Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı Sıçan Modelinde Kan-Beyin Bariyeri Bütünlüğünün Değerlendirilmesi

Özet

Kaynak: Kuts, R. et al. Sıçanların Motor Korteksinde Lazere Bağlı Beyin Hasarı. J. Vis. Uzm. (2020)

Bu video, sıçanlarda lazerin neden olduğu beyin hasarını takiben kan-beyin bariyeri (BBB) bütünlüğünün değerlendirilmesini göstermektedir. Kuyruk damarına bir izleme boyası enjekte edilir, bu da beyne dolaşmasına ve hasarlı BBB yoluyla dokuya sızmasına izin verir. Beyin daha sonra boyayı serbest bırakmak için çıkarılır ve işlenir. Boyanın floresan yoğunluğu, lazerin neden olduğu BBB hasarının derecesini ölçmek için ölçülür.

Protokol

Hayvan modellerini içeren tüm prosedürler, yerel kurumsal hayvan bakım komitesi ve JoVE veteriner inceleme kurulu tarafından gözden geçirilmiştir.

1. Lazer kaynaklı beyin hasarı deneysel prosedürü

1. Lazer grubu olarak işaretlenmiş bir gruba 20 sıçan ve başka bir kontrol grubuna 20 sıçan atayın (sahte ameliyatlı).
2. Lazer grubu sıçanları 50J X 10 nokta lazer ışınlamasına tabi tutun:

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
50% trikloroasetik asit	SIGMA - ALDRICH	76-03-9
Beyin ve Doku Matrisleri	SIGMA - ALDRICH	15013
Cannula Venflon 22 G	KD-FIX	1.84E+11
Centrifuge Sigma 2-16P	SIGMA - ALDRICH	Sigma 2-16P
Compact Analitik Teraziler	SIGMA - ALDRICH	HR-AZ/HR-A
Dijital Tartı SIGMA	- ALDRICH	Rs 4,000
Diseksiyon makası	SIGMA - ALDRICH	Z265969
Eppendorf pipet	SIGMA - ALDRICH	Z683884
Eppendorf Tube	SIGMA - ALDRICH	EP0030119460
Ethanol %96	ROMICAL		Yanıcı Sıvı
Evans Blue 2%SIGMA	- ALDRICH	314-13-6
Floresan dedektörü	Tecan, Männedorf İsviçre	model Infinite 200 PRO çok modlu okuyucu
Termometreli ısıtıcı	Heatingpad-1	Model: HEATINGPAD-1/2
İnfüzyon Manşet	ABN	IC-500
Isofluran, USP %100	Piramamal Critical Care, Inc	NDC 66794-017
Çok ayarlı	TEVA MEDİKAL	998702
Olympus BX 40 mikroskop	Olympus
Petri kapları	SIGMA - ALDRICH	P5606
Neşter bıçakları 11	SIGMA - ALDRICH	S2771
Sharplan 3000 Nd:YAG (neodimyum katkılı itriyum alüminyum granat) lazer makinesi	Laser Industries Ltd
Stereotaksik kafa tutucu	KOPF	900LS
Steril Şırınga 2 ml	Braun	4606027V
Şırınga iğnesi 27 G	Braun	305620