$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. ITS2 Dizi Doğru Ek Açıklama
- : Burada ITS2 Veritabanı filogeni tezgah Erişim http://its2.bioapps.biozentrum.uni-wuerzburg.de
- Bölümünde "Annotate" simgesini tıklayarak analizi başlayın "Araçlar." Daha sonra, web sitesinin üst kısmında dizisi editörü içine dizisini yazın veya yapıştırın. Dizisi editörü otomatik olarak ITS2 dizileri geçerli olup olmadığını kontrol eder.
- (Bitkiler için örneğin Viridiplantae) sekanslarınıza için uygun bir SMM seçin.
- Tıklayarak işlemi başlatın "Annotate."
- "Melezleşme" simgesinin üzerine gelerek size SMM açıklama Kullanıcı bir doğruluk teyidi olarak 5.8S ve 28S rRNA melez bir görüntü elde edebilirsiniz.
- Ikincil yapı tahmini yolunuzu seçmek için çıkan ITS2 dizisi yeşil artı işaretine tıklayın: bilinen bir templat olmadan yapısını tahmin etmeke tıklayın "yapısını tahmin edin." Eğer Homoloji Modelleme için kendi şablonu kullanmak istiyorsanız, "Model yapısı" seçeneğine tıklayın.
2. İkincil Yapı Tahmin
- Tahmin
- Açıklamalı ITS2 dizisi otomatik dizisi editörü yapıştırılır.
- Varsayılan ayarları ile ikincil yapısı tahmini başlatmak için, "yapılar tahmin" düğmesine tıklayın.
- Yeşil artı işaretini tıklayarak veri havuza modellenmiş ikincil yapı dahil sonuçlanan ITS2 dizisi kaydedip, "havuz ekle." Alternatif olarak, sürükle ve bırak (Şekil 1) üzerinden veri havuzu ekleyebilirsiniz.
- Sekansı doğrudan katlamak edemeseydik, homoloji modelleme iyi sonuçlar gösterilmiştir. Sürükle üzerinden dizisi yapısı en uygun kaydedin ve veri havuzu bırakın. Alternatif olarak, sonra sağ tıklayın ve bir tıklama ile veri havuzu içine dizisi-yapı kaydetmek "havuz ekle."
- Özel Modelleme
- Yazın veya yapıştırın bir veya birden çok şablon (bilinen yapı ile) üst dizisi editörü içine.
- Yazın veya yapıştırın bir veya birden çok hedef dizileri (yapı olmadan) alt dizisi editörü içine.
- Varsayılan ayarları ile Homoloji Modelleme başlatmak için "en iyi şablon (ler) Tahmin" e tıklayın.
- En iyi şablon-hedef bileşimleri elde listesini de gösterilmiştir.
- Sürükle ve veri havuzu bırak yöntemiyle veya bir sağ tıklama ve üstüne tıklayarak ya seçtiğiniz dizisi-yapı (lar) modellenen Kaydet "havuz ekle."
3. Motif Arama
- Web sitesinin üst kısmında dizisi editörü içine sorgu sırası (ler) yazın ya da yapıştırın.
- Doğru SMM (bitkiler için örneğin Viridiplantae) seçin. 3.3. Işlemini başlatmak için "Motif arama" seçeneğini tıklayın.
- Vurgulanan motiflerle ITS2 dizileri misal vardırWeb sitesinin altındaki ted.
- Ikincil yapı vurgulanan motifleri gösterilecek dizisi başlığı yanındaki simgesine tıklayın.
4. Ara ve Tara
- Ara
- Türü Bir takson adı veya web sitesinin en üstündeki arama alanına bir GenBank tanıtıcı (GI) ya.
- Takson adını tarafından arama bir görünmesini canlı-arama kutusuna tarafından desteklenmektedir.
- Kendi sorgu virgülle ayırarak birden fazla arama yapabilirsiniz.
- Arama yürütmek için "Ara" düğmesini tıklayın.
- Sonuçlarınız yeni bir sekmede listelenen görünür.
- Özellikle kolon sistemine göre sonuçları sıralamak için bir sütun adına tıklayın. Ayrıca sütun menüsü ile seçtiğiniz sütun ekleyebilir veya kaldırabilirsiniz. Sütun menüsü bir sütun adı içinde görünen ok simgesine bir tıklama ile girilebilir.
- Bir dizi-yapı ayrıntılarını görmek için "Ayrıntıları göster" linkine tıklayın.
- Sürükle ve veri havuzu bırak yöntemiyle veya bir sağ tıklama ve üstüne tıklayarak ya seçtiğiniz dizisi-yapı (lar) Kaydet "havuz ekle."
- Harici bir dosyaya sonuçlarınızı kaydetmek için, "Seçimi kaydet" veya "e tıklayıp tüm kaydet."
- Gözat
- Web sitesinin sol tarafındaki ağaç benzeri bir yapıda gezinme tarafından ITS2 Veritabanı göz atın.
- Bir düzey altına taksa görüntülemek için artı işaretini tıklatın.
- Takson her dizi-yapı içeren yeni bir sekme açmak için bir takson adına tıklayın.
- Bir dizi-yapı çiftinin ayrıntılarını görmek için "Ayrıntıları göster" linkine tıklayın.
- Sürükle ve veri havuzu bırak yöntemiyle veya bir sağ tıklama ve üstüne tıklayarak ya seçtiğiniz dizisi-yapı (lar) Kaydet "havuz ekle."
- Harici bir dosyaya sonuçlarınızı kaydetmek için, "Seçimi kaydet" veya "e tıklayıp tüm kaydet."
5.. ITS2 Blast
- Tip veya dizi editörü içine bir veya birden fazla sorgu dizileri yapıştırın. Sizin sekanslar ya düz nükleotid dizileri ya da sıra yapı çiftleri olabilir. Ayrıca bir sıra aşağıya birkaç ikincil yapılar yazabilirsiniz. Kutuyu işaretleyerek bu yapılar daha sonra bireysel sorgular olarak kullanılan "XXFASTA dizileri Serialize".
- Varsayılan ayarları ile BLAST başlatmak için tıklayın "Blast." Ortak bir BLASTN veya ITS2 dizisi-yapı BLAST ya sorgunuzun niteliğine bağlı olarak yapılır.
- Bir alt-tab yanı idam aramaların bir bakış olarak, "ŞOK Sonuçlar" görünen sekme içinde her sorgu sırası için açılır.
- Hesaplanan BLAST saflaşma görmek için "Show Hizalanmalar" tıklayın.
- Sürükle ve veri havuzu bırak yöntemiyle veya bir sağ tıklama ve üstüne tıklayarak ya seçtiğiniz ŞOK hit Kaydet "havuz ekle."
- Harici bir dosyaya sonuçlarınızı kaydetmek için "Kaydet seçime tıklayın"Veya" tüm kaydet. "
6. Çoklu dizi-yapı Hizalama
- Havuzun içerisine dizilerinin sayısı büyüteç sembolü sağ yanındaki "veri kümesi yönet" ve ardından tıklayarak veri havuzu bir göz atın. Alternatif olarak, web sitesinin sol alt veri havuzu işaretini tıklayabilirsiniz.
- Ayrıntılarını görüntülemek için veri havuzunda bir dizi-yapı çift tıklayın.
- Eğer havuzunuz tüm dizi-yapı çiftleri bir çoklu dizi-yapı hizalama oluşturmak için, "Dizi ve Yapısı." Sonra "Analiz veri kümesi" linkine tıklayın ve
- Artık uyum grafik modunu seçmek için istenir. Sizin hizalama sadece birkaç dizileri içeriyorsa, "Hayır" linkine tıklayarak ince modu reddetme Aksi tıklayarak ince grafik modunu seçin "Evet."
- Birkaç dakika sonra, sizin uyum yeni bir sekme (Şekil 2) de gösterilmiştir. Ayrıca, otomatik veri havuzu olarak kaydedilir.
- Lütfen kaydetmek içinharici bir dosyaya uyum, tıklayın "Kaydet hizalama."
7. Filogenetik Ağaç
- Birden çok uyum ağacı Katılma bir dizi-yapı tabanlı Komşu hesaplamak için, "Analiz Dataset" linkine tıklayın ve ardından "Komşu katılma."
- Sonuçta elde edilen ağaç yeni bir sekme (Şekil 3) 'de gösterilmiştir.
- Kaydırma çubuğu ile özgürce ağaç ölçeklendirin "Zoom ağacı."
- Reroot bir düğümü veya ağacın yaprak tıklayarak ve sonra tarafından ağacı "Bu düğümde Reroot."
- Eğer veri havuzundaki bir takson kaldırmak istiyorsanız, yaprak üzerine tıklayın ve "havuz bu düğüm çıkarın." Şimdi yeniden hesaplamak azaltılmış takson örnekleme ile uyumu ve ağaç yapabilirsiniz.
- Harici Newick dosyasına analiz nihai bir sonucu olarak filogenetik ağaç kaydetmek için "Kaydet ağaç" a tıklayın.
8. Ek Yazılım
- "Hakkında Bu web sitesi" tıklayın - Ek bilgi bulmak için "Araçlar"tek başına araçların 4SALE ve ProfDistS hakkında ation.
- Hizalama ve ITS2 Veritabanı web arabirimi tarafından sağlanan Komşu Birleştirme fonksiyonu yanında, şimdi birçok yeni fonksiyonları, telafi edici baz değişiklikleri (CBCs) dayalı örneğin türlerin sınır erişebilirsiniz.
9. Temsilcisi Sonuçlar
Yukarıda tarif edildiği gibi akışı başarılı bir şekilde çeşitli açık erişim araştırmalar 3,4 içinde tatbik edilmiştir. Örnekler aşağıdaki linklerden izlenebilir:
Bu büyük ölçekli çalışmalarda, biz Chlorophyta filogeni yanı sıra Hypnales (Bryophyta) w çözmek başardıkITH yüksek çözünürlük. Her iki durumda da, ayrıntılı bir takson örnekleme otomatik 4SALE 15,16 ile uyumlu ITS2 Veritabanı 9, toplanmıştır ve son olarak bir filogenetik ağaç içine ProfDistS 17 tarafından işlenir. Tüm bu adımlarda, sırası ve yapı bilgileri eş zamanlı kullanıldı. Filogenetik omurga için Bootstrap destek ProfDistS arasında tek başına sürümü mevcuttur Profil Komşu Montaj (PNJ) 19 kullanılarak elde edildi.
Takson örnekleme, çoklu dizi-yapı uyum ve sonunda filogenetik ağaç hesaplama: dizi-yapı çiftleri daha küçük bir kümesi için, şekil 1 ile 3 doğrudan yeni ITS2 Veritabanı tezgah bu otomatik iş akışı 5 temel adımları açıklar.

Şekil 1. Sürükle ve bırak başına Takson örnekleme. Herhangi bir zaman dizileri ya da sıra-structur At e çiftleri sürükle ve bırak yoluyla, örneğin veri havuz için eklenebilir. Burada bir dizi yapı sürükle ve ikincil yapı tahmini sonra bırak kullanarak eklenir. Mavi elips dizisi yapısı veri havuza düştü alanı işaretler. bu görüntünün tam boyutlu sürümünü görmek için buraya tıklayın.

Şekil 2. Tam grafik modunda Çoklu dizi-yapı hizalama. Veri havuzda birkaç dizileri için, tam grafik modu tercih edilmiştir. Bazlar renklidir; baz çifti bir baz veya bir baz çifti dirseği üzerine tıklayarak kırmızı daireler vurgulanmış olabilir. bu görüntünün tam boyutlu sürümünü görmek için buraya tıklayın.
3.jpg "alt =" Şekil 3 "/>
Şekil 3. Dizi-yapı Komşu ağaç katılma. Yedi takson çoklu dizi-yapı uyum hesaplanan serbestçe ölçeklenebilir ağacı Newick formatında kaydedilebilir.