Bu yazıda, erişkin sıçanlarda homolog kan pıhtıları (fibrin açısından zengin) ile embolik orta serebral arter tıkanıklığı oluşturmak için standart bir yöntem gösteriliyor. Bu model, insan iskemik inmesini yakından taklit eder ve iskemik inme için trombolitik tedavinin klinik öncesi çalışması için uygundur.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Sıçanlar Homolog Kan pıhtısı ile İskemik İnme emboli Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO)
Bu makalede
Düzeltme bildirimi
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Özet
Özet
Rekombinant doku plazminojen aktivatörü (tPA) kullanımı ile Klinik, trombolitik tedavi akut iskemik inme için en etkili tedavi yöntemidir. Bununla birlikte, tPA ve kullanımı bu yakın tedavi açısı ile ve hemorajik transformasyon riski ile sınırlıdır. Iskemik inme tedavisi için yeni trombolitik ajanlar ve stratejiler incelemek için uygun inme modeller geliştirmek için acil bir ihtiyaç vardır. Intraluminal sütür MCAO'dan ve embolik MCAO'dan: Şu anda, iskemik inme modelleri başlıca iki türü sıçanlar ve farelerde geliştirilmiştir. Intraluminal sütür tekniği ile MCAO modeller yaygın mekanizması odaklı inme araştırmalarında kullanılan rağmen, bu sütür modelleri klinik durumu taklit değil ve trombolitik çalışmalar için uygun değillerdir. Bu modeller arasında, emboli MCAO modeli yakından insan iskemik inme taklit ve trombolitik tedavinin klinik öncesi araştırma için uygundur. Bu emboli modelin ilk Ov tarafından sıçanlarda geliştirilen1992 yılında diğ. 1 ergaard ve ayrıca Zhang ve arkadaşları tarafından karakterize edilir. 1997 2'de. embolik MCAO artan ilgi kazanmış olmasına rağmen, çok sayıda laboratuarlar tarafından karşılaşılan sorunlar vardır. Trombolitik araştırma için artan ihtiyaçlarını karşılamak için, biz MCA topraklarında öngörülebilir bir enfarktüs hacmini geliştirmek sıçan, embolik MCAO'dan son derece tekrarlanabilir model sunuyoruz. Kısaca, bir tadil edilmiş 50-PE tüp hafifçe MCA kökenini ulaşır kateterin ucuna kadar iç karotid arterin (ICA) lümenine dış karotid arter (ECA) ilerletilir. Kateter sayesinde, tek bir homolog kan pıhtısı MCA kökeni yerleştirilir. MCA tıkanıklığının başarısını belirlemek için, bölgesel serebral kan akımı izlendi, nörolojik açıkları ve enfarktüs hacimleri ölçüldü. Bu çalışmada sunulan teknikler inme araştırma için bu modeli kurulması için teknik sorunların üstesinden gelmek için araştırmacılara yardımcı olmalıdır. </ P>
Giriş
İnme ABD'de ölüm üçüncü önde gelen nedenidir, ancak akut inme için tedavi seçenekleri sınırlı kalmıştır. Şu anda, kan pıhtıları çözmek için yeniden birleştirici doku plazminojen aktivatörü (tPA) intravenöz infüzyon akut iskemik inmenin en etkili yöntemdir. Bununla birlikte, tPA ve kullanımı bu yakın tedavi açısı ile ve intraserebral kanama riski ile sınırlıdır. Bu nedenle, trombolitik araştırma için uygun inme bir modeli acilen ihtiyaç vardır.
Orta serebral arter (OSA) en sık insanlarda inme tıkalı arter olduğunu. Bu arter üzerinde duruldu, iskemik inme birçok hayvan modelleri kurulmuştur. Şu anda, MCA tıkanarak kemirgen fokal iskemi ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Etik Beyanı: (330-380 g ağırlığında) Sprague-Dawley sıçanları bu protokolde kullanılmıştır. Bu protokol LSU Sağlık Bilimleri Merkezi-Shreveport Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış ve (sekizinci baskı, Ulusal Bilimler Akademisi, 2011 'Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanımı için Kılavuz' ile uyumlu olduğunu edildi ).
Modifiye PE-50 Tube 1. Hazırlık
- Yavaş yavaş tüp yumuşatmak, El bir gaz ateş üzerinde bir 30 cm uzunluğunda PE-50 tüpü tutmak. Yavaşça tüp germek.
- Bir dijital kumpas (Şekil 1) kullanarak gerilmiş tüp üzerinde bir nokta seçin, işaretlemek ve (dı....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Lazerli Doppler flowmetri (LDF), serebral iskemi 6,7 indüksiyonu sırasında kan akımında izlemek için kullanıldı. Bizim laboratuvar dahil pek çok laboratuar başarılı MCA tıkanıklığı olan hayvanları tanımlamak için kan akımında kullanarak edilmiştir, ancak bazal eşikleri ölçüm site ile ilgili laboratuarlar arasında değişiyordu. LDF bir prob 2 mm'lik posterior konumlandırılmış ve daha önce 6 açıklandığı gibi 5 mm'lik bregma lateral. CBF, 0 ° C'de izlenmiştir 5, 15, 30, 60, 90 ve 120 dakika pıhtı enjek.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu çalışmada, MCA kökeni, bir fibrin pıhtısı zengin tarafından kapatılan edildiği sıçan, bir embolik MCAO felç modelinde gerçekleştirmek için standart bir yöntem gösterilmiştir. Bu modelin en büyük avantajı ise: fibrin-zengin kan pıhtısı ile MCA kök tıkanıklığı insanlarda tromboembolik inme benzer, embolik inme modeli fibrinolitik tedavinin klinik öncesi soruşturma yapılması için uygundur, ve bu model geliştirmek olduğunu MCA tarafından sağlanan topraklarında bir tekrarlanabilir ve öngörülebilir enfarktüs hacmi.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Açıklayacak herhangi bir potansiyel çatışan çıkarımız yok.
Teşekkürler
Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri hibe HL087990 (G.L.) tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| rh-tPA | Kimyasal | Genentech | |
| 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür | Kimyasal Sigma | T8877 | |
| Anestezi buharlaştırıcı | Ekipmanları | Soma Teknolojisi | Dräger Buharı 19.1 |
| Şarj edilebilir yüksek hızlı mikro matkap | Ekipmanları | Güzel Bilim Araçları | 18000-17 |
| Kavisli makas | Ekipmanları | Güzel Bilim Araçları | 14117-14 |
| Dumont forseps (Tıbbi # 7) | Ekipman Güzel Bilim Araçları | 11270-20 | |
| Dumont forseps (Tıbbi # 5) | Ekipman | Güzel Bilim Araçları | 11251-35 |
| Vannas tarzı yaylı makas | Ekipman | Güzel Bilim Araçları | 15000-03 |
| Veteriner kurtarma odası | Ekipman | Peco Hizmetleri | V1200 |
| Genie plus şırınga pompası | Ekipmanları | Kent Scientific Corporation Sıçan | |
| beyin matrisi | Ekipmanları | Kent Scientific Corporation | RBMA-310C |
| Dijital kumpas ve nbsp; | Ekipman | Dünyası Hassas Aletler | 501601 |
| Diseksiyon mikroskobu | Ekipmanları | Dünya Hassas Aletler | PZMTIII-BS-LWD |
| Hamilton şırınga | Ekipmanları | Hamilton | model 710 |
| Homeotermik battaniye kontrol ünitesi | Ekipmanları | Harvard Aparatı | |
| Elektrikli kesme | makinesi Ekipmanları | Braintree Scientific | CLP-9931 |
| Veteriner elektrocerrahi ünitesi | Ekipmanları | MACAN İmalat Şirketi | MV-9 |
| Kan akış ölçer Ekipmanı | Adinstruments | ||
| PowerLab 4/30 | Ekipman | Adinstruments | |
| LabChart 7.2 | yazılımı | Adinstruments | |
| 1 ml şırınga | Sarf malzemesi | Becton, Dickinson and Company | 309659 |
| 23 G iğne | Sarf Malzemesi | Becton, Dickinson and Company | 305143 |
| 30 G iğne | Sarf malzemesi | Becton, Dickinson and Company | 305106 |
| PE-50 boru | Sarf malzemesi | Becton, Dickinson and Company | |
| 427517 PE-10 boru | Sarf Malzemesi | Becton, Dickinson and Company | 427400 |
| 6-0 İpek sütür | Sarf Malzemesi | Harvard aparatı | 723287 |
| 5-0 İpek sütür | Sarf Malzemesi | Harvard Aparatı | 517607 |
Kaynaklar
- Overgaard, K., Sereghy, T., Boysen, G., Pedersen, H., Høyer, S., Diemer, N. H. A rat model of reproducible cerebral infarction using thrombotic blood clot emboli. J Cereb Blood Flow Metab. 12 (3), 484-490 (1992).
- Zhang, R. L., Chopp, M., Zhang, Z. G., Jiang, Q., Ewing, J. R. A ra....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Düzeltme
Formal Correction: Erratum: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats
Posted by JoVE Editors on 11/01/2014. Citeable Link.
A correction was made to Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats. The institution information was updated.
The institution "Louisiana State University Health Science Center" was changed to "Louisiana State University Health Science Center, Shreveport".
