Bir fare modelinde fasiyal sinir üzerinde ezilme aksotomisi yapılması

Özet

Kaynak: Olmstead, D. N., et al., Farelerde Fasiyal Sinir Aksotomi: Yaralanmaya Motonöron Tepkisini İncelemek İçin Bir Model. J. Vis. Uzm. (2015).

Bu video, bir farede fasiyal sinir ezilme prosedürünü göstermektedir, burada önemli yer işaretlerinden künt diseksiyon, stilomastoid foramende fasiyal sinir gövdesini ortaya çıkarır. Forseps daha sonra sinir gövdesini sıkıştırmak, aksonal hasara neden olmak ve nöronal sinyal iletimini bozmak için kullanılır.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Cerrahi Yaklaşım

1. Stereoskopu cerrahi alanla hizalayın ve odaklayın. Burun konisini ayarlayın ve görme alanının kenarı boyunca konumlandırılacak şekilde bantlayın.
2. Fare sol tarafına yatarken, sağ kulağın kenarını burun konisine bantlayın ve kesinin yapılacağı kulağın arkasındaki alanı ortaya çıkarın. Arka kulak damarının kulak boyunca yatay olarak hareket ettiğinden emin olun. Fasiyal siniri hızlı bir şekilde bulmak için hayvanın doğru yerleştirilmesinin ve kulağın bantlanmasının çok önemli olduğunu unutmayın.
3. Kulağın üstündeki ve arkasındaki kürkü %70 etanol ile ıslatın ve ameliyat bölgesini bir jilet veya neşter bıçağı kullanarak tıraş edin. Kürkün önceden ıslatılması, bu anatomik konumda tıraşı kolaylaştırır.
4. Cildi Betadine cerrahi ovma (% 7.5 povidon-iyot) ve ardından% 70 etanol gibi bir iyot çözeltisi ile temizleyin. Alanı iyice dezenfekte etmek için bu temizliği iki kez daha tekrarlayın.
5. Kesinin nerede yapılacağını belirlemek için, arka kulak damarını kulaktan kaudal olarak kulak çıkıntısının arkasındaki alana kadar izleyin. Yaylı makas kullanarak, çıkıntının 2 - 3 mm arkasında 4 mm'lik bir kesi yapın.
6. Künt diseksiyon kullanarak deri altı yağ ve fasyadan diseksiyon yapın. Makasla doğrudan kesmekten kaçının çünkü kan damarları veya kas dokusu kolayca zarar görebilir.
7. Kanama meydana gelirse, steril bir pamuklu çubukla ameliyat bölgesine en az 30 saniye boyunca baskı uygulayın. Önemli sıvı kaybı meydana gelirse, fareye 25 veya 27 G'lik bir iğne kullanarak 0,5 ml'ye kadar steril% 0,9 tuzlu su çözeltisi ile intraperitoneal olarak enjekte edin.
8. Fasiyal siniri bulmak için omurilik aksesuar siniri, kulak kanalı ve ön digastrik kas (aşağıda açıklanmıştır) olmak üzere birkaç önemli yer işareti kullanın. Fasiyal sinirin dalları görüntülenene kadar bu yer işaretlerinin etrafını inceleyin. Sinir, ortaya çıktığında önemli bir katı beyaz yapı olarak görünecek ve bir fasya tabakası onu alttaki yapılara yapıştıracaktır.
   1. Deri altı yağ ve fasya diseke edildikten sonra trapezius kasını innerve etmek için kafatasının kaudal kısmından hareket eden omurilik aksesuar sinirini bulun. Fasiyal sinir, spinal aksesuar sinirin derinlerindedir.
   2. İnci beyazı görünen ve fasiyal sinire rostral olarak görülebilen kıkırdaklı kulak kanalını bulun.
   3. Fasiyal sinirin üstünde ve kaudal olan ön digastrik kasın kas göbeğini bulun.
9. Fasiyal sinirin ana dalları görüntülendiğinde, stilomastoid foramenden kökenlerini bulmak için onları dorsal olarak izleyin. Cerrahi bölgeyi açık tutmak için ince uçlu Dumont forseps #5/45 kullanarak, yaylı makas uçlarını sinirin yolunu takip ederek ilerletin, ardından yeni ilerlemiş alanı açık tutmak için forsepsleri dorsal olarak hareket ettirin.
10. Bu noktada fasiyal sinirin gövdesini elmacık, bukkal ve marjinal mandibular dallarla görselleştirin.
    NOT: Temporal dal, foramenlere daha yakın bulunacaktır. Marjinal mandibular sinir, çeneye daha yakın olan üst ve alt kısımlarına dallanır, bu nedenle bu sinir dalları bu seviyede görünmez.
    1. Bir ezilme yaralanması yapıyorsanız, tüm aksonları koparmak için sabit basınç kullanarak siniri 30 saniye boyunca sıkıştırmak için Dumont #5/45 forseps kullanın, ardından bu ezmeyi ilk ezilme bölgesine dik olan ikinci bir açıyla tekrarlayın. 30 saniyelik ezilme sırasında değişken miktarlarda basınç uygulamaktan kaçının, aksi takdirde yaralanma hayvanlar arasında tutarsız olacaktır.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Stereo Microscope	Leica	M60
Etiketleme bandı	Fisher Scientific	15-952
Vannas-Tübingen Yaylı Makas - Düz/Keskin/8.5cm/5mm kesici kenar	Fine Science Tools	15003-08	Kullanmadan önce sterilize edin
Dumont #5/45 Forseps - Standart uçlar / Açılı 45 ° / Dumoxel / 11cm	Fine Science Tools	11251-35	Kullanmadan
0.9% Sodyum Klorür Enjeksiyonu, USP	Hospira	0409-4888-10
Betadine, 16 oz, dispenser	Fisher Scientific	19-027132
70% Ethanol
Glass Bead Sterilizer

önce sterilize edin