Bir Floresan Gümrükleme Testi kullanarak Zebra balığı Böbrek Fonksiyon Değerlendirilmesi

Summary

Zebra balığı, kronik böbrek hastalığı (KBH) modellemek için popüler bir araçtır. Ancak, kendi küçük boyutu imkansız geleneksel yöntemlerle böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için yapar. Biz CKD zebrafish böbrek fonksiyonunun kantitatif analiz sağlayan bir floresan boya böbrek boşluk tahlil ¹ açıklar.

Abstract

Zebra balığı embriyo organogenezi çalışma ve insan genetik hastalık modellemek için bir uysal bir model sunuyor. Göreli basitliğine rağmen, Zebra balığı böbrek geliştirir ve insanlar hemen hemen aynı şekilde çalışır. İnsan böbrek yapımında önemli bir fark sadece iki olan Zebra balığı göre nefron milyonlarca varlığıdır. Ancak, temel fonksiyonel birimler halinde böyle karmaşık bir sistemin basitleştirilmesi böbrek geliştirir ve nasıl çalıştığını anlayışımızı destekli etti. Zebra balığı, glomerulus bulunduğu orta hat cloaca birbirine kaynaştırarak önce embriyonik eksen aşağı ikili çalıştırmak sapmak iki Pronephric tübüllerine ilk kan filtrasyon sorumludur. Pronephric tübüller ağır nihayet cloaca ^2-4 vasıtasıyla çıkmadan önce çeşitli çözünenlerin alışverişini sağlayan, parçalı tübül boyunca süzülen maddenin hareketini kolaylaştıran hareketli kirpikler tarafından doldurulur. CKD, inc sorumlu Birçok genlerciliogenesis ile ilgili olanlar luding, zebrabalıkları ⁵ incelenmiştir. Ancak, büyük bir beraberlik geri genetik manipülasyon sonra Zebra balığı böbrek fonksiyonunu değerlendirmede zorluk olmuştur. İnsanlar çoğunlukla nedeniyle sucul ortamda ve küçük boyutu, Zebra balığı olmayan translasyonel kanıtladık Geleneksel tahliller böbrek disfonksiyonu ölçmek için. Örneğin, embriyonik üre ve kreatinin içeriğinin analizi için balık kademeli gelen bunlar çok küçük oldukları gibi, kan çıkarmak için fiziksel olarak mümkün değildir. Buna ek olarak, Zebra balığı genellikle ilk hasta muayeneleri sırasında yapılan basit bir proteinüri 'yağ çubuğu' üzerinde test için yeterli idrar üretemezler. Böbrek fonksiyonu ^1,6-9 üzerinden bir okuma vermek için, damar ile ilgili ve dışarı böbrek yoluyla niceliksel olarak, zaman içinde, bir floresan boya açıklık izlemek için zebrabalıkları optik saydamlığı kullanan bir floresan deneyi tarif eder.

Introduction

İnsan böbrek kanından metabolik atıkların filtreleme ve hücresel homeostazı sürdürmek için gerekli eriyiklerin kurtarma önemli bir rol oynar. Böbrek fonksiyon bozukluğuna neden olan insan genetik hastalıkların bir dizi vardır. En yaygın kalıtsal böbrek hastalığı böbrek tübülleri içindeki sıvı dolu keseler gelişimi ile karakterize otozomal dominant polikistik böbrek hastalığı (polikistik böbrek) 'dir; cystogenesis kaynaklanan hasar böbrek fonksiyonu ¹⁰ için zararlıdır. 800-1: polikistik böbrek 1 oluştuğunun vardır 1,000 ve 8 hesapları - son dönem böbrek yetmezliği ^{(SDBY), 11} hastada% 10. Birkaç genler yaklaşık% 85 ve sırasıyla ^12,13

Protocol

Etik Beyanı: Hayvan bakım, hayvancılık ve prosedürler Hayvanlar (Bilimsel Prosedürler) Yasası 1986 Tüm hayvan deneyleri Biyolojik uygun Ana Sekreteri (PIL No 70/7892) tarafından verilen lisanslar altında gerçekleştirilmiştir tarafından tanımlanan ve kontrol edilir Hizmetleri Yönetimi Grubu ve Biyolojik Hizmetleri Etik Komitesi, SGUL, Londra, İngiltere. Tüm çabalar kullanılan hayvanların sayısını azaltmak ve refah acı en aza indirmek ve geliştirmek amacıyla hem usul ve hayvancılık rafine yapılmıştır.

1. Araçların, Anestezik hazırlanması ve Floresan Boya

1. Bir mikropipet çektirmesi ve (filamentler olmadan) borosilikat standart duva....

Results

Dünya çapında ¹⁶ 160,000 kişiyi: Bardet-Biedl sendromu (BBS) yaklaşık 1 etkileyen nadir heterojen ciliopathy olduğunu. Polikistik böbrekler olmak üzere ilgili bir takım sorunlar ile başvururlar, daha sonra hastalar sıklıkla böbrek diyaliz veya transplantasyon ²⁴ gerektirir. SDBY CKD ¹⁶ gelişmekte olan hastaların yaklaşık% 30 ile, BBS içinde en sık ölüm nedenidir. Şu anda, 20 sigara ile ilgili genler yayınlanmış genotip-fenotip dernek ile BBS suçlanmıştır. BBS proteinleri hastaların karak.......

Discussion

Zebra balığı, insan genetik hastalık modellemek için değerli bir araç sunmak, in vivo araştırma için bilimsel bir enstrüman olarak kullanılması böbrek dahil olmak üzere birçok biyolojik sistemlerin, genetik arıza detaylı çalışmalar sağlamıştır. Çok şimdi Zebra balığı böbrek geliştirir ve işlevleri nasıl anlaşılmaktadır. İnsan nefrogenezisi ve hastalığa neden olan genlerin ²¹ ile homoloji çarpıcı benzerlikler anlamada temel hale nasıl Zebra balığı resimli nasıl böbrek patolojisi ile gen fonksiyonu kur.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
P-97 SUTTER Alevli/Kahverengi tip mikropipet çektirme	Intracel	P-97
borosilikat standart duvar kılcal damarları	Harvard Aparatı	30-0017
Cam mikroskop slaytları	VWR International	631-0109
Epoksi Reçine Tutkal	Evo-Stik
Rhodamine B 10.000 MW etiketli Dextran	Life teknolojileri	D-1824
N-feniltiyoüre	Sigma-Aldrich	P7629
Metilen mavisi	Sigma-Aldrich	M9140
Etil 3-aminobenzoat metansülfonat tuzu	Sigma-Aldrich	A5040
metilselüloz	Sigma-Aldrich	M0512
hava kompresörü;	Haz-Hava	OF302-15
Picospritzer III	Parker Aletleri	051-0500-900
Kompakt 3 Eksenli Kontrol Mikromanipülatörü ve nbsp;	Marzhauser	MM33
Diseksiyon stereo mikroskop	Nikon	SMZ1000
mikro yükleyici uçları	Eppendorf	5242956003
Dumont #5 forseps	Sigma-Aldrich	F6521
kademeli mikrometre	Pyser- SGI	02A00404