$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.
1. Farelerin Deneysel Prosedür için Hazırlanması
NOT: Deneysel prosedür için, her bir farenin ağırlığı 18 ila 22 g arasında olan 12 haftalık sağlıklı erkek C57BL/6J fareleri seçildi.
- Fareleri tipik bir Spesifik Patojen İçermeyen (SPF) laboratuvar hayvanı odasında (22 ± 1 °C) kafeslerde ayrı ayrı tutun, CUMS prosedüründen bir hafta önce 12 saat / 12 saat karanlık / aydınlık döngüsü, bağıl nem:% 30-40.
- Tüm fareleri vücut ağırlıklarına göre rastgele bir kontrol grubuna ve bir model grubuna bölün. Her grubun 15 faresi vardır.
- Deneyin başlamasından önce, her gruptaki fareleri bir işaretleme kalemi kullanarak kuyruklarında numaralandırın.
2. Farelerde Depresyonun İndüksiyonu
NOT: Depresyonu indüklemek için, model grubundaki farelere ve iki tedavi grubuna 21 gün boyunca kronik öngörülemeyen hafif stres (CUMS) uygulandı. Plan, pratik duruma göre değiştirilebilir, ancak aynı stres etkeninin sürekli olarak kullanılamayacağı ilkesine uyulmalıdır.
- Fareleri art arda 21 gün boyunca günlük olarak aşağıdaki yedi stres etkeninden herhangi ikisine maruz bırakın. Modelleme planımız aşağıdaki gibi tasarlanmıştır:
- Pazartesi günü, fareleri yiyecek yoksunluğuna (her kafesin yemini 24 saat, 08:00 - 08:00 saatleri arasında boşaltın) ve su yoksunluğuna (her kafesin içme şişesini 24 saat, 08:00 - 08:00 saatleri arasında çıkarın) maruz bırakın.
- Salı günü, fareleri kısıtlama stresine maruz bırakın (fareleri 3 saat, 8:00 - 11:00 saatleri arasında küçük bir plastik küvette tutun) ve boş kafesler (her kafesteki dolguyu 11 saat, 8:00 - 19:00 saatleri arasında çıkarın).
- Çarşamba günü, fareleri ıslak ve kirli kafeslere (her kafese su dökün ve 24 saat, 08:00 - 08:00 saatleri arasında ıslak tutun) ve kalabalık kafeslere (24 saat, 08:00 - 08:00 saatleri arasında bir kafese beş fare koyun) maruz bırakın.
- Perşembe günü, fareleri kısıtlama stresine ve buz gibi yüzmeye maruz bırakın (her fareyi 5 dakika boyunca buzlu su ile şeffaf bir cam akvaryumda yüzmeye zorlayın).
- Cuma günü, fareleri ıslak ve kirli kafeslere ve yiyecek yoksunluğuna maruz bırakın.
- Cumartesi günü, fareleri kısıtlama stresine ve kalabalık kafeslere maruz bırakın.
- Pazar günü, fareleri boş kafeslere ve buz gibi yüzmeye maruz bırakın.
- Modellemenin sonuna kadar (21. gün) ceket durumunu ve vücut ağırlığını haftalık olarak kaydedin. Ceket durumunun toplam puanını, yedi farklı vücut bölümünden alınan puanların toplamı olarak hesaplayın: baş, boyun, sırt ceketi, ventral ceket, ön pençeler, kuyruk ve arka pençeler. Bir puan, bakımlı bir paltoyu ve sıfır puan, dağınık bir paltoyu gösterir.