Bu protokol, akut tek naris oklüzyonu kullanan sıçanlarda lateralize erken koku tercihi öğrenimini tanıtır. Yanallaştırılmış öğrenme, aynı hayvanlardaki davranışsal sonuçların incelenmesine ve biyolojik mekanizmaların desteklenmesine izin vererek, hayvanlar arasındaki tasarımların neden olduğu varyansı azaltır. Bu protokol, erken koku öğrenimini destekleyen moleküler mekanizmaları araştırmak için kullanılabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sinir Devresi Temelini Bellek Oluşumunda Diseksiyon için Yenidoğan Sıçanlarda bir Lateralize Koku Öğrenme Modeli
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Kritik bir doğum sonrası dönemde (≤ 10 gün) sıçan yavruları, anne bakımını taklit eden uyaranlarla ilişkili bir koku için kolayca bir tercih oluşturur. Böyle bir tercih hafızası, eğitim parametrelerine bağlı olarak saatlerden günlere, hatta ömür boyu sürebilir. Erken koku tercihi öğrenimi bize, doğal bir öğrenme biçimi için kritik değişikliklerin koku alma devresinde meydana geldiği bir model sağlar. Onu hafıza süreçlerinin analizi için güçlü bir araç haline getiren ek bir özellik de, erken koku tercihi öğrenmesinin kritik dönem içinde tek bir naris tıkanıklığı yoluyla lateralize edilebilmesidir. Bunun nedeni, bu erken yaşta koku alma hemisferlerinin olgun anterior komiseral bağlantılarının olmamasıdır. Bu çalışma, burun tıkaçları kullanarak yanal koku öğrenimi için davranışsal protokolleri özetlemektedir. Akut, geri dönüşümlü naris tıkanıklığı, uzun süreli oklüzyon ve koterizasyon gibi daha agresif yöntemlerle ilişkili doku ve nöronal hasarları en aza indirir. Yanallaştırılmış koku öğrenme modeli, hayvan içi karşılaştırmaya izin verir, bu nedenle hayvanlar arası tasarımlara kıyasla varyansı büyük ölçüde azaltır. Bu yöntem, eğitim tarafından üretilen koku alma sistemindeki devre değişikliklerini araştırmak için başarıyla kullanılmıştır. Gelecekteki yönergeler arasında, bu yanallaştırılmış öğrenme modelini kullanarak koku hafızasının moleküler temellerini keşfetmek; ve fizyolojik değişimi hafıza gücü ve süreleri ile ilişkilendirmek.
Giriş
Olfaction başarıyla gezinmek veya kendi ortamında hayatta kalmak için mümkün olmaz onsuz kemirgenlerde primer duyu yöntemidir. Bu 1 beslemek için annelerini bulmak için koku alma duyusunu kullanmak için, ilk doğum sonrası hafta boyunca görmeniz ne duymak ne yenidoğan yavrular, için özellikle önemlidir. Sonuç olarak, yenidoğan sıçan yavrular basit deneysel manipülasyonlar ile kokuları tercih klimalı edilebilir. Uyaranların çeşitli iç içe geçme çevre 2,3, süt emzirme 4-6, okşayarak ve dokunma uyarısına 7 de dahil olmak üzere yeni yenidoğanlarda kokulara koşullandırılmış tepkileri (Koşullu uyarı, TH), indükleme koşulsuz uyarıc....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Her iki cinsiyette Sprague Dawley sıçan (Charles River) yavrular kullanılır. Litters (doğum PD0 olmak) PD1'in 12 on itlaf edilir. Baraj gıda ve suya ad libitum giriş ile, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde tutulur. Deneysel prosedürler Memorial Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Burun Tak İnşaatı
NOT:. Bu prosedür adapte Cummings ve ark modifiye edildi (1997) 35.
- Kazandırılacak polietilen-20 tüp ve 3-0 ipek sütür konu.
- Yaklaşık olarak 0.8 mm olan polietilen boru 20 küçük bir parça kesin.
- Iplik boru bö....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Burada koku girişini izole ve bir yarımkürede öğrenme tıkanıklığı naris etkinliğini ve bu yöntemin reverzibilitesini göstermek için daha önce kurulmuş sonuçlarının 24 bazı gözden.
Erken koku tercihi eğitim sırasında tek naris tıkanıklık lateralizan koku hafızasına 24 yol açar. Bellek korunmuş naris (Şekil 3) ile sınırlıdır. Yavrular eğitimi sırasında olduğu gibi tıkanır aynı naris ile koku tercihi için test edildiğinde, klimalı koku (örneğin, n.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Kritik bir zaman penceresi içinde sıçan yavrularında lateralizan koku, öğrenme ve bellek modeli ilk Hall ve arkadaşları tarafından kurulmuştur. Çalışmaların 33,34,36 bir dizi, onlar bir koku tercih bellek sıçan yavrularının PH 6 az bir naris için koku + süt eşleşmeleri tarafından lateralize olabileceğini gösterdi. Tercih bellek aynı naris eğitim ve test sırasında açık olduğunda sağlam, ancak tıkalı naris bloke edilmemiş ve kontrol edilmiş olduğu zaman gözlemlenmemiştir. Artık oldu böylece Ancak, ön koku korte.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma, Q. Y.'ye bir CIHR işletme hibesi (MOP-102624) ile desteklenmiştir. Çalışma boyunca yararlı tartışmalar için Dr. Carolyn Harley'e, teknik destek için Dr. Qinlong Hou, Amin Shakhawat ve Andrea Darby-King'e teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Polietilen 20 boru | Intramedic | 427406 | Radyoopak olmayan, toksik olmayan |
| 3-0 İpek sütür ipliği | Syneture | Sofsilk | Emici Olmayan |
| Silikon gres | Warner Instrument | 64-0378 | Kokusuz |
| %2 Ksilokain jeli | AstraZeneca | Prod. No 061 | Lidokain hidroklorür jöle, yerel eczaneden satın alındı |
| Boya fırçası | Dynasty | 206R | Benzer boyut/diğer markalar da işe yarıyor |
| Nane özü | Sigma-Aldrich | W284807 | Diğer markalar da iyi olmalı |
| Eğitim kutusu | Özel yapım | N/A | Akrilik kutu (20 x 20 x 5 cm3), bkz. Şekil 2A. Kutu için parametreler ve malzeme kritik değildir ve değiştirilebilir. Kullanılan malzeme kokusuz olmalı ve kokuları emmemelidir |
| Test odası | Özel yapım | N/A | Paslanmaz çelik (30 x 20 x 18 cm3), bkz. Şekil 2B. Oda için parametreler ve malzeme kritik değildir ve değiştirilebilir. Örneğin, paslanmaz çelik yerine akrilik bir oda kullanılabilir |
| pCREB antikoru | Hücre Sinyalizasyonu | 9198 | Ser 133 (87G3) Tavşan mAb |
| Kloral hidrat | Sigma-Aldrich | C8383 | Yok |
| Paraformaldehipe | Sigma-Aldrich | P6148 | Yok |
| Sükroz | Sigma-Aldrich | S9378 | Yok |
Kaynaklar
- Gregory, E. H., Pfaff, D. W. Development of olfactory-guided behavior in infant rats. Physiol Behav. 6, 573-576 (1971).
- Alberts, J. R., May, B. Nonnutritive, thermotactile induction of filial huddling in rat pups. Dev Psychobiol. 17, 161-181 (1984).
- ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
