Bu prosedür bir izoelektrik beyin devlet sonuçlanan fizyolojik ilgili beyin durumlarında ve devam eden elektrik faaliyetlerinin tam kaldırılmasından sonra tek nöronların uzun ömürlü in vivo hücre içi kayıtları gerçekleştirir. hayvanın fizyolojik sabitleri dikkatle yapay komada durumuna geçiş sırasında izlenir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir izoelektrik Beyin Devlet indüksiyon Nöronal Eksitabilite üzerinde Endojen Sinaptik Faaliyet etkisini araştırmak için
Bu makalede
Özet
Özet
yolu nöronlar işlem bilgileri kendi içsel membran özelliklerine ve afferent sinaptik ağının dinamikleri hem de bağlıdır. kuvvetle uyanıklık durumunun bir fonksiyonu olarak değişmektedir özellikle endojen üretilen ağ aktivitesi, olarak, önemli ölçüde nöronal hesaplama modüle eder. Spontan serebral dinamikleri tek nöronların bütünleştirici özelliklerini nasıl etkilediğini farklı araştırmak için, sodyum pentobarbital yüksek dozda sistemik enjeksiyonu yoluyla in vivo olarak serebral aktivitesi bastırmada oluşan sıçan yeni bir deneysel strateji geliştirmiştir. Sürekli kombine elektrokortikogram (EcoG) ve hücre içi kayıtları tarafından izlenen kortikal faaliyetleri, giderek istikrarlı bir izoelektrik profiline lider, yavaşlar. derin bir koma halinde sıçan koyarak bu aşırı beyin devleti, dikkatle deneyler boyunca hayvanın fizyolojik sabitleri ölçülerek izlendi. Hücre içi recordings bize karakterize ve uyku-uyanıklık döngüsü karşılaşıldığı gibi fizyolojik ilgili kortikal dinamikleri, içine gömülü aynı nöronun bütünleştirici özelliklerini karşılaştırmak için izin ve beyin tamamen sessiz olduğu zaman.
Giriş
herhangi bir çevresel uyaranlara veya davranışsal görevlerin yokluğunda, "dinlenme" beyin elektroensefalografi (EEG) dalgalar olarak kafa derisi kaydedilebilir elektriksel aktivitenin sürekli bir akış oluşturur. Bu endojen serebral aktivitenin hücre içi korelasyon afferent ağlar 1,2 sürekli aktiviteyi yansıtan eksitatör ve inhibitör sinaptik potansiyellerin bir arada oluşur (aynı zamanda "sinaptik gürültü" olarak da bilinir) arka plan membran voltaj dalgalanmaları ile karakterizedir. Bu spontan aktivite teyakkuz farklı devletleri ile frekans ve genlik değişir. Tek nöronların eksitabilite ve cevaplılığı üzerine ağ etkinliğinin etkisini aydınlatılması sinirb....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm işlemler Avrupa Birliği kurallarına uygun olarak yapılmıştır (direktif 2010/63 / AB) ve Hayvan Deneyleri Charles Darwin Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Ancak çoğu adımlar herkesin özel ihtiyaçlarına uygun şekilde adapte edilebilir, burada rutin laboratuvarda kullanmak prosedürü açıklar.
1. Cerrahi Hazırlık
Not: Tüm kesi ve basınç noktaları tekrar tekrar lokal anestezi (lidokain veya bupivakain) ile infiltre edilmelidir. aseptik hazırlanışı çeşitli modifikasyonlar uygulanmalıdır gerekli ise, bu işlem, bir terminaldir.
- İki yerel olarak ayrılmış intraperitonal (IP) enjeksiyon sodyum pentoba....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Uyaran ve bir izoelektrik beyin durumunu korumak in vivo deneysel prosedürde bir hassastır. Doğrudan sinirsel uyarıların ve transfer fonksiyonunun 29 kortikal ağ etkinliğinin etkisini incelemek için güçlü bir araç olduğu kanıtlanmıştır. Şekil 1 (Şekil 1A önce hayvanın fizyolojik durumunun ECOG ve hayati sabitleri de dahil olmak üzere çok parametreli izleme, gösterir izoelektrik devletin) ve sonra (Şekil 1B) i.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Biz burada ağ ve hücresel düzeydeki in vivo spontan serebral elektriksel aktivitenin içinde bastırmak için yeni bir yöntem tarif. Bu prosedür, izoelektrik koma 41 olarak bilinen bir aşırı beyin durumuna yol açar. görünümünde bir klinik açıdan bakıldığında, böyle bir elektroserebral hareketsizlik EEG görülebilir en ağır anormallik olduğunu. Çoğunlukla ya ölüyor ya da kalıcı bitkisel 42 devam tüm hastalarla, geri dönüşü olmayan bir koma ile ilişkili, ancak (örneğin tiyopental gibi) .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma Fondation de France, Institut National de la Sante Et de la Recherche MEDICALE, Pierre & Marie Curie Üniversitesi ve programın 'Investissements d'avenir' ANR-10-IAIHU-06 hibe ile desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Sodyum Pentobarbital | Centravet, | Pentobarbital | |
| Ketamin 500 | Merial | Imalg & egrave; ne 500 | |
| Fentanil | Janssen-Cilag | Fentanil | |
| Ksilokain | Santrifüjü | Ksilometre | |
| Gallamin trietiyodür | Sigma | G8134 | |
| ECoG amplifikatör | A-M Sistemleri | AC amplifikatör, Model 1700 | |
| Hücre içi amplifikatör | Moleküler Cihazlar | Axoclamp 900A | |
| Veri toplama arayüzü | Cambridge Elektronik Tasarım | CED gücü 1401-3 & nbsp; | |
| Veri analiz yazılımı | Cambridge Electronic Design | Spike2 sürüm 7 | |
| mikromanipülatör | Scientifica | IVM-3000 | |
| Kılcal Çektirme | Narishige | PE-2 | |
| Borosilikat cam kılcal damarlar | Harvard Aparatı | GC150F-10 | |
| Gümüş tel 0.125 mm (hücre içi kayıt) | WPI | AGT0525 | |
| Ag-AgCl referansı | Phymep | E242 | |
| Gümüş tel 0,25 mm (ECoG kayıt) | WPI | AGT1025 | |
| Suni solunum sistemi | Minerve | Alpha Lab | |
| Fizyolojik parametrelerin izlenmesi | Digicare | LifeWindow Lite | |
| Isıtma Battaniyesi | Harvard Aparatı | 507215 | |
| Stereomikroskop | Leica | M80 | |
| Makas | FST | 15005-08 | |
| Forseps Dumont #5 | FST | 11295-10 | |
| Forseps Dumont #5SF | FST | 11252-00 | |
| IP Poliüretan kateter - 0.43x0.69 mm | Instech | BTPU-027 | |
| Silikon elastomer | WPI | KWIK-CAST | |
| Diş matkabı | NSK | Y1001151 ve P496 | |
| Cerrahi yapıştırıcı | 3M | vetbond |
Kaynaklar
- Fatt, P., Katz, B. Some observations on biological noise. Nature. 166 (4223), 597-598 (1950).
- Brock, L. G., Coombs, J. S., Eccles, J. C. The recording of potentials from motoneurones with an intracellular electrode. J. Physiol. 117 (4), 431-460 (1952).
- Destexhe, A., Rudol....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
