Bu çalışmanın genel amacı, bir perakende deli bir ortamda gıda kaynaklı patojen Listeria monocytogenes potansiyel çapraz kontaminasyon mekanizmasını göstermekti. Bu metodoloji, patojen kirlenme izlemek için farklı ortamlarda çeşitli tatbik edilebilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Floresan Tozu Kullanımı Perakende Ortamlarda Mikrobiyal Bulaşma Takip - Bir Perakende Deniz Çevre Örneği
Bu makalede
Özet
Özet
Perakende ortamında gıda kaynaklı patojenlerin çapraz kontaminasyon gıda kaynaklı hastalık riskinin artmasına katkıda önemli bir halk sağlığı sorunudur. Böyle deli et, peynir, ve bazı durumlarda taze üretmek gibi hazır yemek (RTE) işlenmiş gıdalar gibi Listeria monocytogenes gibi patojen bulaşma nedeniyle gıda kaynaklı hastalık salgınları dahil edilmiştir. L. ile ilgili olarak monocytogenes, deli dilimleme genellikle çapraz bulaşma ana kaynağıdır. Bu çalışmanın amacı bakteri kontaminasyonu taklit ve bir perakende ortamında bu kirlenme izlemek için floresan bir bileşiği kullanmak oldu. Bir alay deli mutfak perakende ortamını simüle etmek için tasarlanmıştır. Deli et floresan bileşik ile aşılanır ve gönüllü bir gıda perakende çalışanın beklenen benzer görevleri bir dizi tamamlamak için işe alındı. Gönüllüler, paket dilim ve bir deli buzdolabında et saklamak için talimatı verildi. Potansiyelbulaşma belirli alanlarda swabbing ve bir spektrofotometre ile temizlenmesi alanının optik yoğunluğu ölçerek sahte perakende ortamında takip edildi. Sonuçlar dilimleyicide buzdolabı (yani deli durumda) kavrama ve çeşitli alanlarda çapraz kontaminasyon riskinin en yüksek olduğunu gösterdi. Bu çalışmanın sonuçları, perakende çalışanlar için daha odaklı eğitim materyali geliştirmek için kullanılabilir. Buna ek olarak, benzer metodolojileri de gıda üretim ortamlarında (örneğin küçük çiftlikler), hastaneler, bakım evleri, yolcu gemileri ve otellerde mikrobiyal kontaminasyonu izlemek için kullanılabilir.
Giriş
Özellikle bireysel bölümündeki yiyecek hazırlama ortamında kaynaklı patojenlerin, çapraz kontaminasyon nedeniyle etler gibi sebze 1-5 de dahil olmak üzere çeşitli kaynaklardan gelen gıda kaynaklı bir hastalık riski için önemli bir husustur. Çoğu zaman, bakteriyel patojenler kirlenmiş gıda ürünleri ile 6 perakende ortamını girin. Tüketilmeden önce 7 başka müdahale veya tedavi (yani pişirme veya ısıtma), genellikle olduğu gibi perakende seviyesinde hazırlanmış hazır yiyecekleri özellikle endişe vardır. Ayrıca, kontamine RTE gıda mevcut patojenler daha sonra perakende ortamında diğer gıda ürünleri veya gıda ile temas eden yüzeylere transfer edilebilir.
Çapraz kontaminasyon perakende gıda ortamında hemen hemen her tür içinde ortaya çıkabilir, delis nedeniyle özellikle patojen Listeria monocytog ile RTE şarküteri etler dernek özellikle ilgienes 2. ABD Gıda ve İlaç İdaresi (FDA) ve Tarım Gıda Güvenliği ve Denetim Servisi (USDA-GGBS) ABD Bakanlığı tarafından yapılan risk değerlendirmesi analizleri dayanarak, kirlenmiş şarküteri listeryoz vakaların% 90 olasılıkla sorumludur - nadir bir L. neden henüz ciddi insan hastalığı monocytogenes - Amerika Birleşik Devletleri'nde 8. Genel olarak, gıda ve perakende işyerlerinde hizmet dilimlenmiş şarküteri L. riski ile ilişkili bulunmuştur monocytogenes üretici 9 ile USDA denetlenen fabrikasında presliced şarküteri göre. Bunun nedeni gıda işleyicileri, gelen ham maddeler, ya da tedavi sonrası 7 kirlenmiş olabilir işlenmiş gıdalar patojenlerin giriş ihtimalinin artması olabilir. Genel olarak, listeriozis ABD'de yılda gıda kaynaklı hastalığa neden tahmin ölümlerin yaklaşık% 28'ini
Çünkü InL. artmış risk perakende seviyesinde dilimlenmiş şarküteri etler kontaminasyonu monocytogenes, deli dilimleme kendisi perakende ortamında 2,10 gıda kaynaklı patojenlerin yüzey transferi için önemli bir faktör olarak tespit edilmiştir. Sheen 1 olarak gösterilen, dilimleme tüketilmeden önce son işlem adımdır, bu nedenle deli dilimleme anlayış ve çapraz bulaşmayı 1 önlenmesi hem bir kritik kontrol noktası olarak kabul edilmelidir.
Bu çalışmanın genel amacı gibi Glo Germ gibi bir floresan tozu kullanılarak perakende deli ortamında kirlenmeyi izlemek için bir metodoloji geliştirmek oldu. Bu bakteri çapraz bulaşmayı ve sıhhi uygulamaları 11,12 simüle etmek için kullanılan bir floresan bileşiktir. Bu çalışma dilimleme, çevresini ve diğer şarküteri kontamine etler patojen transferi izlemek için tasarlanmıştır. Bu cont ve yolları anlamak için çok önemlidiretkili girişim ve perakende çalışanlar ve yöneticiler için eğitim materyali hem de geliştirmek için aminleştirme. Benzer bir yaklaşım, diğer işleme ortamlarda (örneğin tavuk ve sığır eti), çiftlikler ve hastanelerde patojen aktarımını simüle etmek için kullanılabilir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1.. Standart Eğri
- 37.5 mg floresan toz tartılır ve 6 ml 200 proof etanol içinde çözülür. 200 derece etanol içindeki Bu çözeltiye 2-kat seri dilüsyonları olun.
- Vortex tüm 10 saniye boyunca numune ve 370 nm'de absorbans ölçümü.
- 1 ml 200 derece etanol başına floresan tozu miktarını hesaplayın.
- Floresan toz konsantrasyonuna göre absorbansı göstermek için (x-ekseni üzerinde 370 nm'de y-ekseni ve emilime mg / ml konsantrasyon) standart bir eğri hazırlanır.
2. Floresan Tozu ile Deli Et (Bologna) inoküle
- Temiz bir bıçak kullanarak ve kesme tahtası yaklaşık 100 mm kalınlığındaki numuneler içine deli et kesti. A, B ve C işaretli üç numune hazırlayın
- Coat örnek bir hafif nemli, temiz bir sünger kullanarak floresan tozu ile eşit bir. Eşit et numunesi üzerinde toz yayıldı. Floresan tozu ile B ve C numuneleri aşılamak etmeyin.
- Plastik wrap ile örnekleri sarın ve 'A' ve bant ile B ve C gibi iki numune kalan olarak floresan toz kaplanmış numunenin etiket.
- Deli durum ya da deney gerçekleştirilecektir sahte mutfakta 4 ° C'de buzdolabında tutulan numuneler.
3. Mock Deli Mutfak Hazırlık
- Mutfakta temiz eldiven ve% 70 etanol sprey sağlayın.
- Dilimleyici alanı çevresinde 13 W ampul ile siyah kompakt floresan ışıkları monte edin.
- Paspas için şablon olarak hizmet etmek üzere bir alüminyum folyo, 5 cm x 5 cm kesme hazırlayın.
- 6 ml% 95 etanol ihtiva eden 15 ml tüpler hazırlayın.
4. Video Ayarı
Aynı zamanda alay deli tüm alanları gözlemlemek için stratejik yerlerde Dağı üç video kameralar. (Protokol 5'te açıklandığı gibi) dilimleme işlemi simüle önce kameralar açın ve gibi (eşzamanlı analiz sonuçları) Protokol 7 olarak açıkladı.
5. Çapraz Bulaşma Track Deli Dilimleme Prosedürleri benzetme
Örneklem büyüklüğü artırmak ve varyasyon dahil, ilgili kurumun Kurumsal Değerlendirme Kurulu tarafından protokolün onayından sonra işe katılımcılar tarafından bu çalışmayı gerçekleştirmek için. Katılımcı ya da deneyim perakende deli ortamlarda çalışan yok olabilir bir üniversite öğrencisi olabilir. Onlar deli girdikten sonra her bir katılımcı eldiven giyer emin olun. Take a siyah bir floresan ışığı altında resim izledi "önce" bir çalışmanın tamamlanmasıyla resim "sonra". Aşağıdaki gibi her katılımcıya açık yazılı ve sözlü talimatları sağlayın:
- Buzdolabına git.
- "A" etiketli et çıkarın.
- Et açınız ve plastik wrap kaydedin.
- Dilimleyicinin taşıma tepsi üzerine eti yerleştirin.
- Et kavrama ile et sabitleyin.
- Güç anahtarı AÇIK konuma getirin.
- SLI ayarlayıncer endeksi topuzu "2".
- Dilim ve şarküteri kağıda et 5 adet dağıtmak.
- OFF güç anahtarını açın ve et kavrama bırakın.
- "A" etiketli plastik torba içinde et dilimlerini yerleştirin.
- Eti "A" sarmaktır ve buzdolabı dönmek.
- TEKRAR "B" ve "C" etiketli etler ile 2-11 Adımları.
6. Miktarının Floresan Tozu
Deli mutfakta sahte dilimleme (Bölüm 5.4) tamamlanmasından sonra floresan tozu niceliğini. Bu aşağıdakileri yapın için:
- Steril 5 cm x 5 cm alüminyum folyo şablonunu kullanarak ve Şekil 1 'de gösterilen alanlar üzerine yerleştirin.
- Bölgeyi çubukla,% 95 etanol ile ıslatılmış steril bir kalsiyum aljinat bezi kullanın ve steril bir polipropilen tüp içinde 6 ml% 95 etanol içinde yer.
- Vorteks tüp iyice ve 370 nm'de absorbans okumak için bir cam küvet transfer.
- Standar bakınAşağıdaki denklem kullanılarak floresan toz miktarının (y) saptamak için eğri d: x emme y = mx + b, m, standart eğrinin eğimi ve b bölümüdür.
- Verilerin normalleştirilmesi için, aşağıdaki formül kullanılarak örnek alan başına floresan tozun yüzde hesaplanır:
7. Video Analiz
Videotape katılımcılar tam görevleri 5,1-5,12 gibi. Sync ve tüm açıları aynı anda görülebilir, böylece DVD diskler için video kayıtları kaydedin. El dokunur sayısını deli ortamında (4 farklı araştırmacılar bağımsız seti komple verileri analiz edecek) çeşitli yüzeylerde (gönüllü alay deli alanlarına dokunmayın kez sayı) kaydetmek için videoları izleyin.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Şekil 1 gönüllüler atanan görevleri tamamlandıktan sonra silinmiştir dilimleyicinin alanlarını temsil eder. Gönüllüler bu çeşitli yüzeylerde el temas ortalama sıklığı analiz videoya alındı. El temas sıklığı dört farklı gözlemciler tarafından analiz edilmiş ve ortalama alındı. Bu sonuçlar, Şekil 2'de gösterilmiştir. Veri et kavrama, deli et sarıcı, deli et ve şarküteri kağıt el teması (8-14 kontakların ortalama) en yüksek oranda olduğunu göstermektedir.
B...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu çalışmanın genel amacı bakteriyel çapraz kontaminasyon gıda kaynaklı hastalık riskini kontrol etmek ve azaltmak için stratejiler geliştirmek amacıyla bir perakende deli ortamda nasıl meydana gelebileceğini göstermekti. Perakende deli çevre L. için özellikle yüksek bir risk vardır kontaminasyonu monocytogenes. USDA-GGBS perakende mağazasında dilimlenmiş deli et deli et dilimlenmiş ve bir federal teftiş fabrikasında 9 paketlendiği listeriosisde ile yedi kat daha yüksek bir ilişki olduğunu b...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Çıkar çatışması ilan etti.
Teşekkürler
Yazarlar bu çalışma ile yardımcı gıda güvenliği laboratuvar öğrenciler ve gönüllüler teşekkür etmek istiyorum. Bu araştırma USDA Ulusal Entegre Gıda Güvenliği Girişimi (NIFSI) hibe (Ödül # 10507316) tarafından finanse edilmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Glo Germ Powder | Glo Germ Co | Satıcıdan satın alındı | |
| Etanol | Sigma | E7023 | |
| Kalıcı işaretleyiciler | Sharpie | Kırtasiye mağazasından satın alındı | |
| Eldivenler | VWR | 82026-424 | |
| Şarküteri Eti | NA | Bologna Chub normal marketten | |
| Kesme Tahtası | NA | NA | A regukar mutfak kesme tahtası |
| Bıçağı | NA | NA | Normal bir mutfak bıçağı |
| 5 cm x 5 cm steril şablonlar | NA | NA | Alüminyum folyo şablonlar 5 cm x 5 cm şablonlar halinde kesilmiş ve sterilize edilmiştir. |
| 15 ml Polipropilen santrifüj tüpleri | VWR | 89039-664 | |
| Pamuklu çubuklar | Puritan | 25-806 | |
| Cam küvetler | VWR | 470019-186 | |
| Vorteks | VWR | 58816-121 | |
| Flip kamera | Flip Ultra HD | NA | Çevrimiçi satın alındı |
| Şarküteri dilimleyici | Bizerba | SE-12 | |
| Şarküteri buzdolabı | True Company | TDBD-722 | |
| Ölçekli | NA | ||
| Milton Roy Company | NA | Spectronic 20D |
Kaynaklar
- Sheen, S., Hwang, C. A. Mathematical modeling the cross-contamination of Escherichia coli O157: H7 on the surface of ready-to-eat meat product while slicing. Food Microbiol. 27, 37-43 (2010).
- Crandall, P., Neal, J. Jr, et al. Minimizing the risk of Listeria monocytogenes in retail delis by developing employee focused, cost effective training. Agric. Food Anal. Bacteriol. 1, 159-174 (2011).
- Koo, O. K., Sirsat, S. A., et al. Physical and chemical control of Salmonella in ready-to-eat products. Agric. Food Anal. Bacteriol. 2, 56-68 (2012).
- Hanning, I. B., Johnson, M. G., Ricke, S. C. Precut prepackaged lettuce: a risk for listeriosis? Foodborne Pathog. Dis. 5, 731-746 (2008).
- Hanning, I. B., Nutt, J. D., Ricke, S. C. Salmonellosis outbreaks in the United States due to fresh produce: sources and potential intervention measures. Foodborne Pathog. Dis. 6, 635-648 (2008).
- Zhu, M., Du, M., et al. Control of Listeria monocytogenes contamination in ready‐to‐eat meat products. Compr. Rev. Food Sci. Food Safety. 4, 34-42 (2005).
- Lianou, A., Sofos, J. N. A review of the incidence and transmission of Listeria monocytogenes in ready-to-eat products in retail and food service environments. J. Food Protect. 70, 2172-2198 (2007).
- Quantitative risk assessment of relative risk to public health from foodborne Listeria monocytogenes among selected categories of ready-to-eat foods. , http://www.fda.gov/downloads(2003 Forthcoming.
- Endrikat, S., Gallagher, D., et al. A comparative risk assessment for Listeria monocytogenes in prepackaged versus retail-sliced deli meat. J. Food Protect. 73, 612-619 (2010).
- Pradhan, A. K., Ivanek, R., et al. Comparison of public health impact of Listeria monocytogenes product-to-product and environment-to-product contamination of deli meats at retail. J. Food Protect. 74, 1860-1868 (2011).
- Jones, C. K. Handwashing Technique Analysis. Patent number 5900067. , (1999).
- Gibson, K. E., Koo, O. K., et al. Observation and relative quantification of cross-contamination within a mock retail delicatessen environment. Food Control. 31, 116-124 (2013).
- Xiao, M., Zheng, G., et al. Method and System for Fecal Detection. Patent number 5821546. , (1998).
- Waldroup, A., Kirby, J. Method and System for Fecal Detection. Patent number 5621215. , (1997).
- Ashby, K. D., Wen, J., et al. Fluorescence of dietary porphyrins as a basis for real-time detection of fecal contamination on meat. J. Agric. Food Chem. 51, 3502-3507 (2003).
- Cabrera-Diaz, E., Moseley, T. M., et al. Fluorescent protein marked Escherichia coli biotype I strains as surrogates for enteric pathogens in validation of beef carcass interventions. J. Food Protect. 72, 295-303 (2009).
- Byrd, J., Hargis, B., et al. Fluorescent marker for the detection of crop and upper gastrointestinal leakage in poultry processing plants. Poult. Sci. 81, 70-74 (2002).
- Vorst, K. L., Todd, E. C., et al. Transfer of Listeria monocytogenes during mechanical slicing of turkey breast bologna, and salami. J. Food Protect. 69, 619-626 (2006).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
