Method Article

Bir fare arteriolar endotelinde kalsiyum dinamiği ve membran potansiyel değişikliklerinin analizi

April 28th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Hakim, M. A. et al., Fare Beyin Parankiminin Arteriolar Endotelinin İzolasyonu ve Fonksiyonel Analizi. J. Vis. Uzm. (2022).

Bu video, bir fare beyninden izole edilen bir arteriyolar endotel tüpünün fonksiyonel analizini göstermektedir. Hem başlangıçta hem de farmakolojik stimülasyona yanıt olarak hücre içi kalsiyum seviyelerini ve zar potansiyelini ölçmek için adımları ana hatlarıyla belirtir.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan örneklerini içeren tüm prosedürler uygun hayvan etik tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır. İnceleme Komitesi.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1

Şekil 1: Kan akımının düzenlenmesi ile ilgili yolakların fizyolojik incelenmesi için endotel tüpünün uygulanması.(A) Keskin bir elektrot (mor ok), fotometri için veri toplama penceresine odaklanmış bir endotel tüpünün bir hücresine yerleştirilir. (B) MTA'ya (1 μM) yanıt olarak Fura-2 fotometrisi kullanılarak hücre içi Ca2 + 'nın temsili kaydı. (C

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AmplifiersMolecular Devices, Sunnyvale, CA, ABDAxoclamp 2B ve Axoclamp 900A
Sesli temel monitörlerAmpol US LLC, Sarasota, FL, ABD BM-A-TM
Banyo Soğutucu (Isotemp 500LCU)ThermoFisher Scientific13874647
Borosilikat cam kılcal damarlar (Sabitleme)Warner InstrumentsG150T-6
Borosilikat cam kılcal damarlar (Keskin Elektrotlar)Warner InstrumentsGC100F-10
BSA: Bovine Serum AlbuminSigmaA7906
CaCl2: Calcium ChlorideSigma223506
DMSO: Dimethyl SulfoxideSigmaD8418
Flow Control ValveWarner Instruments FR-50
Floresan sistem arayüzü, ARC lambası ve güç kaynağı, hiperswitch ve PMTMoleküler Cihazlar, Sunnyvale, CA, ABDIonOptix Systems
Function GeneratorEZ Digital, Seul, Güney KoreFG-8002
Fura-2 AM boyaInvitrogen, Carlsbad, CA, ABDF14185
GlucoseSigma-Aldrich (St. Louis, MO, ABD)G7021
HCl: Hidroklorik AsitThermoFisher Scientific (Pittsburgh, PA, ABD)A466250
HeadstagesMoleküler CihazlarHS-2A ve HS-9A
HEPES: (4- (2-hidroksietil)-1-piperazineetansülfonik asit)SigmaH4034 
Inline Solution IsıtıcıWarner InstrumentsSH-27B
KCl: Potasyum KlorürSigmaP9541
MgCl2: Magnezyum KlorürSigmaM2670
MicroforgeNarishige, East Meadow, NY, ABD MF-900
MicromanipülatorSiskiyou MX10
Micropipette çektirme (dijital)Sutter Instruments, Novato, CA, ABDP-97 veya P-1000
Mikroskop (Nikon-ters çevrilmiş)Nikon Instruments Inc, Melville, NY, ABDTs2
Mikroskop ( Nikon InstrumentsIncEclipse TS100
Mikroskop objektifleriNikon Instruments Inc20X (S-Fluor) and 40X (Plan Fluor)
Mikroskop platformu (anodize alüminyum; çap, 7,8 cm)Warner InstrumentsPM6 or PH6
Mikroskop Tablası (Alüminyum)Siskiyou, Grants Pass, VEYA, ABD8090P
MTA: 2-Metiltioadenosin difosfat trisodyum tuzuTocris1624
NaCl: Sodyum KlorürSigmaS7653
NaOH: Sodyum HidroksitSigmaS8045
OsiloskopTektronix, Beaverton, Oregon, ABD TDS 2024B
Faz kontrast hedefleriNikon Instruments Inc (Ph1 DL; 10X & 20X)
Pleksiglas süperfüzyon odasıWarner Instruments, Camden, CT, ABDRC-27
StereomikroskoplarZeiss, NY, ABDStemi 2000 & 2000-C
Şırınga filtresi (0,22 μm)ThermoFisher Scientific722-2520
Sıcaklık Kontrol Cihazı (Çift Kanallı)Warner InstrumentsTC-344B or C
Valve Control SystemWarner InstrumentsVC-6
Titreşim İzolasyon TablasıTeknik İmalatı, Peabody, MA, ABD Micro-g

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Calcium DynamicsMembrane PotentialArteriolar EndotheliumMouse BrainFluorescent DyeElectrode InsertionGPCR StimulationIntracellular CalciumPotassium EffluxFunctional Analysis

Related Articles