Yenidoğan Domuzların Lenf Bağırsak Lenf Trunk ve Koleksiyonu Uzun Vadeli Kateterizasyon

Özet

Neonatal domuzlarda efferent lenflerden büyük miktarlarda lipid metabolizması bileşenlerini toplamak için bağırsak lenf gövdesini kateterize etmek için cerrahi bir prosedür sunuyoruz.

Özet

Neonatal domuzlarda bağırsak lenf gövdesinin kateterizasyonu, büyük miktarlarda bağırsak (merkezi) efferent lenfin uzun süreli toplanmasına izin veren bir tekniktir. Daha da önemlisi, bağırsaktan merkezi lenf toplanması, araştırmacıların lipid metabolizması, bağırsak iltihabı ve kanser metastazı ile ilişkili mekanizmaları ve lipid oluşumlarını ve ayrıca bağışıklık fonksiyonu ve immünosürveyanstada yer alan hücreleri incelemelerini sağlar. Ventral orta hat cerrahi yaklaşımı, kraniyal karın bölgesine mükemmel cerrahi maruziyete ve pankreasın yakınında bulunan bağırsak lenf gövdesi damarına ve sağ karaciğer lobunun viseral yönünün altındaki portal venin sağ ventral segmentine nispeten kolay erişime izin verir. Damar titizlikle diseke edilir ve çevredeki fasyadan serbest bırakılır ve daha sonra kateterin damar içine yerleştirilmesine ve ardından sabitlenmesine izin veren dikişlerle genişletilir. Kateter dıştan çıkarılır ve 7 günlük bir süre içinde yaklaşık 1 L / 24 saat lenf toplanır. Bu teknik, uzun bir süre boyunca büyük miktarlarda merkezi lenf toplanmasını sağlarken, başarı dikkatli cerrahi diseksiyon, doku kullanımı ve uygun cerrahi tekniğe yakın dikkat gösterilmesine bağlıdır. Bu, özellikle genç hayvanlarda yapılan ameliyatlarda önemlidir, çünkü lenf damarları kolayca yırtılabilir ve potansiyel olarak cerrahi ve deneysel başarısızlığa yol açabilir. Video, bağırsak lenflerinin toplanması için mükemmel bir cerrahi tekniği göstermektedir.

Giriş

Lenf sistemi fizyolojisi ilgili yeterli bir alandır. Lenfatik kateterizasyon Klinik öncesi modeller farklı hayvan türleri ^1-8 oluşur ve lipid ^8-12 ve ilaç metabolizması ^13-15, deneysel tedavi ¹⁷ kanser metastazı ¹⁶ katılan mekanizmaların araştırılması ilaç sanayi ve araştırma kurumları tarafından kullanılan ve bağışıklık fonksiyonu ^{18 -26.} Bu çalışma, lipoprotein metabolizma bileşenlerini ölçmek için bir iç domuz modelinde bağırsak lenf gövde kateterizasyon kullanımını araştırıyor. Lipoprotein metabolizması üretimi ve salgılanması şilomikronlar bölgesinin ve ilişkili lipid ve toplam proteinin değişikli....

Protokol

video ve yazıda hem anlatılan deney hayvanlarında Tüm işlemler Hayvan Bakım Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallar Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve takip edildi.

1. Cerrahi Anestezi ve Neonatal Domuzlar Cerrahi Hazırlık

1. azaperone (0.3 mg / kg) ketamin hidroklorür (10 mg / kg), deksmedetomidin (15 ug / kg), bir ayrı Hol olarak, 25 kg ihtiva eden bir kas içi sedatif anestetik madde kokteyli ile boyun tabanına yakın domuz premedikasyon.
   Not: Geliştirilmiş intra-operatif ağrı kontrolü için önceden anestezik ilaç kokteyli buprenorfin (0,005-,02 mg / kg) ekleyin.
2. Bir yüz maskes....

Sonuçlar

Yenidoğan domuz bağırsak lenfatik gövde lenfatik kateterizasyon 7 günlük süre içinde yaklaşık 1 L merkezi lenf / 24 saat toplanmasını sağlar. Bu deneylerde elde lenf lipid metabolizması, yani toplam lenf protein, ApoB48 kolesterol, trigliserid, toplam protein ve kolesterol bileşenlerini ihtiva etmiştir. Tablo 1 vurgulamaktadır üç domuz toplanmış lenf örneklerinden bu lipit bileşenleri temsil miktarları. Özellikle, lenf akışı ve lipid bileşenleri in-line bağırsak lenfatik damarların.......

Tartışma

Bağırsak lenf Toplama çeşitli deneysel hayvan modellerinde lipid ^8-12 ve ilaç ^13-15 metabolizması, kanser metastazı ^16,17, hücre kaçakçılığı ve bağışıklık fonksiyonu ^18-26 katılan mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir yöntemdir. Nitekim, uzun bir süre boyunca ya periferik (afferent) ve merkezi (efferent ve büyük gövde damarlar) lenf büyük miktarlarda hasat yeteneği immün modülasyon ajanları ^18-22 ile zorluklar aşağıdaki hücre popülasyonlarının meydana zamansal .......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Miller laringoskop bıçağı	Welch Allyn	68044	182 mm uzunluk
Surgivet danışmanı: Yaşamsal belirti monitörü	Surgivet	V9203
Rektal sıcaklık probu	Surgivet	V3417
Mono-polar elektrocerrahi jeneratörü	Valley Lab
Metzenbaum makas	Güzel Bilimler	14518-18
Tüfücü ekartör	Stevens	162-11-676
Sivrisinek forseps	Stevens	162-7-10
Kelly forseps kavisli (14cm)	Stevens	162-7-38
Allis doku forseps	Stevens	162-7-38
Forseps pansuman gözü (10.2cm)	Stevens	162-18-780
Forseps pansuman-Adison (12.1cm)	Stevens	162-17-2510
İğne Sürücüleri	Stevens	162-V98-42
İris makası	Güzel bilim	14058-11
Sirkülasyonlu su pompası	Jorvet	J-783X
Maxitherm-Vinil battaniye	Jorvet	J-784C
Q ucu aplikatörleri	Fisher Scientific	22-037-960
Kateterizasyon  boru (4.06 OD X 2.31 ID)	Braintree Scientific Inc.	MRE-160	Mikro-Renetan implantasyon tüpü
2-0 ipek sütür	Ethicon	LA556
2-0 poliglaktin sütür	Ethicon	J443H	2-0 vicryl
Büyük hayvan ceketi	Lomir Biyomedikal A.Ş.	SSJ2YC
Polipropilen yıkama şişeleri	Fisher Scientific	03-409-22C	500 ml
Penisilin-Streptomisin	Sigma Aldrich	D4333
EDTA	Sigma Aldrich	60-00-4
Amfoterisin B	Sigma Aldrich	A2411
Azaperone	Elanco Hayvan Sağlığı		Stresnil
Deksmedetomidin hidroklorür	Zoetis	6295	Deksomitör
İzofluran,	Abbott Hayvan  Sağlık	05260-5	IsoFlo
Ketamin hidroklorür	Zoetis	2626	Ketaset
Bupenorfin hidroklorür	Şampiyonu Alstoe Hayvan Sağlığı		DIN:02347510
6 mm Endotrakeal tüp	Jorvet	J-165d
%10 Lidokain spreyi	AstraZeneca		DIN:02003767
%4 Klorheksidin cerrahi önlük	Partnar Hayvan Sağlığı	PCH-011	Seyreltilmiş: %2.0 çözelti
3M Cerrahi örtü	3M Health Care	1040
SDS sayfa jeli	İnvitrojen	EA0375BOX	%3-8 tris asetat
Poliviniliden florür membran	Milipore		IPVH00010 0.45 μ m gözenek boyutu
ApoB antikoru	EMD Millipore	AB742	1:4000 seyreltme
Eşek anti-keçi IgG-HRP	Santa Cruz Biyoteknoloji	Sc-2304
ECL Prime Western Blotting Reaktifi	GE Sağlık Yaşam Bilimleri	RPN2232
Trigliserit Kiti	Wako Saf Kimyasallar	998-40391 / 994-40491
Toplam Kolesterol Kiti	Wako Saf Kimyasallar	439-17501
Toplam Protein	Pierce	23225	Biskinkoninik Asit Testi

,