Yöntem makalesi

Farelerde Mesane Ağrı için bir model olarak Mesane Distansiyonunun Uyarılmış Visceromotor Cevapları

DOI:

10.3791/51413

⸱

27 Nisan 2014

 ,  , 
1Department of Biological Sciences and Chronic Pain Research Consortium, Duquesne University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 3-8000000 insan interstisyel sistit / mesane ağrı sendromu (IC / BPS), pelvik ağrı ile kısmen özelliği, bir zayıflatıcı durum muzdarip. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, idrar kesesi ağrı fizyolojik modeli fareler ve sıçanlar kullanılır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Amerika Birleşik Devletleri'nde yaklaşık 3-8000000 kişi interstisyel sistit / ağrılı mesane sendromu muzdarip (IC / BPS), özellikle mesane dolumu ya da üzerine artan aciliyet ve frekans idrar yanı sıra, noktüri ve genel pelvik ağrı ile karakterize bir zayıflatıcı bir durumdur işeme. Yıllardır yapılan araştırmalara rağmen, IC / BPS nedeni belirsiz kalır ve tedavi stratejileri hastalara tam bir rahatlama sağlamak mümkün değildir. Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, bir çok hayvan model IC / BPS ile ilişkili ağrı ve diğer belirtileri taklit etmek için geliştirilmiştir. Böyle bir fare modeli mesane gerilme (UBD) 'dir. Bu modelde, belirli bir basınç sıkıştırılmış hava zaman bir süre boyunca hafifçe anestezi hayvanın mesane teslim edilir. Prosedür boyunca, üstün oblik karın kaslarında teller kas elektriksel aktiviteyi kaydetmek. Bu aktivite visceromotor yanıt (VMR) olarak ve i bilinirnosisepsiyon sa, güvenilir ve tekrarlanabilir bir ölçüsüdür. Burada, cerrahi müdahaleler, fizyolojik kayıt ve veri analizi gibi farelerde bu tekniği gerçekleştirmek için gerekli adımları açıklar. Bu modelin kullanımı ile, birincil duyu nöronları, omurilik ikinci afferent ve mesane ağrı dahil merkezi sinir sisteminin daha yüksek alanlar arasındaki koordinasyon sökülmüş edilebilir. Bu temel fen bilgisi sonra klinik IC / BPS muzdarip hastaları tedavi etmek için tercüme edilebilir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik ağrı resmi olarak yaklaşık üç ay boyunca ya da normal doku iyileşme süresi 1 dakikadan daha uzun süre devam ağrı olarak tanımlanır. Ağrısı Bu tür insanların tıbbi yardım aramak için 2 sürülür ana nedenlerinden biri olan ve yılda 3 635.000.000.000 $ dolara kadar mal olabilir. Mevcut kronik ağrı başa çıkma stratejileri arkaik olarak kabul edilir; tıbbi gelişmeler, NSAID (steroid olmayan anti-enflamatuar ilaçlar) ve opioid yıl sonra doktorlar tarafından reçete birincil tedaviler hala. Ancak bu tedaviler tüm özellikle tam o acı olayın nedenine odaklanan karşı vücut üzerinde analjezik etkileri sağlayan, aynı şekilde ağrı tüm farklı hedef. Daha kronik ağrı muzdarip olanlara yardım etmek için, araştırma dikkat kronik ağrı en sık görülen nedenleri ile ilişkili etiyolojisinde ve olası ağrı spesifik tedaviler doğru kaymıştır edilmelidir. Bu manuscri hedefipt iyi İnterstisyel Sistit / ağrılı mesane sendromu (IC / BPS) olarak bilinen bir durumu anlamak için kullanılan bir model tanımlamaktır.

IC / BPS insanlar, 40 4 yaşın üzerinde öncelikle kadınlar milyonlarca etkileyen bir zayıflatıcı bir durumdur. IC / BPS kesin nedenleri ancak yaygınlık genetik 5, özel diyetler ve yüksek stres seviyesi 6 ile bağlantılı olmuştur, bilinmemektedir . IC / BPS belirtileri bunlarla sınırlı değildir: idrara Artan aciliyet, idrar sıklığında artış, ağrıyan, delici veya mesane dolumu ve işeme sırasında ağrı yanma ve noktüri 7. Bu koşulları yaşayan hastalar, yüksek stres düzeyine sahip ve 8 daha endişeli. Bu özgün stres seviyelerini artırmaktadır artan ağrı, stres sonuçlarını artırmıştır. Araştırmalar, depresyon ve anksiyete düzeyleri idrar ağrıyı aşağıdaki tedaviler, böylece etkili bu pozitif-geri döngüsünü kıran azalttığını göstermiştir 9. IC / BPS için yeni tedaviler keşfetmek zorluklardan biri mesane ağrı temel bir bilim anlayış azlığı olmuştur.

Duruma sinir sistemi katkılarını araştırmak amacıyla, bir çok hayvan model IC / BPS ile ilişkili ağrı ve diğer belirtileri taklit etmek için geliştirilmiştir. Geleneksel olarak, sistit gibi hardal yağı, aseton, lipopolisakarit, hidroklorik asit ve mesane içine siklofosfamid gibi çeşitli kimyasal maddelerin tanıtımı ile hayvanlarda yeniden olmuştur. Ancak hiçbir yabancı maddeler bu nedenle bu modellerin geçerliliğini sorgulayan, IC / BPS hasta steril idrarda bulunur. Ürolojik ağrısı başka bir murin modeli mesane gerilme (UBD) 10. Bu modelde, belirli bir basınç sıkıştırılmış hava zaman bir süre boyunca uyanık veya hafifçe anestezi hayvanın mesane teslim edilir. Prosedür boyunca, üstün oblik karın kasları rekor elektrik activ teller(Bir elektromiyogramın (EMG) ile) kas Sığ. Bu aktivite visceromotor yanıt (VMR) olarak bilinen ve nosisepsiyon 10 arasında, güvenilir ve tekrarlanabilir bir ölçüsüdür. Sağlıklı gönüllülerde benzer içi boş organ şişme (örneğin mesane, rektum) rahatsızlık hissi ve ağrı rapor 11,12 önemli artışlar, genellikle IC / BPS teşhis etmek için kullanılır özellikleri üretir. Bu durumda, uyarılması ya da engellenmesi, elektrik farmakolojik ve optogenetic yöntemleri ile bağlantılı olarak, UBD mesane nosisepsiyon ve ağrı hem çevresel hem de merkezi sinir sistemi bileşenlerinin anlaşılması için kullanışlı ve geçerli bir modeldir.

Şu anda ortak fare suşu, C57Bl/6J kadın üyeleri içinde bizim laboratuvarda kullanıldığı gibi burada, biz UBD için prosedürü açıklar. Nedeniyle erkeklerin kateterizasyon sürecinde zorluklara, bu işlem esas olarak dişi farelerde gerçekleştirilir. Bu protokol Ness vd. 10. ve önceden laboratuarımızda 13 yayınladı. (1) mesane kateteri ve kayıt elektrot cerrahi (2) kısmi anestezi indüksiyon (3) mesane distansiyon ve VMR kayıt ve ham VMR / EMG izleri (4) Veri analizi: Aşağıdaki protokol anestezi altındaki hayvanlarda bu modelin dört temel bileşenlerini açıklar . Nedeniyle organizmanın seçimi, anestezi derinliği ve indüksiyon ve vücut sıcaklığına UBD-VMR prosedürde ince farkları aşağıda açıklanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Aşağıdaki protokol Duquesne Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve Sağlık Ulusal Enstitüleri kurallar ile tutarlı olmuştur.

Steril Teknikleri Kullanarak Tel Elektrotlar ve Mesane Kateterinin 1. Cerrahi İmplantasyonu (toplam süresi 5-10 dk)

  1. Aşağıdaki öğeler öncesinde başlayan ameliyat hazırlıklı olmalıdır:
    1. Aktif (Malzeme Listesi) vücut ısısının ek kontrol için düşük voltajlı ısı lambası otomatik sistem bağlayın izlemek ve bir pil ile çalışan ısıtma pedi ve hayvan vücut ısı probu ile sıcaklık izleme sistemi kullanılarak 37.5 ± 0.5 ° C vücut sıcaklığını ayarlamak.
    2. Izofluran anestezi için gerekli donatım basınçlı hava (ilk demonte için) (örneğin% 100 O 2), izofluran buharlaştırıcı, izofluran, izofluran indüksiyon odası, burun konisi, ve egzoz sistemi içerir.
    3. Inci birleştirine uygun cerrahi aletler, IV kateter ve elektrotlar (Malzeme Listesi)
  2. % 2-3 izofluran da indüksiyon odasında anestezi devlet teşvik. Doğrulma refleks (0-1 dk) kaybolduğunda odasından fareyi çıkarın.
  3. % 2-2.5 izofluran ile burun konisi fare yerleştirin. Tam anestezi kontrol etmek için ayak çimdik. Hayvandan bir tepki olmamalıdır. Sayacı başlatmak.
  4. Farenin her gözün üzerine Oftalmik merhem 1 damla yerleştirin.
  5. Böylece dorsal yüzü aşağı bakacak üzerinde fareyi çevirin.
  6. Üretra yoluyla ve mesane içine kateter yerleştirin.
  7. Kateter yağlamak için cerrahi lube olarak kateter batırın.
    1. Yavaşça hayvanın vücuduna dik sivri forseps ile üretral açılış tutun. Forseps 2. kateter seti ile tutarak, yavaşça hayvanın vücuduna dik bir açı ile üretra içine kateter ucunu.
    2. Sonda üretra ~ 1-2 mm gitti zaman Hemen gövdeye paralel olacak şekilde hafifçe kateter ayarlamakkafasına doğru nişan. Bu hareket, kasık kemiği önlemek için gereklidir.
    3. Yavaşça fare vücut doğru kateter itin. Kateter düzgün ve direnç olmadan vücut boşluğuna kaymalıdır. Kateteri zorlamayın. Kateter sorunsuz girmezse, dik kateter pozisyonuna dönün ve tekrar başlatın.
    4. Kateter tamamen mesane takılı ile hafifçe mesane içindekileri çıkartmak için fare karın aşağı doğru itin. Kateter ağzına kağıt havlu, küçük bir parça iterek kateter tüm idrar çıkarın. Kağıt havlu idrar ile ıslatılır olduğunda, değiştirin. (Aşağıdaki Protokol 3 bakınız.) Mesane distansiyon deneyler sırasında da dahil olmak üzere geri kalan protokol boyunca sürekli idrar çıkarmak
  8. (Bir zemin olarak.) Sol karın kasları ve göğüs içine bir gümüş tel, iki gümüş tellerinin
    1. Kateter sağındaki bölge yanal dezenfekte etmek için, alkol veya iyot için (vücut hayvanın sol tarafı).
    2. Sol abdominal kas Açığa.
      1. Forseps ile sol karın kaslarının yakın cilt tutun. Orta cerrahi makas ile küçük 1-2 cm kesi olun.
      2. Kesi içine makas ucunu yerleştirin ve yavaşça 2 cm kesi genişletin.
      3. Üstün oblik karın kas maruz örten fasya taşımak için forseps kullanın. Bu bölgede bulunan ana kan damarlarının herhangi bir rip / kesmek için dikkatli olun.
    3. Yarısında üç gümüş teller bükün. Kas küçük bir ısırık almak için keskin 21 G iğne kullanın. Sonra, kas yoluyla iğne itin. Kas takarken herhangi bir iç organ delinme veya kas gereksiz zarar ikna etmek için değil dikkatli olun.
    4. 21 G iğne delikleri içine bir gümüş tel bir serbest uca sopa. Yavaşça kas ısırması yoluyla gümüş tel çekmek için kas yoluyla geri iğneyi çekin. Iğne kas serbest olduğunda tel döngü ile aynı hizaya gelene kadar yavaşça kas yoluyla gümüş tel çekmekas ısırık.
    5. Adımları tekrarlayın 1.7.3-1.7.4 ikinci kas tel için. Bu tel ilk kas telden ~ 0.5 cm yerleştirilmelidir. Bu iki tel yerleştirildikten sonra dokunmayın önemlidir.
    6. Kalp aşağı göğüs üçüncü gümüş tel (toprak) takın.
      1. Cildin küçük bir ısırık almak (bir kesi yapmak veya cildi tıraş için gerekli değildir) ve deri yoluyla iğne itmek için keskin 21 G iğne kullanın.
      2. Yukarıda açıklandığı gibi gümüş teli yerleştirin ve deri yoluyla çekin.
  9. Nemli tutmak ve mümkün olduğunca maruz kası üzerinde deri çekmeye maruz kalan kaslar üzerinde 37.5 ° C steril mineral yağ küçük bir miktar koyun.
  10. Sonraki adımları sırasında sıvı seviyelerini korumaya yardımcı olmak için tuzlu su deri altına 0.5 ml enjekte edilir.
  11. Vücut sıcaklığı kolayca korunabilir, böylece hafifçe tarafına hayvan rulo.

2.. Kısmi Anestezi Step-down Prosedürü (Total zaman ~ 75 dk)

Aşağıdaki anestezi protokol Duquesne Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve Sağlık Ulusal Enstitüleri kurallar ile tutarlı olmuştur.

  1. Bölüm hemen sonra (yukarıda),% 1.5 daha düşük izofluran tamamlanır. 15 dakika boyunca bu seviyede tutun.
  2. Alt izofluran anestezi hayvan kısmen şekildedir.
    1. % 0.125 ile alt izofluran her 15 dk hayvan sergileyen bir esneme ayak tutam yanıt ancak seslendirmek ya da başka türlü hareket etmiyor kadar.
    2. Bu, anestezi maddelerinin seviyeleri kurulumları farklılıklara değişebilir ancak tipik olarak,% 0.8-1.0 izofluran seviyesi, en uygunudur. Anestezi uygun düzeyde olduğu zaman Seslendirme ve / veya ambulasyon oldukça nadirdir.

. 3. Elektromiyogram (EMG) Dereceli Basınçlar (15-75 mmHg) ile mesane distansiyonu (toplam süresi - değişken deney bağlı) sırasında kayıt

  1. Kurulum EMG kayıt ve mesane şişkinliği için aşağıdaki öğeleri:
    1. Kur, bir amplifikatör, bir sayisallastirici ve kayıt yazılımı. Bu kurulumda, sayısallaştırıcı (Bölüm 3.1.2 aşağıda basınç ve uyarıcı işaret girişler) amplifikatör için bir giriş ve basınç regülatörü için iki girişi vardır. Tam donanım ve yazılım kurulumu (özel talimatlar için malzemeler listesi) özelleştirilebilir.
    2. Kur hayvana hava basıncı belirli patlamaları sunmak için bir sistem. Bu sistem, aşağıdaki protokolde "zamana basınç regülatörü" olarak adlandırılır. Bu hava basıncı sayısallaştırma, deneme uzunluğunun kontrolü, inter-deneme aralığı otomasyon, deneme sayısının kontrol dahil olmak üzere otomatik bir basınç sağlamaya imkan verir, ve başlangıç ​​dijital sinyal (zamana bağlı bir basınç regülatörü şematik için Anderson ve ark. 14) uyarıcı.
  2. Amplifikatör fare (2 karın tel + 1 zemin tel) tüm kurşun teller bağlayın vesayısallaştırıcı ve dijitalleştirici yazılım kayıt EMG sinyali başlar. Dijitalleştirici yazılımı seçilen ne zaman "Yazma" Not.
  3. Mesane kateteri kağıt havlu çıkarın. (Zamanlanmış basınç regülatörü.) Hava borusu sonda bağlayın
  4. 60 mmHg distansiyon basınçta tek bir 20 saniye deneme sunun.
    1. 60 mmHg akış regülatörü ayarlayın (analog sfigmomanometrenin kullanarak kontrol basıncı.)
    2. 20 saniye basınç şişkinliği darbesi ardından 20 saniye prepressure aralığını (bu dijitalleştirici yazılım kaydedilen 2V uyarıcı sinyal olacaktır) teslim Zamanlı basınç regülatörü ayarlayın.
    3. Deneme (prepressure aralık + basınç şişkinliği deneme) başlatın. Gerçek basınç deneme başladığında, sisteme bağlı 3 Sphygmomanometers kullanarak basıncını kontrol çift.
    4. Basınç şişkinlik Duruşma sırasında, güçlü bir EMG sinyali (> 0.5 V) 20 saniye şişliği sırasında ve muhtemelen sonrasında dikkat edilmelidir. Hayvan abdominal sergileyebilirnal hareket ama hayvansal seslendirmek ya da hareket edilmemelidir. Nadiren de olsa, anormal hareketler veya sesler görülür ise, izofluran düzeyini artırmak.
  5. 1 st 60 mmHg şişliği 1-2 dakika bir intertrial aralıklarla uygun bir EMG sinyali, tekrar adımı 3.4 iki kez daha çikarsa.
  6. Üç 60 mmHg çalışmalarda güçlü sinyaller aldıktan sonra, deneysel distentions gerçekleştirin.
    1. Birçok çalışma, düşük basınçta (10-15 mmHg) başlayan ve 10-15 mmHg artışlarla zararlı basınçları (75-80 mmHg) kadar çalışma kademeli distensions kullanın. Farklı basınçlarda örnek izleri için aşağıdaki temsilcisi sonuçlara bakın.
    2. Tipik çalışmalarda 20 saniye prepressure aralığını, bir 20 saniye basınç şişkinlik deneme ve 1-2 dk intertrial aralığını kapsamalıdır.
    3. Her basınçta üç distentions yapın ve daha sonra (her bir basınç için tek visceromotor tepki elde etmek için) üç deneme karşısında ortalama. Alternatif bir yöntem, p, her bir basınçta, beş distensions erform, yüksek ve düşük denemeler atmak ve daha sonra geri kalan üç yanıtları ortalama.
  7. Bir kez deneysel distensions Kaydı durdurmak deney dosyayı kaydedin ve onaylanmış yöntemler kullanarak hayvan kurban, tamamlandı.

Ham EMG İzler 4. Analizi

  1. Visceromotor tepkiler (yani EMG kayıtları) analizi kolayca on-board tablası yazılımını kullanarak veya bir üçüncü taraf program (Malzeme Listesi) aracılığıyla yapılır Aşağıdaki talimatlar birden çok program kullanarak veya manuel analizini kullanarak bu verileri analiz etmek için kullanılabilecek genel talimatlar vardır .
  2. EMG, basınç ihracat, ve dijitalleştirici yazılım uyarıcı sinyal veri aşağıdakileri yapın:
    1. Deneysel dosyasını açın.
    2. "Dosya" "İhracat olarak tıklatın."
    3. Dosyayı adlandırın ve tıkırtı ", elektronik tablo metin (. Txt)" dosya türünü değiştirin "Kaydet."
    4. Pop-up penceresi, çıktı örnek hızını değiştirmek "1000," başladığı an veri toplama için başlangıç ​​saatini değiştirmek ve bitiş saatini değiştirmek "MAXTIME'ı ()." "zaman kaydırma çıktı işaretleme kutusunu seçin ilk satır olan 0.0 sn, OK "ve". "
    5. Veriler artık çeşitli programlar açılabilir bir metin dosyası olarak ihraç edilecektir. Dosya dört sütun (Zamanlayıcı, VMR (EMG), Basınç, Uyaran) içermelidir.
  3. Test edilen her bir deneysel hayvan için, aşağıdaki matematiksel işlemler.
    1. Her zaman noktasında mutlak değeri hesaplanarak tüm veri EMG sinyali giderin.
    2. Deneyin arka bölümü boyunca ortalama EMG yanıtı belirler.
    3. Arka plan düzeltilmiş veri seti elde etmek için her bir deneyde doğrultulmuş bir veri noktasından bu ortalama arka EMG yanıtı çıkarın.
    4. Her biri 20 saniye için ön, eğri (AUC) altındaki alanı belirlemekArka plan düzeltilmiş veri setinde basınç aralığı.
    5. Plan düzeltilmiş veri setinde her 20 sn basınç distansiyonu deneme için AUC belirleyin.
    6. Bütün deneyde düşük prepressure aralığı AUC tarafından (adım 4.3.5 'te elde edilen) her bir basınç distansiyonu deneme AUC bölün (adım 4.3.4 elde.). Bu, her tam basınç şişliği deneme için normalize ve arka plan düzeltilmiş AUC olduğunu.
  4. Her bir deneysel hayvan için tek bir basınç ortalama birden fazla normalleştirilmiş denemeler Volt normalleştirilen VMR * sn (Vsec) elde edilmiştir.
  5. Deneysel tasarım bağlı verilere uygun istatistik gerçekleştirin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Genel UBD-VMR kurulumunun bir örnek, Şekil 1A 'da görülebilir. Artan basınç adım ham VMR (yani EMG) (Şekil 1B). Sayısallaştırıcı yazılımı kullanılarak kayıt esnasında dikkat edilmesi gereken, ham VMR, basınç ve uyarıcı işaret sinyali Şekil 2'de görülebilir bir artışa neden olur. Görülen en büyük kanal Şekil 2, (V olarak) EMG izidir. EMG iz arka sinyal istikrarlı ve düşük genlikli (<0.2 V) olmalıdır. Arka plan, yüksek veya sporadik büyük sivr...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hastalar genellikle düzenli ağrı tedavisi 15 yanıt vermeyen ağrı zayıflatıcı çünkü insanlarda, interstisyel sistit / ağrılı mesane sendromu (IC / BPS) önemli bir klinik problem teşkil etmektedir. Anlayış ve sonuçta kronik mesane ağrısı tedavisinde önemli sorunlardan biri, zararlı mesane şişliği yanıt katılan normal nöral süreçleri anlamak için. Bu sorunun üstesinden gelebilmek için ise, mesane ağrının bir hayvan modeli gereklidir. Bu model, yeniden üretilebilir, stabil ve kolaylıkla ölçülebilir olmalıdır. Ney...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz Dr kabul etmek istiyorum. Bu sistemi kurarken onların yararlı yardım Robert Gereau, Henry Lai, ve Lara güveç. Biz de bu iş için finansman kaynaklarını kabul etmek istiyorum (BJK - Scan tarafından Ağrı Erken Kariyer Araştırma Grant Çalışmaları Uluslararası Birliği | INGER & JENS BRUUN ve Duquesne University Hunkele korkunç Hastalık Fonu Tasarım Vakfı).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Kızılötesi ısıtma battaniyesi ve izleme sistemiKent ScientificRight-Temp System Bu sistem iki ayrı sıcaklığı izleyecek şekilde ayarlanmıştır. Bu, hayvanı ve ısıtma battaniyesini içermelidir. Ek olarak, sistem ayarlanan bir sıcaklığı korumak için sıcaklığı otomatik olarak ayarlayabilir. Ancak bu otomatik işlev, EMG kaydı sırasında elektriksel parazite neden olur ve kapatılması gerekir. Kent, deneyin riEMG kayıt kısmı sırasında kullanılmak üzere ısıtma yastığı için bir pil takımı sağlayabilir.
İzofluran buharlaştırıcıDraegerVapor 19.1Herhangi bir izofluran buharlaştırıcı çalışacaktır, ancak %0-2 izofluran arasında birden fazla çentik içeren bir taneye sahip olmak yararlıdır.
İzoflurançoklu kaynaklarn/a
%100 Oksijen hava tankıçoklu kaynaklarn/aHayvanın ventilasyonu için
Hava solunum sınıfıçoklu kaynaklarn/aMesane distansiyonu için
24 G 0.56 in IV kateterBD Biosciences 381411Mesane kateterizasyonu için
Surgilube (steril)Savage Laboratories0281-0205-02Herhangi bir cerrahi sınıf yağlama iyi çalışır.
Mineral yağ (steril)çoklu kaynaklarn/a
Tuzlu (steril)çoklu kaynaklarn/a
AG8W Gümüş Tel, 2 m, 0,20 mm (0,008 inç) D, L, İzolasyon Yok Warner InstrumentsW4 64-1318 Bu özelliklere sahip herhangi bir gümüş tel işe yarayacaktır. Telin "klorlanmasına" gerek yoktur."
Oftalmik merhemçoklu kaynaklarn/a
Küçük cerrahi makasçoklu kaynakn/a
Keskin forsepsçoklu kaynakn/a
21 G İğneçoklu kaynakn/a
Çim amplifikatörü P511, 3 uçlu giriş kablosu ileÇim AletleriP511 ( F-P5IC3/REV1)Bu, protokolde kullanılan "amplifikatör"dür.  Aşağıdaki ayarlara sahip amplifikatör: Kalibratör = 1 mV; Düşük frekans = 300 Hz; Amplifikasyon = 20; Yüksek frekans = 10 kHz; Satır filtresi = içinde.
Cambridge Electronic Design (CED) 1401 Plus (veya eşdeğeri)Cambridge Electronic Design1401 PlusBu, protokolde kullanılan "sayısallaştırıcı"dır. WINDAQ veya diğer şirketlerin diğer sayısallaştırıcı sistemleri iyi çalışır; Basınç sinyali, EMG ve uyaran sinyali için girişlere ihtiyacınız var.
CED Spike2 yazılımıCambridge Elektronik TasarımSpike 2Bu, protokolde kullanılan "sayısallaştırıcı yazılım"dır. Sayısallaştırıcı ile aynı üreticiden olmalıdır. Program, basınç (0-100 mmHg ölçek), EMG sinyali (tipik olarak -5 ila +5 V aralığında) ve uyaran işaretleyici (0-2 V) aralığı için 3 kanal ile ayarlanmalıdır.
Hava tankından mesane kateterine akış şemasın/an/a Basınçlıhava tankından hayvan mesanesine bağlantı sırası:  Gilmont akış ölçere boruda 1/4'e kadar hava tankı y konektörüne. Tansiyon aletine y konektörünün 1. dalı.  Branşman 2'den 4 gang vanaya 4 vana çıkışından zamanlanmış basınç regülatörüne 3/32 boruya, zamanlamalı basınç regülatöründen 2. y konektörüne (branşman 1'den tansiyon aletine) branşman 2 ila 3/32 boru ile tek bir giriş  3. Y konektörüne.  Y'nin 1. dalı 3. tansiyon aletine ve 2. dalı hayvan mesane kateterine bağlanır.
Gilmont Akış Ölçer GilmontGF8321-1401Birden fazla marka akış ölçer çalışacaktır. Mesane şişme havası için, akış ölçer yüksek basınçları kaldırabilmelidir (bu Gilmont ölçer gibi).  Solunabilir hava için akış hızı 100 ml/dk'ya kadar ayarlanabilir olmalıdır (tipik fare hızı 500-1.000 ml/dk'dır).
4 Gang vanaEliteBu özel bir ekipman parçasıdır. Elite gang valfi, düşük hava basınçlarındaki balık tankları için tasarlanmıştır. Mesane distansiyon kurulumunda, bu valf basıncın yükselmesi durumunda bir emniyet valfi görevi görür. Tankın ilk açılması sırasında çok yüksek basınç, Zaman Ayarlı basınç regülatöründeki ve/veya bıyıklardaki basınç dönüştürücüsünü bozacaktır. Ayrıca bu vana sistemde az miktarda kaçak sağlayarak 10-80 mmHg arasındaki basıncın ayarlanmasını kolaylaştırır.  
1/4 inç Boruçoklu kaynakn/a
3/32 inç Boruçoklu kaynakyok
"Y" konektörler (1/4 ve 3/32 inç)çoklu kaynakyok
Tansiyon aletiCVSBir eczaneden alınan herhangi bir analog tansiyon aleti bu uygulama için çalışacaktır.   
Zamanlanmış Basınç RegülatörüözelBu, hava basıncının sayısallaştırılması, deneme uzunluğunun kontrolü, denemeler arası aralık otomasyonu, deneme numarasının kontrolü ve uyaran başlangıçlı dijital sinyal dahil olmak üzere otomatik basınç dağıtımına izin veren özel yapım bir makinedir (St. Louis Makine atölyesindeki Washington Üniversitesi). Bununla birlikte, sistemin temel bileşenleri (belirli bir deneme süresi için basınç açma ve kapama) basit bir açma/kapama hat içi anahtarla kontrol edilebilir.   Bir denemenin bu tür bir analog kontrolü, ek analiz parametreleri gerektirecektir (bakınız Protokol 4).  Ek olarak, veri analizi sırasında analog tansiyon aletine dayalı olarak basıncın manuel olarak atanması gerekecektir.   
IGOR ProWavemetricsn/a. Bu deneylerde veri analizi için birçok farklı türde yazılım kullanılabilir.
EMG sinyalinin analizi için

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Merskey, H., Bogduk, N. Classification of Chronic Pain. , IASP Press. (1994).
  2. Gureje, O., Korff, M. V., Simon, G. E., Gater, R. Peristent pain and well-being. A World Health Organization study in primary care. J. Am. Med. Assoc. 280, 147-151 (1998).
  3. Gaskin, D. J., Richard, P. The economic costs of pain in the United States. J. Pain. 13, 715-754 (2012).
  4. Berry, S. H., et al. Prevalence of Symptoms of Bladder Pain Syndrome/Interstitial Cystitis Among Adult Females in the United States. J. Urol. 186, 540-544 (2011).
  5. Tunitsky, E., et al. Bladder Pain Syndrome/Interstitial Cystitis in twin sisters. J. Urol. 187, 148-152 (2012).
  6. Tettamanti, G., et al. Influence of smoking, coffee, and tea consumption on Bladder Pain Syndrome in female twins. Urology. 77, 1313-1317 (2011).
  7. Warren, J. W., et al. Harrison's Principles of Internal Medicine. Longo, D. L., et al. , McGraw-Hill. New York. (2012).
  8. Baldoni, F., Ercolani, M., Baldaro, B., Trombini, G. Stressful events and psychological symptoms in patients with functional urinary disorders. Perceptual Motor Skills. 80, 605-606 (1995).
  9. Tannenbaum, C., Gray, M., Hoffstetter, S., Cardozo, L. Comorbidities associated with bladder dysfunction. Int. J. Clin. Practice. 67, 105-113 (2013).
  10. Ness, T. J., Elhefni, H. Reliable visceromotor responses are evoked by noxious bladder distention in mice. J. Urol. 171, 1704-1708 (2004).
  11. Ness, T. J., Richter, H. E., Varner, R. E., Fillingim, R. B. A psychophysical study of discomfort produced by repeated filling of the urinary bladder. Pain. 76, 61-69 (1998).
  12. Ness, T. J., Gebhart, G. F. Visceral pain: a review of experimental studies. Pain. 41, 167-234 (1990).
  13. Crock, L. W., et al. Central amygdala metabotropic glutamate receptor 5 in the modulation of visceral pain. J. Neurosci. 32, 14217-14226 (2012).
  14. Anderson, R. H., Ness, T. J., Gebhart, G. F. A distension control device useful for quantitative studies of hollow organ sensation. Physiol. Behav. 41, 635-638 (1987).
  15. Dimitrakov, J., et al. Pharmacologic Management of Painful Bladder Syndrome/Interstitial Cystitis: A Systematic Review. Arch. Intern. Med. 167, 1922-1929 (2007).
  16. Qin, C., Van Meerveld, B. G. reenwood-, Foreman, R. D. Spinal neuronal responses to urinary bladder stimulation in rats with corticosterone or aldosterone onto the amygdala. J. Neurophysiol. 90, 2180-2189 (2003).
  17. Randich, A., Mebane, H., DeBerry, J. J., Ness, T. J. Rostral ventral medulla modulation of the visceromotor reflex evoked by urinary bladder distension in female rats. J. Pain. 9, 920-926 (2008).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Visceromotor Yan tMesane A r ModeliElektromiyografi KaydBas n Stim lasyonuAnestezi damesiElektrot mplantasyonuVeri NormalizasyonuS cakl k zlemeNosisepsiyon l m

İlgili makaleler