Bu farelere, sıkıştırılmış hormon peletlerin üretimi, hem de deri altından cerrahi implantasyon açıklar. Bu strateji, hormonal karsinojenezi ve iyi huylu prostat büyümesi düzenleme değerlendirmek için atimik çıplak farelerin böbrek kapsülünün altına hücre ve doku senograflarının büyümesi ile kombine edilebilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Prostat Karsinogenezde ve İyi Huylu Prostat Büyümesi ve Değerlendirilmesi için böbrek Kapsül Xenografting ve Derialtı Pelet İmplantasyonu
Bu makalede
Özet
Özet
Iki yaygın prostat hastalıkları, prostat kanseri (SKHA) ve benign prostat hiperplazisi (BPH) için yeni tedaviler, hormonal düzenlemeyi değerlendiren deneyler sıkı sıkıya bağlıdır. Seks steroid hormonlar (özellikle androjenler ve östrojenler) SKHA ve BPH önemli olan, biz sıkıştırılmış hormon granül kullanarak deneyler ile farelerde prostat büyümesi ve karsinojenezi uyaran kendi rollerini prob. Hormon ve / veya ilaç topakları kolaylıkla topak pres ile imal edilmiştir ve cerrahi olarak erkek fare konağın deri altı doku içine implante edilir. Ayrıca bağışıklık sistemi farelerinin böbrek kapsülü altında prostat hücre yeniden bileşenler Xenografting ile deri altından hormon topak implantasyonu birleştirerek hormonal kanser değerlendirilmesi için bir protokol açıklar. Ayrıca, deri altına topak implantasyonu hormon, BPH dokusunun renal kapsül Xenografting ile kombinasyon halinde, daha iyi huylu prost hormonal düzenleme anlaşılması için yararlıdırbüyüme yedik ve seks steroid hormon yolları hedef yeni tedavilerin test etmek.
Giriş
Prostat kanseri (SKHA) ve benign prostat hiperplazisi (BPH) önemli sağlık yük vardır. SKHA erkeklerde ikinci en sık görülen solid organ kanseri ve ölüme 1 ilgili kanser önde gelen nedenidir. BPH de yaşlı erkekler arasında son derece yaygın olduğunu ve BPH klinik bulgusu, alt üriner sistem semptomları (AÜSS), erkeklerin 2% 50-90 etkileyeceği tahmin edilmektedir. Androjenler ve östrojenler, SKHA ve BPH önemli olduğu bilinmektedir da karsinojenezi 'nin büyüme ve altında yatan hormonal mekanizmaların anlaşılması 3,4 eksik kalır. Basit ve genetik uysal hayvan modelleri prostat araştırma bu önceliklere hitap edecek çalışmaları desteklem....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1.. Sıkıştırılmış Hormon / Drug Pellet hazırlanması
- Bir laboratuvar önlüğü, eldiven, maske, koruyucu gözlük ve bone Bu prosedür, bir kimyasal güvenlik kabini yapılmalıdır. Çapraz kontaminasyonu önlemek için, topak yapma makineleri önce iyice% 70 etanol ile ve pelletin her tür imalattan sonra temizlenir önemlidir.
- Analitik ölçek kullanarak ve kağıt ağırlığı hormon / ilaç tozu istenilen miktarını ölçmek. Yaklaşık% 5 fazla presleme işlemi sırasında malzeme kaybı karşılamak için tavsiye edilir.
- Bazı hormonları / ilaçların üretimi pelet önce karıştırılır, bir bağlayıcı madde veya dolgu maddesi gerektirir. Örneğin, 17β-estradiol, 2.5 mg pelet....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Test edilecek olan hipotez bağlı olarak, doku ya da hücre yeniden bileşenler böbrek yabancı-doku naklinde kapsül tek başına, ya da deri altı hormon topak implantasyonu ile kombinasyon halinde gerçekleştirilebilir. Deri altından hormon topak implantasyonu ile böbrek yabancı-doku naklinde kapsül deney birleştiren hayali bir deneyinin şematik Şekil 1 'de gösterilmiştir. Toz haline getirilmiş ve / veya kristal maddelerin çeşitli topak pres ile sıkıştırılmış pelet üretiminde kullanılabilir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu kağıt ve belirtilen protokol, burada sıkıştırılmış hormonu ve / veya ilaç topaklarının imalatı ve farelerin deri altına topak implantasyonu için cerrahi prosedür tarif eder. Ele alınması araştırma sorusuna bağlı olarak, bu tekniğin tek başına, ya da yaygın olarak prostat araştırma 17-19 kullanılan teknikleri prostat hücre rekombinant greft veya prostat doku xenogreftler, renal kapsül Xenografting ile birlikte yapılabilir. Birlikte ele alındığında, bu teknikler hormonal karsinogenezini ve insan ve fare pros.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar, hiçbir rakip mali çıkarlarını olmadığını beyan ederim.
Teşekkürler
Yazarlar geçmiş ve şimdiki Ricke laboratuarında tüm üyelerine teşekkür etmek istiyorum. Biz protokolü ile ilgili faydalı yorumları için, Calvin Patten, Jr, DVM ve Brigitte Raabe, DVM teşekkür ederim. R01DK093690, R01CA123199, RC2ESO18764: Biz bu çalışmalar için mali destek için ettirmeniz, NCI ve NIEHS kabul etmek istiyorum. TMN NIH T32 GM07356 tarafından finanse Rochester Üniversitesi Tıp Bilim Adamı Yetiştirme Programı bir stajyer, Ruth L. Kirschstein Ulusal Araştırma Hizmet Ödülü F30DK093173 altında NIH de bu projeyi destekliyor. CDV Wisconsin-Madison Üniversitesi'nde T32ES007015 tarafından desteklenen T32CA157322 ve ABT tarafından desteklenmektedir. Içeriği s....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Pelet presi | PARR Industries | 2815 | 3mm Zımba & Kalıp seti |
| Analitik Denge | Ohaus | 1918302 | Voyager veya diğer |
| Bunsen brülörü | Fisher Scientific | 03-962Q | |
| Diseksiyon mikroskobu | Leica | L2 | |
| Deltaphase Pad Kit (yeniden ısıtılabilir balmumu) | Braintree Scientific | 39DP | Elektrikli ısıtma yastığına alternatif |
| Sıcak Boncuk sterilizatörü | |||
| İzofluran Buharlaştırıcı | Supera Anestezi Innov | VAP3000 | |
| İndüksiyon Odası | Supera Anestezi Innov | RES644 | |
| F/AIR Teneke Kutu | Supera Anestezi Innov | 80120 | |
| 4 portlu Manifold | Supera Anestezi Innov | RES536 | |
| Yeniden Solunum Devreleri | Supera Anestezi Innov | CIR529 | |
| Giriş/Çıkış Ek Parçaları | Supera Anestezi Innov | VAP203/4 | |
| Basınç Reg/Gauge | Supera Anestezi Innov | OXY508 | |
| Oksijen Akış Ölçer | Supera Anestezi Innov | OXY660 | |
| 21mm Şeffaf Boru | Supera Anestezi Innov | 301-150 | |
| Küçük Fareler Burun Konisi | Supera Anestezi Innov | ACC526 | |
| Steril cerrahi önlük | Midwest Vet Supply | 350.79866.2 | |
| Cerrahi maske | Midwest Vet Supply | 350.50111.2 | 2 katlı w/ ear straps |
| Steril gazlı bez | Midwest Vet Supply | 001.14100.2 | 2 x 2 inç |
| Steril Eldiven | Kimberly Clark | 55092 | |
| Bouffant | Midwest Veteriner Kaynağı | 001.27100.2 | |
| Pamuk Ucu Aplikatörü | Midwest Veteriner Kaynağı | 001.06220.2 | |
| Cerrahi Ovma Yıkama | Midwest Veteriner Kaynağı | 733.80010.3 | |
| Steril Alanlar (Fenestrated) | General Econopak, Inc | 88VCSTF | |
| REAGENTS | |||
| Cholesterol | Sigma-Aldrich | C-3292 | |
| Testosteron Proprionate | Sigma-Aldrich | T-1875 | |
| 17β-estradiol | Sigma-Aldrich | E-2758 | |
| Isofluran | Midwest Veteriner Kaynağı | 193.33161.3 | |
| Carprofen | Midwest Veteriner Kaynağı | 193.70200.3 | Enjekte Edilebilir (Rimadyl) |
| Betadine | Webster Veteriner | 07-836-3379 | |
| Steril tuzlu | Midwest Veteriner Tedarik | 193.74504.3 | NaCl %0.9, Enjekte Edilebilir |
| CERRAHI ALETLER | |||
| Düz Keskin/Künt Makas | İnce Bilimsel Aletler (FST) | 14054-13 | |
| Graefe forseps (Tırtıklı, Dişli, Kavisli) | F.S.T. | 11055-10 | |
| İnce İris makası | F.S.T. | 14090-09 | |
| Graefe Neşter | F.S.T. | 10071-12 | |
| Dumont #5 forseps | FST | 11251-20 | |
| Cam Pastör pipetleri | Fisher Scientific | S67050 | 5" uzunluk |
| Graefe forseps (Tırtıklı, Kavisli) | FST | 11052-10 | |
| Graefe forseps (Tırtıklı, Düz) | FST | 11050-10 | |
| Vicryl Sütür | Midwest Veteriner Kaynağı | 295-92100.2 | 4-0, FS-2, Makas |
| hareketli Emilebilir İğne Tutucu FST | |||
| Yara Klipsleri | Braintree Scientific | ACS CS | 7 mm veya 9 mm klips kullanabilir |
| Refleks Yara Makası | FST | 12031-09 | Yara klipsi boyutuna karşılık |
| gelir Klips Sökücü | FST | 12033-00 | Üniversal |
| Sterilizasyon Kabı | F.S.T. | 20810-01 | Herhangi bir otoklavlanabilir kap, |
| iğneli Şırınga BD | 148292C | 1cc, 25Gx1 | |
| Kulak Etiketi Aplikatörü | Ulusal Bant Etiketi Co. | 1005s1 | Kulak çentiğine alternatif |
| Küçük Hayvan Kulak Etiketleri | National Band Tag Co. | 1005-1 |
Kaynaklar
- Cancer Facts Figures. 4, American Cancer Society. (2010).
- McVary, K. T. BPH: epidemiology and comorbidities. Am. J. Manag. Care. 12, S122-S128 (2006).
- Nicholson, T. M., Ricke, W. A.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
