Yöntem makalesi

Sıçan Beyin Dokusu Örneği için Hidrofobik Bir Doku Temizleme Yöntemi

28 Nisan 2025

Bu makalede

Özet

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kaynak: Kirchner, K.N., et al., Sıçan Beyin Dokusu için Hidrofobik Doku Temizleme Yöntemi. J. Vis. Uzm. (2020).

Bu video, bir sıçan beyin dokusu örneğinin hidrofobik doku temizleme yöntemini göstermektedir. Numune metanol içinde sırayla dehidre edilir, lipitleri ve pigmentleri çözmek için bir diklorometan ve metanol karışımı ile muamele edilir ve tam doku temizliği için dibenzil etere aktarılır, bu da ince kesit almadan ayrıntılı görüntüleme sağlar.

Protokol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan örneklerini içeren tüm prosedürler, uygun hayvan etik inceleme komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.

1. Doku temizleme

  1. Numuneyi oda sıcaklığında (RT) 1 saat boyunca %20 metanol/%80 deiyonize su çözeltisinde inkübe edin.
  2. Numuneyi RT'de 1 saat boyunca %40 metanol / %60 deiyonize su çözeltisinde inkübe edin.
  3. Numuneyi RT'de 1 saat boyunca %60 metanol/ %40 deiyonize su çözeltisinde inkübe edin.
  4. Numuneyi RT'de 1 saat boyunca %80 metanol/ %20 deiyonize su çözeltisinde inkübe edin.
  5. Numuneyi RT'de 1 saat boyunca %100 metanol içinde inkübe edin.
  6. RT'de gece boyunca taze %100 metanol içinde inkübe edin.
  7. %66 diklorometan (DCM)/%33 metanol içinde 3 saat boyunca çalkalanarak, RT'de çalkalayın.
  8. Dibenzil eter (DBE) içinde çalkalamadan inkübe edin. Numuneyi berraklaşana kadar DBE'de bırakın ve görüntülemeye kadar DBE'de saklayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DBESigma-Aldrich108014-1KG
DCMSigma-Aldrich270997-100mL
MethanolSigma-Aldrich34860-1l-R

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Methanol DehydrationDichloromethane Methanol MixtureDibenzyl Ether ClearingTissue Transparency EnhancementLight Scattering ReductionFluorescent Neuron ImagingSequential Solvent IncubationHydrophobic Solvent Treatment

İlgili makaleler