Farelerde İşitsel Beyin Sapı Tepkisinin Ölçülmesi

Özet

Kaynak: Lee, D., et. al. Farelerde Gürültüye Bağlı İşitme Kaybı için Değiştirilmiş Deneysel Koşullar ve İşitme Fonksiyonunun ve Dış Tüylü Hücre Hasarının Değerlendirilmesi. J. Vis. Uzm. (2023)

Bu video, bir farede işitsel beyin sapı tepkisinin (ABR) ölçümünü göstermektedir. Elektrotlar başın üzerine, kulağın arkasına ve anestezi uygulanmış bir farenin kuyruğunun yanına yerleştirilir. Çeşitli yoğunluklarda akustik uyaranlar verilir ve üretilen elektrik sinyalleri dalga formları olarak kaydedilir.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. İşitme eşiğinin işitsel beyin sapı tepkisi (ABR) tabanlı değerlendirmesi

1. Küçük hayvanlar için özel olarak tasarlanmış ticari bir ABR test sistemi kullanın.
2. Genel anestezi için farelere intraperitoneal olarak tiletamin ve zolazepam (40 mg / kg) ve ksilazin (9.3 mg / kg) karışımı enjekte edilir.
   NOT: ABR değerlendirmesi ~2 saat sürer. Fare anestezi altındayken kuruluğu önlemek için bir ısıtma yastığı ile termal destek sağladığınızdan ve göz merhemi uyguladığınızdan emin olun.
3. Genel anestezi altında farede ABR'yi ölçün. İşitme eşiğini ölçmek için subdermal iğne elektrotlarını (12 mm) tepe noktasına, sol kulağın kulak kepçesinin arkasına ve kuyruğun yanına yerleştirin.
4. Hayvanın sol kulağından 1 cm uzağa yerleştirilmiş bir hoparlör kullanarak akustik uyaranlar sunun.
5. Akustik uyaranları kontrol etmek için bir osiloskop kullanın. Uyaranlar için Sinüs Dalgası ve pencere ölçeği için 10 k öğesini seçin. Akustik uyaranların istenen frekansını elde etmek için Frekans düğmesini çevirin.
6. Fonksiyon üreteci üzerindeki genlik veya AMLP düğmesini çevirerek uyaran yoğunluğunu ayarlayın. AMLP düğmesini kalibrasyondan hesaplanan uygun bir voltaja çevirerek istenen uyaran yoğunluğunu elde edin.
7. ABR ölçümlerini, 10 dB adım boyutu ile 10 dB Ses Basıncı Dengeleyici SPL'den 100 dB SPL'ye kadar bir dizi uyaran yoğunluğu altında toplayın.
   NOT: Ses geçirmez bir kutuda işitme eşiğini ölçün. Toplanan sinyalde fark edilebilir bir V. Dalgaya yol açabilecek minimum uyaran yoğunluğu seviyesinin ABR eşiği (Şekil 1) olduğu varsayılmıştır. ABR sonrası değerlendirme, hayvanı anesteziden çıkana kadar izleyin (~ 1 saat).

Sonuçlar

Şekil 1: İşitmenin ABR ölçümü. 12 kHz'de temsili ABR sonuçları, 13. günde (gürültüye maruz kaldıktan 1 hafta sonra) toplanır. Her yoğunluktaki Dalga V, fark edilebilirse etiketlenir.

Malzemeler