İnsan endoskopik kafa tabanı yeniden fare modeli nazal mukozal greft kullanılarak beyin ve burun arasındaki yarı geçirgen bir arayüz oluşturur geliştirilmiştir. Bu yöntem, araştırmacılar, sistemik olarak uygulandığında, aksi takdirde, kan-beyin bariyeri tarafından hariçtir yüksek moleküler ağırlıklı terapötik maddelerin merkezi sinir sistemi teslim çalışma sağlar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farelerde Beyin Doğrudan İlaç Teslim heterotopik mukozal aşılanması Prosedürü
Bu makalede
Özet
Özet
Beyne terapötiklerin teslim kan dolaşımına ve beyin dokusu içine polar ve yüksek moleküler ağırlıklı bileşiklerin geçişini sınırlayan kan-beyin bariyeri (BBB) varlığı ile engellenmektedir. İnsanlarda bazı doğrudan dağıtım başarı transkranial kateter implantasyonu yoluyla elde edilmiştir; ancak bu yöntem son derece invaziv ve çok sayıda komplikasyonlar ile ilişkilidir. Daha az invaziv bir alternatif örneğin insanlarda endoskopik transnazal tümör çıkarma ameliyatı sonrasında kafa tabanı hasarlarını tamir etmek için kullanılan burun mukozası gibi ameliyatla takılan bir, yan geçirgen bir zar ile beyin doz olacaktır. Olsa ilaç transfer bu zar etkili BBB bypass ve beyin ve omurilik sıvısına doğrudan dağılırdı. Bu yaklaşım esinlenen, farelerde bir cerrahi yaklaşım Ekstrakranial cerrahi BBB defekti üzerinde engrafted bir donör septal mukoza zarı kullandığı geliştirilmiştir. Bu model, etkili bir şekilde gösterilmiştirbeyne yüksek molekül ağırlıklı bileşiklerin geçişine izin verir. Çok sayıda ilaç adayları BBB geçen aciz olduğundan, bu model nörolojik ve psikiyatrik hastalıklar için yeni tedavilerin klinik öncesi testler gerçekleştirmek için değerlidir.
Giriş
Nörolojik ve psikiyatrik hastalıkların tedavisi ciddi bir şekilde, merkezi sinir sistemi 1-3 ulaşan tüm olası farmasötik maddelerin% 95 in üzerinde önler, kan-beyin bariyeri (BBB) varlığı ile engellenmektedir. Örneğin, Glial nörotrofik faktör (GDNF) türetilmiş bu BBB 4-6 nüfuz edemez, çünkü sistemik olarak verilen, ancak etkisiz olan, beyin içine doğrudan enjekte edildiğinde, Parkinson hastalığının tedavisi için etkili olduğu gösterilmiştir.
Çok sayıda yaklaştı, bu sorunu aşmak için denemek için geliştirilmiştir. Neurotheraputics sistemik teslim İyileştirme beyin kılcal endotel üzerinde bulunan taşıyıcı proteinleri....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Ameliyat öncesi yapılması gereken tüm prosedürleri IACUC ve herhangi bir ek etik ya da yasal yetkililerin tarafından onaylanmış ve insancıl hayvan tedavi uygulamalarını kullanmak emin olun. Bu, steril cerrahi koşullar kullanarak IACUC onaylı yöntem kullanarak fare anestezi, ameliyat sırasında veteriner merhem ile fareler gözleri yağlama ve cerrahi sonrası bakım sağlayan içerir. Prosedürün yönleri onaylanmış olup olmadığını herhangi bir soru varsa cerrahi ile devam etmeyin. Burada gerçekleştirilen tüm işlemler Boston Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi.
1.. Hayvanlarının Hazırlanması ve Cerrahi Malze....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Yeterince büyük bir nazal septum eksplant elde sonraki adımları için çok önemlidir. Bu, Şekil 1a'da gösterilen verici fare kafatasında bir yerde sondaj ile gerçekleştirilebilir. Şekil 1b de gösterildiği gibi, bu yol boyunca kesme yeterli büyüklükte bir eksplant üretecektir. Sondaj derinliği yeterince derin değilse, greft kesilmiş olacak ve beyin yüzeyini kaplamak için yeterince büyük bir zar elde etmek zor olacaktır. Daha fazla doku nazal septum üzerinde kalacaktır çünkü önerilen yo.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Burada tarif edilen prosedüre en zor adım beyin yüzeyi üzerine yeterli büyüklükte bir mukoza zarının başarılı transferidir. Hasat burun septum yeterince büyük ve iyi temizlenmiş ise bu adım önemli ölçüde daha kolay yapılır. Septum ventral kısmı kesilirse, yeni bir greft elde edilmelidir. Delme açısı mukozal membran matkap tarafından zarar görmediğinden emin olmak için fare kafasına dik olmalıdır. Daha geniş bir tavsiye daha sondaj yol alınırsa bu septum bağlı olduğu ekstra doku kaldırmak için çok daha zor olacaktır. Bağ.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Benjamin S. Bleier MD, merkezi sinir sistemine ilaç verilmesinin geçici patent kaplama yöntemleri talebi mucidi.
Teşekkürler
Bu çalışma Parkinson Araştırma 2011 Rapid Response Yenilikler Ödülleri Programı için Mcihael J. Fox Vakfı tarafından finanse edildi. Maliyeciler, çalışma tasarımı, veri toplama ve analizi, yayınlamak kararı, ya da yazının hazırlanmasında herhangi bir rolü vardı.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Fareler | Taconic | C57BL / 6 | |
| Isofluran | Piramal Sağlık Öğrenci | ||
| ince makas | Güzel Bilim Araçları | 91461-11 | |
| Pnömatik matkap | MTI Dental | 333-CB | |
| Matkap ucu | |||
| Forseps | Güzel Bilim Araçları | 91106-12 | |
| % 0.9 Sodyum klorür enjeksiyonu USP | Abbott Laboratories | 4925 | |
| Polistiren Petri kabı | Fisher | 08-757-12 | grefti geçici olarak saklamak için |
| Boncuk sterilizatörü | Güzel Bilim Araçları | 18000-45 | |
| Oksijen/İzofluran Sistemi | SurgiVet | V720100 | |
| Sıcaklık Kontrol Sistemi | Physitemp | TCAT-2LV | |
| Küçük hayvan stereotaksik alet | KOPF | Model 940 | |
| Göz merhemi | |||
| Elektrikli tıraş makinesi | |||
| Pamuk uçlu aplikatörler | Fisher | 23-400-106 | |
| %7,5 Providone iyot | Betadine cerrahi | ||
| ovma %70 Etanol | |||
| Cerrahi bıçak paslanmaz | Tüy | 2976 # 10 | |
| Neşter sapı - # 3 | Güzel Bilim Araçları | 10003-12 | |
| Kafatasını temizlemek için | % 3 Hydogen peroksit | ||
| Vetbond doku yapıştırıcısı | 3M | 1469SB | |
| İğneler | Becton, Dickinson and Company | 305176 | iğne ucu kesilmiş ve ayrıca kullanılan |
| Şırıngalar | Becton, Dickinson and Company | 309597 | |
| Nitril eldivenler | Denville Scientific Inc | G4162 | greftin iyi kapatılması ve korunması için |
| 5-0 Naylon sütür ipliği | |||
| 91201-13 | |||
| Siyanoakrilat yapıştırıcı | iletişimsel olarak temin edilebilen süper yapıştırıcı | ||
| Diş çimentosu kiti, 1 lb, pembe opak | Stoelting | 51458 | |
| İzobütan (2-metilbütan) | Aldrich | M32631 | kuru buz banyosu için |
| Kuru buz |
Kaynaklar
- Cardoso, F. L., et al. Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches. Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).
- Pardridge, W. M. Drug transport across the blood-brain barrier. J. Cereb. Blood Flow Metab
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
