yeni modelde ortak morbid Alzheimer hastalığı (AH) ve inme durumunu araştırmak, üç davranış görevleri motor kontrolü ve bilişsel davranışları hem değerlendirmelerini tarif edilmiştir. Bu görevler ışın yürüme görevi, silindir görev ve Morris su labirenti içerir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İnme ile Alzheimer Hastalığının bir Transgenik Fare Modelinde Motor ve Hipokampal Bağımlı Mekansal Öğrenme ve Referans Hafıza Değerlendirme
Bu makalede
Özet
Özet
(AD), Alzheimer hastalığı nörodejenerasyon ve hafıza kaybına neden olan bir zayıflatıcı nörodejeneratif bir hastalıktır. yaş AD için önemli bir risk faktörüdür iken, felç de bir risk faktörü ve arttırıcı bir faktör olarak görülmüştür. kötüleşmiş inme ile ilişkili motor kontrolü ve AD-ilişkili bilişsel açıkları inme ve AD sonuçlarının komorbidite tek başına her koşula göre. amiloid ön-madde proteini, DNA içine dahil (AD geliştirilmesinde rol önemli bir protein) mutasyona uğramış bir formu ile, inme ve AD, AD için yeni bir transjenik fare modeli, birleşik hastalık modeli için, küçük, tek taraflı striatal inme verilir.
inme ve AD hem kombinasyonu ile bir model için, inme ile ilgili motor kontrolü, hareketlilik ve AD-ilişkili bilişsel fonksiyonu değerlendirmek davranış testleri uygulanmalıdır. Silindir görev kendiliğinden ön ayakları, motor kullanımını değerlendiren bir maliyet-etkin, çok amaçlı aparat içerir. Bu görev, bir sıçan, bir silindirik aparatlar nerede sıçan olacak kendiliğinden arka yerleştirilir ve ön ayakları ile silindirin duvara temas edilir. Bu kişiler ön ayakları, motor kullanımı olarak kabul edilir ve test sonrası, video analizi sırasında ölçülür. uygulanan başka maliyetli motorlu görev ön ayakları kontrolü, hindlimb kontrol ve lokomosyon değerlendiren ışın yürüme görevdir. Bu görev ön ayakları makbuzları, hindlimb fişleri ve düşer analizi yoluyla ekstremite motor kontrolünün değerlendirilmesi için izin veren bir ahşap kiriş boyunca bir sıçan yürüyüş içerir. öğrenme ve hafızanın değerlendirilmesi bu davranışsal paradigma için Morris su labirenti ile tamamlandı. protokol sıçan sabit gizli bir platform bulur sayede uzamsal öğrenme ile başlar. uzamsal öğrendikten sonra, platform çıkarılır ve kısa vadeli ve uzun vadeli uzamsal referans bellek hem de değerlendirilir. Bu görevlerin tamamı üç Bu paragraf yaparak, davranışsal farklılıklara duyarlı ve bu model için 28 gün içinde tamamlanır vardırdigm zaman verimli ve maliyet-etkin.
Giriş
Alzheimer hastalığı (AD) yaşlı popülasyonda demans ve zayıflatıcı nörodejeneratif hastalığın en yaygın şeklidir. Histopatolojik AD amiloid plaklar, nörofibriler yumaklar ve nöronal kaybı olarak kendini göstermektedir. Amiloid plaklar β-sekretaz ve γ-sekretaz enzim 1,2,3 amiloid öncü proteinin (APP) bir değiştirilmiş proteolitik bölünme yoluyla üretilmiş olan P-amiloid peptidinin (Aβ) öncelikle oluşur. bölünme ürünü, Aβ, beyindeki mevduat patolojik amiloid plaklar oluşturma ve karakteristik öğrenme bozuklukları ve hafıza kaybına yol açabilir beyinde toksik etkileri vardır. Birlikte, bu adımların hepsi "amiloid hipotezi" 3,4 olarak adlandırılır. AD araştırılırken bu hipotez önemli olmakla birlikte, diğer hücresel değişiklikler orijinal amiloid yolundan sapar, bu plak oluşumları önce bulunmuştur. Bu diğerhücresel değişiklikler bozuklukları ve önceki plak oluşumu 3,5,6 için AD yer alan diğer bilişsel bozuklukları, öğrenme erken hafıza kaybına katkıda bulunduğu düşünülmektedir.
AD giderek yaygın hale ile, AD gelişimi için risk faktörleri araştırma son derece önemli bir odak haline geliyor. Yaş AD sporadik formları için başlıca risk faktörüdür olmasına rağmen, diğer risk faktörleri inme 7,8 olmak üzere, tespit edilmiştir. İnme sadece bir risk faktörü değil, ama aynı zamanda zaten mevcut demansın derinleşebilir. Örneğin, klinik, AD'nin ilerlemesi daha önce Stroke 9 deneyimli hastalarda kötü olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, artan APP ekspresyonu ve Aβ toplanmasına neden inme 10,11 ile birlikte Aβ toksisite deneysel hayvan modellerinde saptanmıştır. inme ve AD arasındaki bu önemli etkileşim olmadığından, iki patolojiler daha araştırılmış esastırBirlikte marazi modellerde daha iyi her iki durumda da karıştığı patofizyolojisi ve davranışlarını anlamak için.
ko-morbid koşullar incelemek için uygun bir model olduğu bir kontur AD benzeri patolojinin üretilmesi için Aβ etkileşebilen geliştirilmesi gerekmiştir. ilk defa olarak, DNA içine dahil, bir mutasyona uğramış insan APP geni olan bir APP21 transgenik sıçan AH uygun bir model elde etmek için kullanıldı. Mutasyonlar hem AD 4,8,12 ailesel formları suçlanmıştır İsveçli çift yanlış anlamlı ve Indiana tek yanlış anlamlı mutasyon vardır. Ek hakaret yokluğunda, karakteristik Aβ plaklar gelişen veya nörofibriler olmadan bu sıçan modeli yaşları 12 yumaklar. Bu nedenle, AD-benzeri davranış patolojiyi ikna etmek için bir çaba, bir küçük inme demans hastalarında 9 sıklıkla küçük subkortikal vuruş taklit etmek doğru striatum sokulur. APP21 transgenik ra inmet ko-morbid durum temsil her iki hastalık durumlarında rol oynadığı davranış değişiklikleri çeşitli araştırma sağlar. Özellikle, yetişkin sıçan AD-benzeri patoloji ve bilişsel bozuklukların bu indüksiyon bize AD önceki ilk moleküler ve bilişsel değişiklikleri araştırmak sağlar.
gol ko-morbid modeli okuyan zaman inme ve AD hem de çok farklı davranış patolojileri beri davranış değişiklikleri ilk işaretleri belirlemek ve olduğundan, davranış görevleri davranışsal fenotipleri çeşitli değerlendirmek gerekir. paradigmalar ve ekipman çeşitli içeren kemirgen modellerinde motor ve bilişsel davranışlarını analiz etmek yapılabilir nispeten hassas testler pil vardır. Özellikle ön ayakları ve hindlimb motor fonksiyonlarını analiz etmek, silindir görev ve kiriş-yürüyüş görev motor açıkları tespit ve bu modelde lokomosyon izlemek için uygulanmaktadır. Özellikle fo ince değerlendirmek için tasarlanmış diğer hassas görevlerrelimb motor beceri (yani merdiven görev ve tek pelet ulaşan görev) gıda yoksunluğu 11,13,14 gerektirir. Hastalık patolojileri 15,16,17 gıda yoksunluğu bilinen etkilerden herhangi önlemek için, bu testler bu çalışma için uygun olmadığını düşündüğü edilmiştir. Silindir görev yeni bir ortamda yetiştirilmesi sırasında sıçan ön ayakları kendiliğinden kullanımını değerlendirir ve tek taraflı inme 10,18 ile sıçanlarda ön ayakları arasındaki asimetriyi algılayabilir. Bu görev için önemli bir yararı cihazı gibi Porsolt zorla yüzmeye görev 19 gibi diğer davranış görevleri için kullanılabilir olmasıdır. Silindir görev aksine, kiriş-yürüyüş görevi de 10,14 locmotion ilave olarak, arka pençe ve ön ayakları motor kontrol analizine izin verir. Işın yürüyen bir lokomotor bileşeni, bir denge bileşeni ve yetenekli ayak yerleştirme içerir. Bu testlerin her ikisi de düşük maliyetli, basit ve zaman-verimli ve d inme ve AD etkilerini aydınlatmak uzuv işleyişinde ifferences.
Kenara motor fonksiyon değişiklikleri, AD hastalığın ilerlemesi erken dönemlerinde ortaya çıkabilir bellek kusuru içerir. Bir kemirgen modelinde AD-benzeri patolojiler ele alırken, hipokampus önemli bir beyin yapısı büyük ölçüde MS 2 etkilenir çünkü hipokampal bağımlı öğrenme ve hafıza değerlendirilir çok önemlidir. hipokampus kemirgenlerde çeşitli labirent paradigmalar kullanılarak test edilebilir uzamsal öğrenme ve hafıza ve işlevi için gerekli bir beyin bölgesidir. Farklı hastalıkların kemirgen modellerinde çoğunlukla yaygın olarak kullanılan labirent görevlerinden biri Morris su labirenti 20'dir. Morris su labirenti sabit bir gizli platformu yerini sıçan yardımcı olmak için mekansal ipuçlarını kullanır ve platform çıkarıldığında mekansal referans bellek test eder. Su labirenti kurulum değerli bir avantajı önerilen araştırma sorusu 20 bağlı çok iyi adapte olmasıdır.
İlk kez çadır ">, açıklanan teknikler inme ve AD yeni bir ko-morbid sıçan modelinde motor ve bilişsel fonksiyonu değerlendirmek için kullanılmıştır. Bir APP21 transgenik fare modelinde küçük darbeleri içeren. Co-morbidite uyararak elde edildi striatumda kan damarlarının vazokonstriksiyon APP21 transjenik farelerde küçük vuruş üretilir. Bu vuruş model, MS 11 için alternatif bir fare modelinde bir ko-morbid durum olarak tespit edilmiştir. Advancement APP21 transjenik fare modeli amaçlanmıştır Bu romanımıza davranış görevler eşlik inme ve AD fare modeli kullanılarak tarif edilmesine rağmen, daha translasyon değerli bir modeli üretmek için., bu görevleri ayrıca başka felç modelleri ya da diğer nörolojik hastalıkların modelleri (örn Parkinson hastalığı). Genel uygulanabilir açıklanan metodoloji bu hastalık durumlarıyla yaygın olarak uygulanabilir olacaktır, ancak davranış zaman çizelgeleri ve paradigmalar önerilen res dayalı değişiklik gerekebilirAraması soru ve model. Ayrıca, maliyet ve zaman açısından verimli olurken adapte olmasının yanı sıra, tarif edilen görevler, minör açıkları gösteren etkilidir.Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
uygun kurumsal hayvan etik kurul öncesinde deney başlamadan davranış tüm prosedürleri onaylaması gerekir. Burada açıklanan tüm hayvan çalışmaları Batı Üniversitesi Hayvan Kullanımı Alt Komitesi tarafından onaylanan ve Hayvan Bakımı yönergelere Kanada Konseyi izler. Bu hayvan deneyleri ışık fazında gerçekleştirildi.
Brüt ön ayakları Motor Değerlendirme 1. Silindir Görev
- Ekipman Ayar
- deney için kullanılan sıçan boyutuna uygun bir perfore kapaklı bir pleksiglas silindiri elde edin. Silindirin boyutu yetiştirme sırasında sıçan üst ulaşmak için izin vermemelidir ve duvar ve sıçan burun ve sıçan kuyruk tabanı arasında 2 cm izin vermelidir. Bir silindirin standart boyutlu çapı 23 cm ve 6 aylık (400-600 g), bir sıçan için yüksekliği 40 cm dir.
- silindir Ple oturan silindir aparatı altında 45 derecelik bir açıyla bir ayna yerleştirinxiglas durmak veya yaklaşık 30 cm masa üstünden destek bazı diğer form.
- Video kamerayı ayna silindirin tüm çapını görselleştirmek için uygun bir mesafede bir tripod üzerinde video kamera ayarlayın.
- Bir sönük ayara aydınlatma çevirin ve ani yüksek sesler etkisini azaltmak için oda (yani düşük hacimli, ince müzik) beyaz gürültü oynarlar. Bu hareketi teşvik etmek ve bağlı yüksek seslere donmaması yardımcı olmalıdır.
- Deneysel prosedür
- İlk deneme başlangıç müzik çalma ve kısık aydınlatma ile odaya sıçan iklime alıştırmak için önce deneysel oda 30 dakika içine sıçan taşıyın.
- Küçük bir beyaz tahta üzerinde (zaman çizelgesi ve deneme sayısı, yani hayvan numarası, gün) İlgili hayvan ve deneme bilgi yazmak. aynanın önünde bu tahta yerleştirin.
- Aynanın önünde beyaz tahta ile video kamera basın kayıt, baz o yakın sıçan pick upkuyruk f, silindir sıçan yerleştirin ve kapağı sabitleyin. video kayıt girişimi önlemek için silindirin yan kapalı durun.
- Aynanın önünde beyaz kartını çıkarın ve video kamera rekor 5 dakika silindir sıçan (beyaz tahta çıkarıldığı zaman 5 dk kaydetmek için bir zamanlayıcı kullanın) izin verin. Bu bir çalışmadır.
- Bir deneme süresinden sonra kağıt havlu ve su ile silindir temizleyin.
- Tekrarlayın üç çalışmanın toplam elde etmek için 1.2.2-1.2.5 iki kez daha yineleyin. silindire alışkanlık olasılığını azaltmak için bir 20-30 dk arası deneme süresi olmalıdır. Bu süre zarfında, diğer sıçanlar için silindir denemeler.
- Video Analiz
- Video düzenleme programı içine İthalat video kamera dosyaları (yani iMovie)
- Her deneme için klipler halinde video derleyin. Videonun Sesi kapatmak ve orijinal% 25 video hızını azaltmak.
- ön ayakları kişilerin sayısını saymakSol ve sağ ön ayakları için silindirin duvar. eşzamanlı sol ve sağ kişiler için, "hem" olarak bu ön ayakları kişileri saymak. Video video sol ön ayakları gerçekte hayvanın sağ ön ayakları karşılık gibi görünen bir ayna aracılığıyla kaydedilir unutmayın.
- Aşağıdaki denklem kullanılarak (inme taraf) etkilenen ön ayakları yüzde kullanımını hesaplayın: [{/ toplam sayısı kişileri (kişileri + ½ ikili temaslar etkilenen)} x 100]. vahşi tip grupları ve inme olmaksızın transgenik grubunun hem performans hastalık kaynaklı sorunların sunumu değerlendirmek için karşılaştırma grupları olarak kabul edilir.
2. Kiriş-yürüyüş Görev Kaba Motor Değerlendirme
- Ekipman Ayar
- 2 cm genişliğinde ve yaklaşık 120 cm uzunluğunda (bir 200-600 gr sıçan için en uygun genişlik) bir yumuşak mühürlü ahşap kiriş kazanır.
- iki tablo veya raf un koyundışında onun 100 cm. her birim yüzeyleri yerden yaklaşık 40 cm olmalıdır.
- masaya veya bant kullanarak yüzeyin rafları kirişin iki ucunu sabitleyin. Yaklaşık 1 m desteklenmeyen ışın uzunluğu şimdi yerden 40 cm yüksek olmalıdır.
- kirişin tüm uzunluğu yakalayan bir stand bir video kamera ayarlayın. video kontrastı arttırmak için beyaz fareler kullanırken kiriş arkasında siyah bir arka plan tanıtan düşünün.
- Deneysel prosedür
- İlk deneme başlangıç müzik çalma ve kısık aydınlatma ile odaya sıçan iklime alıştırmak için önce deneysel oda 30 dakika içine sıçan taşıyın.
- kirişin bir ucunda sıçan ev kafes veya çevresel zenginleştirme tüpleri yerleştirin ve kirişin diğer ucunda sıçan yerleştirin.
- Deneysel çalışmalarda iki gün önce bir kaç olmayan kaydedilmiş çalışır yürütün. Sıçan bölgeyi keşfetmek edelim ve sıçan tabanını tutarak kiriş doğru sıçan kılavuz'Kuyruğu.
- Sıçan ışınını geçti sonra, kiriş ve tekrar diğer ucuna kafesi veya tüp taşıyın. Sıçan her iki yönde serbestçe ışın geçtiğinde, eğitim oturumu sona erdi. eğitim sayısı tüm hayvanlar arasında tutarlı çalışır tutun.
- Küçük bir beyaz tahta üzerinde (zaman çizelgesi ve deneme sayısı, yani hayvan numarası, gün) İlgili hayvan ve deneme bilgi yazmak. kiriş arkasındaki duvara bu beyaz tahta bantlayın.
- kirişin bir ucunda sıçan ev kafes veya çevre zenginleştirme boru yerleştirin.
- Basın video kamera üzerinde kayıt ve ev kafes veya boru kiriş karşısında sonunda kuyruk ve yer tabanı tarafından rat pick up.
- Sıçan başarıyla yükseltilmiş kirişin tam uzunlukta geçme tamamladığında biter deneme, bütünlüğünü kaydedin. Sıçan duraklar kuyruk tabanı yavaşça sıçan ense, kiriş boyunca yarıda ya da hafifçe fare kuyruğu dokunursanızkiriş boyunca hareket teşvik etmek. herhangi bir şekilde ileriye doğru sıçan itmeyin.
- Yeniden yapmak kiriş üzerinde, arka arkaya yürüyen durur ya da tutarsız yürür iken sıçan yana döner denemeler. Bir sıçan düşer ve yavaşça, kiriş asmak sıçan kepçe ve düşme pozisyonunda kiriş üzerinde geri koyun ve denemeye devam edin devam ederse.
- Kirişin diğer ucuna ev kafes veya boru taşı beyaz tahta üzerinde deneme # değiştirmek ve sonraki deneme kaydedin.
- 6 çalışmaların toplam tamamlanana kadar 3 deneme her yön için kaydedilmektedir ile, bu işlemi tekrarlayın. Bir sıçan için 6 denemeler sonraki sıçan için denemeler başlamadan önce kaydedilebilir.
- Video Analiz
- Video düzenleme programı (yani iMovie) aktarın video kamera dosyaları.
- Her deneme için klipler halinde video derlemek ve videonun sesini kapatmak. çerçeve ile her video klip karesini analiz edin.
- sayısını sayıntoplam adımların sıçan demetinin tam uzunlukta ve sol ve sağ hindlimb ve ön ayakları bordroları ve düşme sayısı toplam sayısını yürümek sürer. Her iki vahşi tip grupların performans ve inme olmaksızın transgenik grup ko-morbid duruma özgü açıkların ortaya çıkmasını değerlendirmek için ko-morbid grubuna göre kabul edilir.
Hipokampal bağımlı Mekansal Öğrenme ve Referans Bellek 3. Morris Water Maze
- Ekipman Ayar
- dairesel havuz (148 cm çapında ve 58 cm derinliğinde) merkezinin üzerinde konumlandırılmıştır bir video kamera sabitleyin. izleme yazılımı programında havuz hatları ile düzgün dört belirlenen kadran hizalayın.
- yaklaşık 36 cm derinliğinde su ile dairesel havuz doldurun. Su birkaç gün önce deney protokolü başlamadan havuz doldurarak, oda sıcaklığına kadar ısıtılmalıdır.
- Siyah toksik olmayan akrilik boya un ekleyinbeyaz fareler kullanırken su til opak. koyu renkli sıçanlar için, örneğin, beyaz, hafif bir renk kullanın.
- Gerekirse oda bölücüler de dahil olmak üzere boş duvar yüzeyleri ile havuzu çevreleyen. Ne zaman havuzda, sıçan için araştırmacıları görmek mümkün olmamalıdır.
- Poster kurulu farklı renkten 4 büyük farklı şekilli mekansal ipuçlarını kesin ve belirlenmiş kuzey, doğu, güneydoğu ve güneybatı havuz yerleri başına duvarda bir şekil ekleyin. Bu ipuçları havuzun kenarında biraz daha yüksek olmalıdır.
- test sırasında beklenmeyen yüksek sesler tarafından avunma gelen sıçan önlemek için kuzeybatısında kadranda düşük ses seviyesinde bir radyoyu açın.
- hedef kadranda merkezinde dairesel bir platform (11.5 cm çapında, yüzey suyu seviyesinin altında 2-3 cm) yerleştirin.
- Ana oda ışıkları kapatın ve bölgeyi aydınlatmak için havuza oda bölücü karşı tarafta bir ayaklı lamba açmak.
- Bilgisayar Yapılandırması
- Morris su labirenti davranış görevleri için tasarlanmış ve önceki deneyler başlamadan protokol ayarlanmış bir izleme programı kullanın. Olası bir program örneğidir, Şekil 4'te verilmektedir.
- uzamsal öğrenme deney için 90 saniye, her 4 çalışmalarda 4 gün üst üste ayarlayın.
- İlk sonda deneyden sonra son uzaysal öğrenme deneme süresinden sonra 24 saat ve 1 hafta 30 saniye, her 2 ayrı prob deneyleri ayarlayın.
- Set ikinci sonda deney 24 saat sonra başlayarak 2 ardışık gün boyunca günde 4 duruşmalarda öğrenme denemeleri cued. Her deneme 60 sn toplam olmalıdır.
- herhangi bir hayvan için her deneme arasında bir 20 dakika arası deneme aralığını olduğunu böylece her aşaması için, test sırasını ayarlayın. Diğer hayvanlar sürece her hayvan bir 20 dakika arası deneme aralığını korur gibi, bu arası deneme aralığında çalıştırılabilir.
- Platform pozisyon deneyci tarafından tanımlanmış olması olduğundan emin olun ve tüm diğer bölgeler de olduğunubelirlenen platform konumuna göre para cezası.
- elle başlatmak ve her deneme sona erdirmek için programı ayarlayabilirsiniz.
- Mekansal Öğrenme Deney
- güneybatısında kadranda dairesel bir platform yerleştirin. Bu bilgisayar programı kadranda yuvarlak belirlenen "platformu" alanı ile aynı hizada olmalıdır.
- Havuz etrafında başlayın pozisyonları her bir sıçan için randomize edilmelidir. Her tedavi grubundaki tüm başlangıç pozisyonları temsil etmektedir. Hiçbir sıçan probu test sırasında yeni bir başlangıç pozisyonuna sağlamak için sunulan paradigmada herhangi mekansal öğrenme denemeleri için kuzeydoğusunda konumundan başlar.
- kuyruk dibinde sıçan tutun ve yavaşça belirlenen başlangıç konumundaki havuzun duvarı boyunca suya koyun ve hızlı bir şekilde sıçan göz önünden hareket.
- Diğer deneyci kısa sürede sıçan suda olduğu gibi izleme yazılımını başlatmak zorunda. Bir zamanlayıcı izleme programı 0'dan yukarı saymaya başlamalıdır.
- Sıçan platformu bulur, diğer deneyi bilgisayarda deneme durdurmak ve onu almadan önce en az 30 saniye boyunca platformda sıçan ayrılmak zorunda. Deneme bilgisayarda durdurulmadan önce sıçan platformu kapalı atlarsa, deneme devam ediyor.
- sıçan ayrılan deneme süresi platformu bulmazsa, elinizi (ya fare elinizi izleyin ya da kuyruk tabanı ile sıçan rehberlik yapma) kullanarak platforma sıçan kılavuz. 30 saniye boyunca platformda sıçan tutun.
- bir havlu ile örtülü veya sıçan taşınabilir yüzeye tırmanmaya let deneycinin kolu üzerine kendi kuyruk tabanı tarafından havuzdan sıçan çıkarın.
- sıçan başına 4 çalışmaların toplam adımları yineleyin 3.3.3-3.3.7. Her bir fare için 20 dakika arası bir çalışma aralığı olmalıdır.
- Sıçan nihai mekansal öğrenme duruşmasından sonra en az 10 dakika süreyle bir ısı lambası altında evlerine kafesine sıçan dönün.
- EXA Devamuzamsal öğrenme 4 gün boyunca günde 2 ct aynı uzamsal öğrenme protokolü.
- günde 2-4, artık platformda sıçan tutmayın. Sıçan göz önünden deneyi ile 30 saniye boyunca yardımı olmadan platformda oturmak için izin verin. Bu vesileyle 1. günde sonraki denemeler sırasında yapılabilir.
- sonda Deneyi
- havuzdan platformu çıkarın. (Güneybatısında kadranda daire) bilgisayarda tanımlı önceki platformu pozisyonunu kalır emin olun.
- kuzeydoğusunda konumundaki havuzun duvarı boyunca suda sıçan yerleştirin ve hızlı bir şekilde sıçan göz önünden hareket. Romanın Kullanımı kuzeydoğusunda pozisyon sıçan önceden eğitilmiş başlangıç pozisyonlarından bağımsız bir platform konumunu hatırlatır sağlar başlar.
- Diğer deneyci kısa sürede sıçan suda olduğu gibi izleme yazılımını başlatmak zorunda. Bir zamanlayıcı izleme yazılımı üzerinde 0'dan yukarı saymaya başlamalıdır.
- sıçan almakgüneybatısında onun kuyruk tabanı ile havuz kadranda ve havlu kaplı kolunda tutun veya sıçan taşınabilir yüzeye tırmanmaya sağlar.
- Her sıçan sonda duruşmasından sonra en az 10 dakika süreyle bir ısı lambası altında evlerine kafesine sıçan dönün.
- 1 hafta sonra bu deneyi (adımlar 3.4.1-3.4.5) tekrarlayın.
- Cued Öğrenme Deneyi
- platformda 8,5 cm boyunda bir stand 4 cm çapında beyaz küre işaret sabitlemek için bandı kullanın (işaret toplam yüksekliği 12,5 cm). küresel işaret üst su seviyesinden en az 8,5 cm olacaktır.
- havuzu çevreleyen duvarlardan mekansal ipuçları çıkarın.
- Platform konumlarını rastlantısallaştırmak ve her gruptaki her bir sıçan için pozisyonlar başlar. Tüm platformu ve başlangıç pozisyonları her tedavi grubu için temsil edilmelidir.
- belirlenmiş bir platform alanında bir platform yerleştirin ve izleme yazılımı tanımlar.
- t havuz duvarı boyunca suda sıçan yerleştirino sıçan göz önünden hareket hızla başlangıç pozisyonu ve tayin.
- Diğer deneyci kısa sürede sıçan suda olduğu gibi izleme yazılımını başlatmak zorunda. Bir zamanlayıcı izleme yazılımı üzerinde 0'dan yukarı saymaya başlamalıdır.
- Sıçan platformu ulaştığında, diğer deneyi bilgisayarda deneme durdurmak var. Sıçan platformu kapalı atlarsa, deneme devam ediyor. sıçan almadan önce, sıçan 15 saniye boyunca platformda oturup bekleyin.
- kendi kuyruk tabanı tarafından havuzdan sıçan almak ve bir havlu kaplı kolunda tutun veya sıçan taşınabilir yüzeye tırmanmaya sağlar.
- Bir sonraki sıçan platform pozisyonunu kontrol edin ve takip yazılımı tanımlanan ilgili alana platformu taşıyın.
- Aşağıdaki 3 denemeleri için adımları yineleyin 3.5.4-3.5.9. 15 dakika arası bir deneme aralık olmalıdır.
- Her bir sıçan Fina sonra en az 10 dakika süreyle bir ısı lambası altında kendi kafesine fareleri Dönüşl deneme öğrenme cued.
- cued öğrenme 2 gün için aynı protokolü devam edin.
- Veri analizi
Not: bölgelerde harcanan zaman, mesafe bölgeleri içine girdiler ve bölgeye ilk girişi zaman sayısı sık kullanılan bölgeler, ortalama hız, gitti.- Platform bölge ve mekansal günde ortalama hıza ulaşması için zaman ve mesafe Analiz ve ayrı ayrı öğrenme cued. prob deneyler için, 2 prob ham zaman veya prob 1'den yüzde değişim olarak hedef bölgeye ilk giriş gecikme analiz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
tarif edilen davranış görevleri Alzheimer hastalığı APP21 transjenik fare modelinde felç etkilerini göstermek için kullanılmıştır. inme ve APP21 transgen kombinasyonu etkilenen bacaklarda daha motorlu açığı yanı sıra artan bellek kusuru sonuçlanması bekleniyor.
Silindir görev brüt ön ayakları motor fonksiyonları değerlendirildi ve etkilenen ön ayakları kullanımı olarak temsil edilir. Ayrıca, kiriş-yürüyüş görev, özellikle hind...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
motor ve her durumun şiddetine bağlı olarak bilişsel işlev hem de etkileyebilir çok farklı davranış patolojilerde inme ve Alzheimer hastalığı sonuçlarının kombinasyonu. Yüzden, bu koşulların ayrı ayrı katkılarını belirlemek, hem de ko-morbid durumda bir araya getirilmiş ve potansiyel olarak karşılıklı etkiler bazı bilgiler vermek davranışsal çeşitli görevleri kullanımı için gereklidir. sunulan veriler, üç maliyet-etkin inmeli yeni bir ko-morbid APP21 transgenik fare modelinde motor fonksiyon ve hipokampus bağımlı mekans...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları olduğunu beyan ederim.
Teşekkürler
Bu çalışma, Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri'nin (CIHR) finansmanıyla mümkün olmuştur ve yazarlar CIHR'ye finansman destekleri için teşekkür eder.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Silindir | Western University | Pleksiglas Silindir Silindir Çapı: 23 cm Silindir Yüksekliği: 40 cm Platform Yüksekliği: 30 cm Ayna Uzunluğu: 35 cm Ayna Genişliği: 26,5 cm | Bu, Western University Machine Services tarafından laboratuvarımız için özel olarak yapılmıştır. Bu ürünü tasarlamak için lütfen kendi seçtiğiniz üreticiyle iletişime geçin. |
| El Video Kamera | JVC | GZ-E200 | |
| Video Kamera Tripod | Slik | F163 | |
| / FM Saatli Radyo | Sylvania | SCR1388 | |
| Beyaz Tahta | Walmart | Genişlik: 71.12 cm Yükseklik: 55.88 cm | Bunlar herhangi bir mağazadan satın alınabilir (yani Walmart, Üniversite kitapçıları) |
| Kuru Silme Marker | Expo | Expo Kuru Silme Orijinal Marker | Bunlar herhangi bir mağazadan satın alınabilir (yani Walmart, Üniversite kitapçıları) |
| Ahşap Kiriş | Rona | Kontrplak Genişlik: 2 cm Uzunluk: 100 cm | |
| VWR Genel Amaçlı Laboratuvar Bandı | VWR Uluslararası | 89097-920 | |
| iMovie '11 | Apple Inc. | Sürüm 9.0.9 (1795) | Bu, bu el yazmasında kullanılan sürümdür, ancak başka herhangi bir iMovie sürümü veya video düzenleme yazılımı kullanılabilir. |
| Morris Su Labirent Havuzu, Platform | Stoelting Co. | 60136/60035 | Bunlar videoda kullanılan ürünlerin aynısı değil, ancak temelde aynı. |
| Platform İşareti | - | Kullanılan platform ıstakası, küçük bir metal stand ve beyaz küresel köpük top kullanılarak oluşturulmuştur. Bunlar muhtemelen ev geliştirme malzemeleri (yani Walmart, Rona vb.) bulunan herhangi bir mağazadan satın alınabilir. | |
| Temel Dayanaklar 71" Zemin Lambası | Walmart | HW-F0377SLV | |
| ANY-Labirent Davranış İzleme Yazılımı | Stoelting Co. | 60000 | Herhangi bir labirent® bilgisayarı olan veya olmayan kamerayı ve aksesuarlarını içeren paketler vardır. |
| Kompakt Video Kamera | Logitech | V-U0023 | |
| Dizüstü Bilgisayar | Hewlett-Packard | HP Pavilion dv6 Dizüstü Bilgisayar | Dizüstü Bilgisayar Özellikleri: Radeon HD Grafik Kartı 6 GHz, 3420 GB RAM, 1.50 bit işletim sistemine sahip AMD A6.00-6.00M APU. |
| Americana Toksik Olmayan Akrilik Boya | DecoArt | DAO67-9 | Bu, DecoArt sitesinden sipariş edilebilir veya DecoArt perakendecilerinden mağazadan satın alınabilir. |
| Poster Panosu | Walmart | PA-1961 |
Kaynaklar
- Auld, D., Kornecook, T., Bastianetto, S., Quirion, R. Alzheimer's disease and the basal forebrain cholinergic system: relations to β-amyloid peptides, cognition, and treatment strategies. Prog Neurobiol. 68 (3), 209245(2002).
- Huang, Y., Mucke, L. Alzheimer Mechanisms and Therapeutic Strategies. Cell. 148 (6), (2012).
- Querfurth, H., LaFerla, F. Alzheimer's disease. New Engl J Med. 362 (4), 329-344 (2010).
- Karran, E., Mercken, M., Strooper, B. The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 10 (9), 698-712 (2011).
- Akiyama, H., et al. Inflammation and Alzheimer's disease. Neurobiol Aging. 21 (3), (2000).
- Butterfield, D., Drake, J., Pocernich, C., Castegna, A. Evidence of oxidative damage in Alzheimer's disease brain: central role for amyloid β-peptide. Trends Mol Med. 7 (12), 548554(2001).
- Kalaria, R. The role of cerebral ischemia in Alzheimer's disease. Neurobiol Aging. 21 (2), 321-330 (2000).
- Selkoe, D. Alzheimer's disease: genes, proteins, and therapy. Physiol Rev. 81 (2), 741-766 (2001).
- Snowdon, D. A., et al. Brain infarction and the clinical expression of alzheimer disease: The nun study. JAMA. 277 (10), 813(1997).
- Clarke, J., et al. Overexpression of APP provides neuroprotection in the absence of functional benefit following middle cerebral artery occlusion in rats. Eur J Neurosci. 26 (7), 1845-1852 (2007).
- Whitehead, S., Hachinski, V., Cechetto, D. Interaction Between a Rat Model of Cerebral Ischemia and β-Amyloid Toxicity Inflammatory Responses. Stroke. 36 (1), 107-112 (2005).
- Agca, C., et al. Development of transgenic rats producing human β-amyloid precursor protein as a model for Alzheimer's disease: Transgene and endogenous APP genes are regulated tissue-specifically. BMC Neuroscience. 9 (1), 28(2008).
- Bayona, N. A., Gelb, A. W., Jiang, Z., Wilson, J. X., Urquhart, B. L., Cechetto, D. F. Propofol neuroprotection in cerebral ischemia and its effects on low-molecular-weight antioxidants and skilled motor tasks. Anesthesiology. 100 (5), 1151-1159 (2004).
- Langdon, K., Clarke, J., Corbett, D. Long-term exposure to high fat diet is bad for your brain: exacerbation of focal ischemic brain injury. Neuroscience. 182, 82-87 (2011).
- Brownlow, M., et al. Partial rescue of memory deficits induced by calorie restriction in a mouse model of tau deposition. Behav Brain Res. 271, 7988(2014).
- Halagappa, V., et al. Intermittent fasting and caloric restriction ameliorate age-related behavioral deficits in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease. Neurobiol Dis. 26 (1), (2007).
- Maalouf, M., Rho, J., Mattson, M. The neuroprotective properties of calorie restriction, the ketogenic diet, and ketone bodies. Behav Brain Res. 59 (2), (2008).
- Tillerson, J. L., et al. Forced limb-use effects on the behavioral and neurochemical effects of 6-hydroxydopamine. Neuroscience. 21 (12), 4427-4435 (2001).
- Sierksma, A., et al. Improvement of spatial memory function in APPswe/PS1dE9 mice after chronic inhibition of phosphodiesterase type 4D. Neuropharmacology. 77, (2013).
- D'Hooge, R., De Deyn, P. P. Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory. Behav Brain Res. 36 (1), 60-90 (2001).
- Vorhees, C., Williams, M. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nat Protoc. 1 (2), 848-858 (2006).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
