Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Toplam Lignin, lignin Monomer ve enzimatik Şeker Yayın: Lignocellulosic Biyokütle rekalsitrantların Varyasyonları yüksek verimlilik Taraması

9.7K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/53163

⸱

15 Eylül 2015

Bu makalede

Özet

Bitki hücre duvarı yapısı ve kimyası özellikleri, biyoyakıtlar ve biyo-malzemeler için ideal hammaddeleri belirlemek için değerlendirilir. Standart yöntemlerin büyük veri kümelerine uygulandığında sınırlamaları vardır. Bu yüksek verimli ön arıtma, enzim sakarifikasyonu ve piroliz-moleküler ışın kütle spektrometresi yöntemleri, çok sayıda biyokütle örneğini düşük deney süresi ve maliyeti ile karşılaştırır.

Özet

Lignoselülozik biyokütlenin yakıtlara, kimyasallara ve diğer emtialara dönüştürülmesi, yenilenemeyen enerji kaynaklarının kullanımında azalmaya yönelik olası bir yol olarak araştırılmıştır. Farklı bir havuzdan hangi bitkilerin aşağı akış uygulamaları için istenen kimyasal özelliklere sahip olduğunu belirlemek için, selüloz ve lignin içeriği veya enzimatik bir sakrifikasyonu takiben monomerik şeker salınımı gibi özellikler karşılaştırılmalıdır. Standart analiz yöntemlerinin deneysel ve veri analizi protokolleri zaman alıcı olabilir, bu nedenle ölçülebilecek numune sayısını sınırlar. Yüksek verimli (HTP) yöntemler, standart yöntemlerin eksikliklerini hafifletir ve istenen özelliklere sahip olanları izole etmek için mevcut numunelerin hızlı bir şekilde taranmasına izin verir. Bu çalışma, Ulusal Yenilenebilir Enerji Laboratuvarı'nda kullanılan HTP şeker salınımı ve piroliz-moleküler ışın kütle spektrometresi boru hatlarını göstermektedir. Bu boru hatları, binlerce tesisin verimli bir şekilde değerlendirilmesini sağlarken, işçilik ve sarf malzemelerindeki azalmalar yoluyla deney süresini ve maliyetlerini azalttı.

Giriş

Olmayan yenilenebilir yakıtlar ve bunlarla ilgili ürünlerin düşüşler küresel kaynağı olarak, bilim adamları bitki kökenli kaynaklardan 1 benzer yakıtlar ve kimyasallar oluşturmak için meydan oylandı. Bu çalışmanın önemli bir yönü, bitki türleri biyoyakıt ve biyomalzeme 2,3 üretilmesi için uygun olabilecek belirlemektir. Tipik olarak, bu besleme stokları lignin, selüloz ve hemiselüloz içeriği için değerlendirilir; ile de veya sonradan enzim sakarifikasyon olmadan, termal, mekanik ve / veya kimyasal ön yoluyla yapısızlaştırma (rekalsitrantların) kendi duyarlılık olarak. Daha detaylı bir analizi gerekiyordu lignin ve yarı selüloz parçacığına spesif....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Glikoz ve Ksiloz Verimi 1. Yüksek verim tayini enzimatik sakarifikasyon 9,29 takiben

  1. Numune Hazırlama (De-Tutkal, Taşlama, Ekstraksiyon, Ön İşlem)
    1. Wiley değirmen, bu parçacıklar, bir 20 ağ üzerinden geçmesi (850 um) elek kullanılarak her bir biyokütle, örneğin, en az 300 mg öğütün. Anti-statik fermuarlı üst torba transfer (tipik bar kodlu) ve barkod veritabanına kayıt örneği bilgileri.
    2. Dikkatle, çay-bag (mürekkep veya işaretleyici kullanmayın, kalemle) önlemek için biyokütle üzerinde uçlarını katlamak için emin olmak, Sallama çaylar sıvayıp bir numaralı yaklaşık 250 mg ya da anti-statik torbasından zemin biyokütle daha ekleyin....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kimyasal ve termal ön ve daha sonra enzim sakarifikasyon birleşik etkisi, deney sonunda serbest glukoz ve ksiloz kütlesinin bir fonksiyonu olarak ölçülür. Sonuçlar biyokütle gramı başına serbest glukoz ve ksiloz miligram cinsinden rapor edilir. Bu genellikle, başlangıç ​​malzemesinin kompozisyon analizi dayanan yüzde teorik verimin olarak rapor edilir laboratuvar ölçekli deneyler, bildirilen verilerin taban tabana zıttır. Henüz haftada örneklerin binlerce kompozisyon analizi yürütmek için pratik değildir, veri en kütle .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Aşağıdaki gibi yüksek verimli tarama deneyleri yaparken doğru ve tekrarlanabilir verilerini elde etmek için temel örnek hazırlama adımları şunlardır:

Şeker Salma Deneyi:

Genel olarak numuneler, birkaç düzine bir kerede birkaç bin arasında değişen sayıda hazırlanır. Her önemli bir adım, tipik olarak örnekler arasında hazırlanmasında değişimleri en aza indirmek için ileri doğru hareket önce, bütün numuneler için gerçekleştirilmiştir. De-Tutkal başlangıçta protokolü.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, bu el yazmasında tartışılan her iki yüksek verimli boru hattı için biyokütle örneklerinin hazırlanmasına ilişkin olağanüstü bilgiler sağlayan stajyer Evelyn Von Neida'ya teşekkür eder. Bu çalışmanın ve el yazmasının geliştirilmesine destek Biyoenerji Bilim Merkezi tarafından sağlanmıştır. Biyoenerji Bilim Merkezi, DOE Bilim Ofisi'ndeki Biyolojik ve Çevresel Araştırma Ofisi tarafından desteklenen bir ABD Enerji Bakanlığı Biyoenerji Araştırma Merkezi'dir. Ulusal Yenilenebilir Enerji Laboratuvarı (NREL), Alliance for Sustainable Energy, LLC tarafından DOE için işletilen ABD DOE Enerji Verimliliği ve Yenilenebilir Enerji Ofisi'nin ulusal bir laboratuvarıdır. Bu ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Biomek FX Otomatik İş İstasyonuBeckman CoulterBiomek FXOtomatik Sıvı İşleyici
Wiley değirmeniThomas Scientific3375E15 (Model 4) veya 3383L20 (Mini değirmen)
anti-statik torbalarMinigrip*MGST4P025032.5x3", birden fazla tedarikçi mevcut
kalay kaplı bakır telMcMaster-Carr8871K840.016" çap, bük ve kal tel
çay poşetleriHerbcopress n' demleme çay poşetleri3.5x5 inç
gluko-amilazNovozymesSpirizyme Yakıt 
alfa-amilazNovozymesLiquozyme SC DS
sodyum asetat trihidratherhangi bir kimyasal tedarikçisireaktif sınıfı
asetik asitherhangi bir kimyasal tedarikçisireaktif sınıfı
190 kanıt (%95) etanolherhangi bir kimyasal tedarikçisireaktif sınıfı
haznelerFreeslate
96- kuyu C-276 Hastelloy plakalarıAspen İşleme (Lafayette, Colorado)N / A (özel yapım)
1/8 "havya ucuSears
silikon yapışkan destekli Teflon bant3M51803" genişliğinde (36 yarda rulo)
enzim çözeltisiNovozymesCellic CTec2
sitrik asit monohidratherhangi bir kimyasal tedarikçi
trisodyum sitrat dihidratherhangi bir kimyasal tedarikçi
tek kullanımlık, polistiren 96 oyuklu plakalarGreiner Bio-One655101veya eşdeğeri; birden fazla tedarikçi mevcut
glikoz oksidaz / peroksidaz & nbsp;MegazymeK-GlucMegazyme D-glikoz test kiti
ksiloz dehidrojenazMegazymeK-KsilozMegazyme D-ksiloz test kiti
glikoz standart çözeltisiMegazymeK-GlucMegazyme D-glikoz test kiti
ksiloz standart çözeltisiMegazymeK-KsilozMegazyme D-ksiloz tahlil kiti
paslanmaz çelik numune kaplarıSınır LaboratuvarlarıPY1-EC80F
cam elyaf levhalarPall662278x10" levhalar; Standart delgeç ile delinmiş daireler
Şeker kamışı küspesi Bütün Biyokütle HammaddesiNIST8491
Doğu Kavak Ağacı (kavak) Bütün Biyokütle HammaddesiNIST8492
Monterey Çamı Bütün Biyokütle HammaddesiNIST8493
Buğday Saman Bütün Biyokütle HammaddesiNIST8494

Kaynaklar

  1. U.S. Billion-Ton Update: Biomass Supply for a Bioenergy and Bioproducts Industry. Perlack, R. D., Stokes, B. J. , Oak Ridge National Laboratory. Oak Ridge, TN. (2011).
  2. Henry, R. Ch. 5. Plant Resources for Food, Fuel and Conservation. , Earthscan. 53-80 (2009).
  3. Henry, R. J.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Biyokütle DirençliliğiBuhar Ön İşlemiGlukoz Ksiloz KantitasyonuPiroliz Moleküler DemetKütle SpektrometresiHücre Duvarı AnaliziRobotik Numune İşleme