 ° C'nin üzerinde tutmak, tutarlı beyin enfarktüsü oluşturmak için önemlidir. Düşük solunum hızı genellikle 20 dakikalık hipoksiden sonra olur. Yüz maskesini çıkarın ve solunum hızı 40'ın altına düşerse normal hava beslemesine izin verin. Bu 1-2 dakika sürer ve 30 dakikalık hipoksi süresine dahil edilmez

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Şekil 1: Yetişkin farelerde geçici serebral hipoksi-iskemi (tHI) hakaretinin prosedürü. (A) Virchow'un trombozu tetikleyen üçlüsü, kan akışının durmasını, endotel hasarını ve kanın hiper pıhtılaşabilirliğini içerir. (B) tHI inme prosedürünün şematik bir diyagramı. Sağ ortak karotis artere (CCA) iki serbest bırakılabilir düğüm bağlandı ve ardından 30 dakika boyunca bir burun konisi aracılığıyla% 7.5 ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Herhangi bir çıkar çatışması beyan edilmemiştir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Yetişkin erkek farelerCharles NehriC57BL/610 ~ 13 haftalık (22 ~ 30 g)
Mobil Laboratuvar Hayvanları Anestezi SistemiVeteriner Ekipmanları901807Anestezi
Medikal hava (Kompresif) hava tankıHava gazıUN1002Anestezi
İzofluranPiramal SağlıkNDC 66794-013-25Anestezi
Çok İstasyonlu Laboratuvar Hayvan Anestezi SistemiSurgivet (Surgivet)V703501Hipoksi sistemi
%7,5 O2, %92,5 N2 tankı ile dengelenirHava gazıUN1956 (İngilizceHipoksi sistemi
Isıtma lambalı Sıcaklık Kontrol CihazıCole ParmerEW-89000-10Sıcaklık kontrolörleri
Rektal probCole ParmerNCI-00141PGSıcaklık kontrolörleri
Diseksiyon mikroskobuOlympusSZ40Cerrahi kurulum
Isıtma pedli ısı pompasıGaymar BelediyesiTP700Cerrahi kurulum
İnce kavisli forseps (tırtıklı)FST (Türkçe)11370-31Cerrahi alet
İnce kavisli forseps (pürüzsüz)FST (Türkçe)11373-12Cerrahi alet
Mikro MakasFST (Türkçe)15000-03Cerrahi alet
Mikro İğne TutucularFST (Türkçe)12060-01Cerrahi alet
Halsted-Sivrisinek kanama durdurucularıFST (Türkçe)13008-12Cerrahi alet
5-0 İpek SütürHarvard Aygıtı624143Cerrahi malzemeler
4-0 Naylon monofilament sütürbakmak766BCerrahi malzemeler
Doku yapıştırıcısıAbbott LaboratuvarlarıNC9855218Cerrahi malzemeler
Puralube Vet merhembalıkçıNC0138063Göz kuruluğunun önlenmesi
Serisi Serisi ) Serisi Serisi

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Trombotik nme ModeliKarotis Arter LigasyonuHipoksi OdasSerebral skemiKan P ht s Olu umuCerrahi Prosed rAnestezize FareS cakl k zlemeCerrahi nsizyon

İlgili makaleler