Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bir Penetran Mikro-elektrot Array ile bir Kırımsız Hipokampal Hazırlık Sinir Faaliyet Yayılım

8.2K görüntüleme

DOI:

10.3791/52601

27 Mart 2015

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Biz nöronların CA1-CA3 dizi koruyan bir in vitro katlanmamış hipokampus geliştirdik. Nüfuz mikro elektrot dizisi ile birlikte, sinir aktivitesi hem uzunlamasına hem de enine yönlerde izlenebilir. Tüm hipokampta yayılma aynı anda kaydedilebilir Bu yöntem hippocampal slice preparatlarda fazla avantajlar sağlamaktadır.

Özet

Bu protokol, hipokampus sinir aktivitesi eşleştirmek için bir mikro-talaşlı dizi ile birlikte in vitro düz hipokampus hazırlanmasında yeni hazırlanması için bir yöntem tarif eder. enine hipokampal dilim hazırlık hipokampus elektrofizyoloji çalışma en yaygın doku hazırlıktır. Bir uzunlamasına hipokampal dilim de hipokampus uzunlamasına bağlantıları araştırmak amacıyla geliştirilmiştir. kalınlığı yeterli oksijen difüzyonu sağlar, çünkü dokunulmamış fare hipokampüs, in vitro olarak yapılabilir. Doku bazı eksik ya da katlanmış ya olduğundan Ancak, bu üç hazırlıkları nöral yayılımı doğrudan erişim vermeyin. katlanmamış sağlam hipokampus enine ve in vitro hipokampus sinyal yayılma tam ölçüde analiz dokuya doğrudan erişim için düz bir konfigürasyonda boyuna bağlantıları hem de sağlar. Etkili bir t nöral aktiviteyi izlemek içinO hücre tabakası, özel imal edilmiş mikro-elektrot dizisi (PMEA) nüfuz yaptı ve katlanmamış hipokampus başvurdu. Yüksekliği 200 mikron 64 elektrot ile PMEA derin fare hipokampus içinde nöral aktiviteyi kayıt olabilir. katlanmamış hipokampal hazırlanması ve PMEA benzersiz kombinasyonu gürültü oranı yüksek bir sinyal ile hipokampusun iki boyutlu CA1-CA3 bölgeleri hızı ve sinir aktivitesinin yayılma yönü incelemek için yeni bir in vitro araç sağlar.

Giriş

Nöral sinyallerin sinir iletimi veya ilerlemesini anlamak beyinde 1-3 normal fonksiyon ve patolojik durumlarda hem nöral iletişim mekanizmasının belirlenmesi için çok önemlidir. hipokamp bu bellek, ve mekansal izleme gibi pek çok beyin fonksiyonlarında önemli bir rol oynar ve önemli ölçüde davranışı, 1,6 etki, çeşitli patolojik değişikliklerinin olduğu için beyindeki en yaygın olarak araştırılmış yapılardan biridir. Hipokampus karmaşık bir organizasyon sergiler rağmen, yapısı farklı unsurları kolayca tespit ve dilim hazırlama 4-6 ulaşılabilir. Hipokampusun enine yönde nöral etkinlik kıvrımlarının (AD), CA3, CA1 andsubiculum 4,5 ihtiva tri-sinaptik yolu ile yaymak için bilinmektedir. Bu sinaptik iletim ve aksonal iletim communicati için çok önemli bir rol oynadığı da düşünülmektedirBu enine devresinde 4,6 üzerinde. Ancak, sinir sinyalin yayılma enine ve boyuna yönlerde 4,6 hem de yer alır. Bu hipokampus tamamen yayılma 4 belirli bir yöne gözlem sınırlamak dilim hazırlıkları kullanılarak araştırılmıştır edilemez olduğunu ima eder. uzunlamasına dilim uzunlamasına eksen 5 boyunca aksonal yolları araştırmak için geliştirilmiştir. Araştırmacılar ağırlıklı enine ve boyuna eksenleri sırasıyla 6 boyunca davranış özel gama ve teta salınımlar gözlemledik. Bu davranışlar ayrı ayrı ele alınmıştır, ancak her iki yöne aynı anda erişim bu davranışları anlamak önemlidir. Hatta sağlam hipokampus hazırlık gelişimi ile, bunun nedeni hipokampus 4 katlanmış-yapısına tüm dokusu boyunca yayılmasını izlemek zordur. katlanmamış hipokampus dolu nöronlar erişim sağlardüz iki boyutlu hücre tabakası 7,8 formunda.

Dentat girus (DG), (Şekil 1) açılma olarak, hipokampus, enine ve uzunlamasına bağlantı hem CA3 ve CA1 her ikisini de içeren iki boyutlu bir tabaka halinde düzenlenmiş, piramidal hücre tabakası ile sağlam kaldığı bir dikdörtgen şekline sahip düzleştirilmiş bir şekli benimser Nöral yayılmasını araştırmak için kullanılabilecek nöral doku düz bir parça bırakarak (Şekil 2) 8. Sinir aktivitesi daha sonra münferit cam pipetler, mikroelektrot dizileri, uyarıcı elektrot ve aynı zamanda gerilim duyarlı boyalar (VSD), 3,7,8 ile izlenebilir. Buna ek olarak, transgenik farelerin genetik olarak kodlanmış gerilim göstergesi yayılım modelini 9 izlemek için kullanılabilir.

katlanmamış hipokampal ağ yapılandırması düz optik yöntem kayıt için değil, aynı zamanda bir mikroelektrot dizisi için uygundur. Mpiyasada mevcut dizilerin ost düz ya da düşük profilli elektrotlar ile imal edilir ve doku dilimleri ve kültürlü nöronlar 10-12 hem nöral aktiviteyi kaydedebilirsiniz. Nöronların soma dokuya daha derin bulunduğu çünkü sinyallerin sağlam bir dokudan elde edilir, ancak bir sinyal-gürültü oranı (SNR) azalır. Yüksek boy oranları ile mikroelektrod elektrot diziler SNR geliştirmek için gereklidir.

Bu amaçla, bir nüfuz mikroelektrot dizi (PMEA), laboratuarda geliştirilmiş ve katlanmamış hipokampus 7,13 bir 20 um çapında ve 200 mm yüksekliğinde 64 sivri sokulmasıyla direkt olarak dokunun araştırmak olanağı sağlar . Bu mikroelektrot dizisi gerilim duyarlı boya görüntüleme kıyasla daha yüksek SNR sahiptir ve SNR bir deney 7,13 sırasında sabit kalır. katlanmamış hipokampal hazırlanması ve PMEA'nın kombinasyonu yatırım için yeni bir yol sağlariki boyutlu düzlem üzerinde nöral yayılmasını Igate. Bu tekniği kullanarak deneyler zaten sinirsel aktivite bağımsız sinaptik veya elektrik sinaps 7 yaymak sayede hipokampus nöral sinyal yayılım mekanizmaları hakkında önemli sonuçlar vermiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

NOT: Hayvan deneysel protokolleri gözden ve üniversitede Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. P20 P10 çağındaki her iki cinsiyetten CD1 fareleri bu çalışmada kullanılmıştır.

Cerrahi ve Deneysel Kayıt için 1. Çözümler

  1. NaCl 124, KCI 3.75, KH 2 PO4 1.25, MgSO 4 2, NaHCO 3 26, Dekstroz 10, ve CaCl 2 2: (mM) içeren normal bir yapay beyin omurilik sıvısı (aCSF) tampon hazırlayın. Deneyin başlangıcında yıkama sistemi yanı sıra, ayrıldıktan sonra, doku kurtarma için, bu normal aCSF kullanın.
  2. Hipokampus diseksiyon sırasında ve içerir sükroz aCSF hazırlayın (mM olarak): Sakaroz 220, KCI 2.95 NaH 2 PO4 1.3, MgSO 4 2, NaHCO3, 26 Dekstroz 10 ve CaCI2 2. Sağlam hipokampal doku terkibi epileptiform activity uyarılması amacıyla, normal aCSF 4-aminopiridin (4-AP) ekleyin100 uM konsantrasyonu.

Bozulmamış Hippocampus Preparasyon 2. Cerrahi Prosedür

  1. Bir kurutucu cam kavanoz (Belirli Malzeme ve Ekipman No.1) altındaki odasına izofluran (1 ml) Bırak ve hayvan ile temas almaz böylece alt aşamada yüzeyini kapsayacak şekilde düzenli bir kağıt havlu kullanın Sıvı. Ardından, kavanoza CD1 fare koyun ve kapağını kapatın. Yaklaşık 1 dakika ile 2 dakika süre ile, kapalı bir kavanoza hayvan tutun. Nefes sıklığı yaklaşık bir saniyede olduğunda, kavanoz fareyi çıkarın.
  2. Cerrahi sahnede fare koyun ve uygun bir makasla başını kesmek. Hemen konusu hayvanın başı kesildikten sonra, yaklaşık 30 saniye boyunca buz soğukluğunda (3-4 ° C) içine baş, oksijenli sükroz aCSF yerleştirin.
  3. Kafatasının üst deriyi kaldırmak ve tempo yakın iki ucunda yanı sıra baş orta hat boyunca kafatası kesmek için ince makas (Özel Malzeme ve Ekipmanları No.5) kullanınral lob. Kullanım forseps (Özel Malzeme ve Ekipmanları No. 6) beyin ortaya koymak için başın her iki tarafına doğru kesik kafatası soymak için.
  4. Dikkatle kafatasının altından beyin kabuğu ve daha sonra üzerine düşmesi beyin ve kafatası parietal lob arasındaki boşluğa bir mikro laboratuar spatula (Belirli Malzeme ve Ekipmanları No 8) takın hazırlanmış bir buz-soğuk (3 Belirli Malzeme ve Ekipmanları) ıslak filtre kağıdı (No.2 ile kaplı -4 ° C) cerrahi evre. Bir buz-soğuk bıçak ile beyincik çıkarın ve beynin orta hat keserek iki hemisfer ayırın. Daha sonra,% 95 O 05/02% CO2 ile kabarcıklandırılmış buz gibi soğuk sükroz aCSF ile dolu bir beher içine iki ayrılmış hemisferlerin yerleştirin.
  5. Buz gibi soğuk filtre kağıdı sahnede yarımkürede ve yerin yarısını alın. Ekstra çözüm emmek için beynin etrafında normal kağıt havlu veya filtre kağıdı yerleştirin. Malzeme iki yangın parlatılmış cam pipet araçları (No. 10 kullanın veEkipman) beynin orta kısmının geri kalanından ayırmak için korteksi.
  6. Hipokampus korteks içinden maruz kalan ve buz-soğuk sahneye koymak sonra, doku üzerinde buz soğuk sakaroz aCSF iki veya üç damla koyun ve ardından hipokampus etrafında ekstra çözüm kaldırmak. Hipokampus iki ucunda korteks ile bağlantıları kesin. Ardından, yangın cilalı cam araçları ile beynin dışarı hipokampus incelemek ve beynin geri kalan kısmını kaldırın.
  7. Onun alveus tarafı yukarı bakacak ve hipokampal sulkus aşağı bakacak şekilde tüm hipokampus ayırın. Hızla yeniden doku üzerinde buz soğuk sakaroz aCSF iki veya üç damla damla ve kağıt havlu parçası kullanarak doku etrafında ekstra çözüm kaldırmak. Sulkus (Şekil 1B, C) ​​maruz tüm hipokampus üzerinde açmak için bir ateş cilalı cam aracını kullanın.
  8. Normal optik mikroskop altında, Özgül Materi bir ölçüye cam iğne (No. 11 yerleştirinals ve sulcus bir ucunu Ekipmanları) ve sulcus yönünde (Şekil 1C) boyunca, dentat subikulum için gyrus (DG) veya CA1 alanından lif bağlantıları kesmek. Gerekirse hipokampus septal ve zamansal biter süs için bir buz-soğuk bıçak uygulayın. Kesme sulkus içine (Özel Malzeme ve Ekipmanları No. 12), bir özel yapılmış metal tel döngü yerleştirin ve bir yangın parlatılmış cam aracı tarafından hipokampus subikulum / CA1 ucunu tutarak dokudan uzak DG üzerinden çekin (Şekil 1D) .
  9. Yukarıda açılma prosedüre göre, doku üzerine buz gibi soğuk sükroz aCSF bir, iki veya üç damla ve doku çevresinde ilave uzaklaştırın. Daha sonra, kenarları (Şekil 1E) buz gibi soğuk bıçak ile katlanmamış hipokampus Döşeme ve ilgili (oda sıcaklığında, normal aCSF ile doldurulmuş ve% 95 O 05/02% CO2 ile kabarcıklandırılmış geri kazanılması haznesine bir spatula ile hazırlanmasını yer 25 ° C). Ayrılmakkatlanmamış hipokampus doku kayıt odasına yerleştirmeden önce yaklaşık 1 saat kurtarmak için.
  10. Diğer beyin yarımkürede alın ve 2,5-2,9 adım adım gitmek için kullanabilirsiniz. Genellikle, bir tek hipokampus açılmak ve oksijenli ve sulu doku tutmak için sürekli buz gibi soğuk sakaroz aCSF damla tüm prosedürü tamamlamak için yaklaşık 1 ila 2 dakika sürebilir.

3. Deneysel Sistem Kurulumu

  1. Bir pim ızgara dizisi (PGA) paket üzerinde özel bir imal PMEA'nm Tutkal ve ambalajın (Şekil 3B), bir pimin pedi tek bir mikroelektrot her ped bağlamak için mikro tel bağlanmasını kullanır. Ardından, ısmarlama bir devre kartı 13 sokete paketi takın.
  2. Bireysel özel yapılmış devre kartı 13 100 kazanç 4 KHz ve amplifikatörler 1 Hz band geçiren kesme frekansı ile filtreleri her mikroelektrot bağlayın. A / D sohbetler devre kartından analog çıkış Sayısallaştırsistemi Erting ve bir bilgisayardaki verileri kazanmak ve depolamak.
  3. Çözelti akış (Şekil 4A) için giriş ve çıkış boru ile dizi etrafında bir ısmarlama plastik kayıt odasına Tutkal. Sistemdeki farklı çözümler tutmak ve birleştirme ve üç valf ile şişelerin çıkış boru kontrol etmek için en az iki şişe kullanın. Kayıt odasına çözüm rehberlik IV damla odası ile bir boru sistemine tri-vana çıkışını bağlayın.
  4. Tri-valf ve kayıt odasının giriş arasında, çözelti, kayıt odasına yönlendirilir önce kontrollü bir sıcaklıkta (35 ° C) çözelti ısıtmak için bir ısıtıcı ekleyin. Bir vakum tüpü bağlı balona çözüm toplamak için bir vakum tüp kayıt odasının çıkış takın. Bu çalışmada herhangi bir deneyde herhangi bir solüsyon geri verme.

4. PMEA'nın üzerine Kırımsız Hippocampus Yerleştirme Sinir Aktivite kaydedin için

  1. Deney düzeneği hazırlamak için, bir normal aCSF ile şişe ve 4-AP aCSF ile bir şişe doldurun. Her iki şişelerde, kabarcık% 95 O, her denemenin başından itibaren 05/02% CO 2. Bir deney sırasında seçilen hangi çözüm denetlemek için bir üç-valf konnektörünü kullanın. Bir kabın içine toz çözüm pompalamak için odasının çıkışında bir vakum tüpü bağlayın. Kayıt odasına teslim etmeden önce boru hattı ısıtın ve kontrollü bir sıcaklık seviyesinde (35 ° C) çözüm tutmak.
  2. Odasına kayıt giriş ve çıkış kapalı olduğunda, kayıt odasına katlanmamış hipokampus aktarmak ve yerleştirmek için özel yapılmış cam pipet damlalık kullanabilirsiniz. Mikroskop altında, doku çözeltide yüzen ise düzenli bir küçük boya fırçası kullanarak gelişeceğini hipokampus yerleştirin. Onun alveus tarafı uzak işaret, CA3 alanı aşağı bakacak ve CA1 alan araştırmacı bakacak ile gelişeceğini hipokampus yerleştirin.
  3. Dikkatle odası kurutulur ve doku dizi üzerine indirilir kadar çözüm seviyesini düşürmek için kayıt odasının kenarından bir vakum pipet kullanarak odasında çözüm uzak emmek. Sonra, dikkatle dizi üzerine gelişeceğini hipokampus tutmak için doku üstünde bir ölçüye doku çapa (Şekil 4) (Belirli Malzeme ve Ekipmanları No. 14) yerleştirin. IV damla odasında saniyede iki damla akış hızını ayarlamak için giriş ve çıkış yeniden doldurmak ve yavaş yavaş açık kayıt odasına solüsyonu ve bir kaç damla koyun.
  4. Kurtarmak için yaklaşık 1 dakika boyunca normal bir ACSF kayıt bölümü içinde doku inkübe, daha sonra 4-AP çözündürüldü aCSF çözüm kaynağı anahtarı ve düzgün bir akış hızını ayarlayın. Yaklaşık 5 ila 10 dakika süreyle aCSF çözülmüş 4-AP doku inkübe ve ardından araştırmacı spontan aktivite göründüğünde sinyali kaydetmek için yazılımını başlatmak olabilir.

5. ÇıkarmaBir Deney sonra PMEA'nın gelen doku

  1. Bir micromanipulator doku çapa Kontrol ve yavaş yavaş kayıt odasından doku kaldırın. Kayıt odasında akışını durdurmak için hem giriş hem çıkış kapatın. Kayıt odası solüsyonu ile dolu veya kayıt odası dolu değilse odasını doldurmak için çözümün bir kaç damla eklemek gerekir.
  2. Doku her köşesine kaldırmak için küçük bir boya fırçası kullanın. Doku solüsyonda yüzen değilse, o zaman doku hala dizi oturan ile dikkatli bir şekilde bölme kuru vakum borusunu kullanır. Sonra dikkatlice yavaş yavaş odasına dolum ve kayıt odası dolduğunda akışını durdurmak için giriş kapatmaya giriş açın. Yine doku her köşesini kaldırın küçük boya fırçası uygulayın.
  3. Dokuya kadar adımı yineleyin 5.2 diziden ayrılmış ve çözelti içinde yüzer. Doku çözeltisi içinde yüzen, o uzak doku emmek için vakum tüpü kullanın. Açık tO girişinde akış ve çıkışına vakum açın. Damıtılmış suyla yıkayın sistemi ve kurur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Burada, şekillerde gösterilen veriler 4-AP (100 uM) oda sıcaklığında kayıt bölümü içinde, dokunun inkübasyonu boyunca ilave aCSF (25 ° C) katlanmamış hipokampus hazırlanmasında kaydedildi. Normalde etkinlik 5 dakika içinde başlar, ancak daha yaşlı hayvanlarda bazı hipokampal dokularda daha uzun sürebilir. Daha önce 14,15 bildirilen PMEA ile gözlemlenen 4-AP ile uyarılan nöronal ateşleme aynıdır. Elektrotlar 200 um'lik bir yüksekliğe sahip olduğundan, elektrot uçları hemen üzerinden hücre tabakası ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

hipokampus uzunlamasına ve enine eksen delici mikroelektrot dizisi ile birlikte korunur gelişeceğini hipokampus hazırlama, geliştirme, hipokampus 7 anatomi bağlantıları veya nöral yayılmasını araştırmak için güçlü bir araç sağlar. Bu açılımı prosedür de yetişkin farelerde hipokampus incelemek için geçerlidir. Bu hazırlık Son çalışmalar 4-AP-kaynaklı epileptiform aktivite gelişeceğini hipokampus tüm alanı boyunca bir diyagonal dalga önünde (Şekil 6) 7,8 ile yaymak göstermiştir. Bu ç...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri (Ulusal Nörolojik Bozukluklar ve İnme Enstitüsü) Hibe 1R01NS060757-01 ve E.L. Lindseth'in Dominique M. Durand'a bağışladığı kürsü tarafından desteklenmiştir. Dr. Andrew M. Rollins'in laboratuvarına OCT görüntüleme konusundaki yardımları için teşekkür ederiz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
kurutucu kavanozLABRECYCLERS Inc.5410Hayvan anestezisi kullanımı için kavanozun dibine normal kağıt havlular yerleştirin.
Hipokampusun açılması için bir bıçak ve Özel yapım cerrahi aşamaN/AN/ABir petri kabı, üzerine ıslak bir filtre kağıdı yerleştirilerek buzun içine baş aşağı (ortaya) yerleştirilir.
Özel yapım doku geri kazanım odasıN/AN/APlastik tüpler altta plastik ağ ile yapıştırıldı ve aCSF'de %95 O2 / %5 CO2 ile köpürtüldü.
Düz Çalışma  MakasFisher BilimselS17336B                                                                                      Medco Aletleri No.:81995 Bu makas şu amaçlarla kullanılır    farelerin kafasını kes.
Integra Miltex Goldman-Fox  MakasFisher Scientific12-460-517                                              MILTEX INC                                                    No.:5-SC-320Bu makas farelerin kafatasını kesmek için kullanılır.
Miltex
Histerektomi Forseps
Claflin Tıbbi ekipmanCESS-722033-00001Bu Forseps, beyni ortaya çıkarmak için kesilen kafatasını soymak için kullanılır
Mikro SpatulaKardinal SağlıkBu mikro spatula, bir yarım kürenin tüm beynini yeniden çekirdek odasına aktarmak için kullanılır. 
Frey Scientific Paslanmaz Çelik Yarı Mikro SpatulaKardinalBu yarı mikro spatula, katlanmamış hipokampusu kurtarma odasındaki glikoz aCSF'ye aktarmak için kullanılır.
küçük boyafırçası Lowe'stem #:  105657                                  Model #:  90219Normal bir boya fırçası paketindeki en küçük boyuta sahip olan
Ateşle cilalanmış cam yardım aletiN/AN/ABu alet ateşle parlatılmıştır ve normal Pasteur cam pipetlerinden yapılmıştır.
Özel yapım cam iğneN/AN/ABu alet ateşle parlatıldı ve normal Pasteur cam pipetlerinden yapıldı.
Metal tel halkalı özel yapım cam aletN/AN/ABu alet ateşle parlatıldı ve yeniden şekillendirilmiş metal tel halkalı normal Pasteur cam pipetlerinden yapıldı.
Özel yapım cam solüsyon damlalığıN/AN/ABu alet, uçları kesilmiş ve kesilen uca bağlı bir lastik kafa ile normal Pasteur cam pipetlerinden yapılmıştır.
Özel yapım doku ankrajıN/AN/ANaylon elyaf ağ, yalıtılmış bir bakır tel halka üzerine yapıştırıldı. Doku ankrajı bir mikromanipülatör tarafından tutuldu.
Özel fabrikasyon mikroelektrot dizisiN/AN/ADizi hakkında daha fazla ayrıntı lütfen bakınız  Kibler ve ark., 2011. 
N/AN/Adizisi için özel yapım filtre ve amplifikatör devreleriDizi hakkında daha fazla detay için lütfen bakınız  Kibler ve ark., 2011. 
Veri toplama işlemcisi 3400aMicrostar LaboratoriesN/ABu, A/D dönüştürücülü eksiksiz bir veri toplama sistemidir.
Sağlık

Kaynaklar

  1. Richardson, K. A., Schiff, S. J., Gluckman, B. J. Control of traveling waves in the Mammalian cortex. Phys Rev Lett. 94 (2), 028103-028112 (2005).
  2. Luhmann, H. J., Dzhala, V. I., Ben-Ari, Y. Generation and propagation of 4-AP-induced epileptiform activity in neonatal intact limbic structures in vitro. Eur J Neurosci. 12 (8), 2757-2768 (2000).
  3. Grinvald, A., Manker, A., Segal, M. Visualization of the spread of electrical activity in rat hippocampal slices by voltage-sensitive optical probes. J Physiol. 333, 269-291 (1982).
  4. Gloveli, T., et al. Orthogonal arrangement of rhythm-generating microcircuits in the hippocampus. Proc Natl Acad Sci USA. 102 (37), 13295-13300 (2005).
  5. Amaral, D. G., Witter, M. P. The three-dimensional organization of the hippocampal formation: a review of anatomical data. Neuroscience. 31 (3), 571-591 (1989).
  6. Albani, S. H., McHail, D. G., Dumas, T. C. Developmental studies of the hippocampus and hippocampal-dependent behaviors: insights from interdisciplinary studies and tips for new investigators. Neurosci Biobehav Rev. 43, 183-190 (2014).
  7. Zhang, M., et al. Propagation of Epileptiform Activity Can Be Independent of Synaptic Transmission, Gap Junctions, or Diffusion and Is Consistent with Electrical Field Transmission. J Neurosci. 34 (4), 1409-1419 (2014).
  8. Kibler, A. B., Durand, D. M. Orthogonal wave propagation of epileptiform activity in the planar mouse hippocampus in vitro. Epilepsia. 52 (9), 1590-1600 (2011).
  9. Wang, D., McMahon, S., Zhang, Z., Jackson, M. B. Hybrid voltage sensor imaging of electrical activity from neurons in hippocampal slices from transgenic mice. J Neurophysiol. 108 (11), 3147-3160 (2012).
  10. Wingenfeld, K., Wolf, O. T. Stress , memory, the hippocampus. Front Neurol Neurosci. 34, 109-121 (2014).
  11. Liu, J. S., et al. Spatiotemporal dynamics of high-K+-induced epileptiform discharges in hippocampal slice and the effects of valproate. Neurosci Bull. 29 (1), 28-36 (2013).
  12. Oka, H., Shimono, K., Ogawa, R., Sugihara, H., Taketani, M. A new planar multielectrode array for extracellular recording: application to hippocampal acute slice. J Neurosci Methods. 93, 61-68 (1999).
  13. Kibler, A. B., Jamieson, B. G., Durand, D. M. A high aspect ratio microelectrode array for mapping neural activity in vitro. J Neurosci Methods. 204 (2), 296-305 (2012).
  14. Schechter, L. E. The potassium channel blockers 4-aminopyridine and tetraethylammonium increase the spontaneous basal release of [3H]5-hydroxytryptamine in rat hippocampal slices. J Pharmacol Exp Ther. 282 (1), 262-270 (1997).
  15. Perreault, P., Avoli, M. 4-aminopyridine-induced epileptiform activity and a GABA-mediated long-lasting depolarization in the rat hippocampus. J Neurosci. 12 (1), 104-115 (1992).
  16. Chesnut, T. J., Swann, J. W. Epileptiform activity induced by 4-aminopyridine in immature hippocampus. Epilepsy Res. 2 (3), 187-195 (1988).
  17. Nam, Y., Wheeler, B. C. In Vitro Microelectrode Array Technology and Neural Recordings. Crit Rev Biomed Eng. 39 (1), 45-62 (2011).
  18. Gonzalez-Sulser, A., et al. Hippocampal neuron firing and local field potentials in the in vitro 4-aminopyridine epilepsy model. J Neurophysiol. 108 (9), 2568-2580 (2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

A lm Hipokamp sHipokampal Dilim Haz rlamaMikroelektrot KaydSinyal G r lt OranBireysel Normalizasyon Y ntemiD rt AP Stim lasyonuTransvers Boylamsal Yay l mHipokamp s A ma Tekni i