Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

20.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/53881

⸱

11 Mayıs 2016

 ,  ,  ,  , 
1Trudeau Institute, 2Engelhardt Institute of Molecular Biology, 3Departments of Medicine and Infectious Diseases and Pathology, University of Florida

Bu makalede

Özet

Burada tarlada bu tekniğin standardizasyonu teşvik etmek mortalite olmadan tekrarlanabilir yaralanma ile sonuçlanan farelerde bağırsak iskemi-reperfüzyon ayrıntılı prosedürü açıklar. Bağırsak iskemi-reperfüzyon hasarının Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.

Özet

İntestinal iskemi ateroskleroz, tromboz, hipotansiyon, nekrotizan enterokolit, bağırsak transplantasyonu, travma ve kronik inflamasyon gibi klinik durumların geniş bir yelpazesi ile ilişkili yaşamı tehdit eden bir durumdur. Bağırsak iskemi-reperfüzyon (İR) hasarı bağırsak hasarı ile sonuçlanan mezenterik damarları aracılığıyla yetersiz kan akışının neden olduğu akut mezenterik iskemi sonucu, olduğunu. Reperfüzyon aşağıdaki iskemi daha bağırsağın zarar arttırabilir. IR yaralanma mekanizmaları karmaşık ve tam olarak anlaşılamamıştır vardır. Bu nedenle, deneysel küçük hayvan modelleri IR yaralanma patofizyolojisi ve yeni tedavilerin geliştirilmesi anlamak için kritik öneme sahiptir.

Burada ölüm olmadan ince bağırsağın tekrarlanabilir yaralanma sağlayan akut bağırsak IR yaralanma fare modeli açıklanmaktadır. Bu geçici occludin distal ileum bölgesinde uyarılması iskemi ile elde edilirg mikrovasküler klipleri kullanarak 60 dakika superior mezenterik arterin periferik ve terminal teminat dalları. 1 saat ya da histolojik analizi ile incelenmiştir bağırsağın tekrarlanabilir yaralanma yaralanma sonuçları açıklandıktan sonra 2 saat reperfüzyon. mikrovasküler klip uygun pozisyon prosedürü için kritik öneme sahiptir. Bu nedenle video klibi bu tekniğin ayrıntılı bir görsel adım adım açıklamasını sağlar. Bağırsak İR yaralanma Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.

Giriş

bağırsak iskemisi ve epitel zarar kan akışının kesilmesi için çok hassastır. iskemi sonrası reperfüzyon doku yeniden oksijenlenmesini sağlar ve ayrıca patolojiyi teşvik edebilir. Bu nedenle, intestinal iskemi ve reperfüzyon yaralanması nekrotizan enterokolit, ince bağırsak nakli allograft reddi, abdominal aort anevrizması, kalp akciğer baypas ve iltihaplı bağırsak hastalığı 1,2 komplikasyonları içeren patolojilerin geniş bir yelpazesi ile ilişkilidir. Bağırsak IR hasarı, özellikle akut mezenterik iskemi, morbidite ve mortalite 3 sonuçlanan hayatı tehdit eden bir durumdur.

Az anlaşılmış olmasına rağmen, intestinal iskemi-reperfüzyon (İR) hasarı bağırsak Mikrobiyota değişiklikler gibi reaktif oksijen türleri ve enflamatuar sitokinlerin ve kemokinlerin 1,4-6 üretimi ile ilişkili olduğu düşünülmektedir. Bu, her iki aktivasyonuna yol açarNate ve inflamasyon ve doku hasarı 1,7,8 teşvik adaptif immün mekanizmalar.

Onlar kolay gain- ve zarar fonksiyon-genetik deneyler izin verdiği Hayvan modelleri, IR yaralanma mekanizmaları anlamak için kritik öneme sahiptir. IR çeşitli hayvan modelleri tam damar tıkanıklığına, düşük akımlı iskemi geliştirildi, ve (son kapsamlı inceleme 9 özetlenmiştir) damar tıkanıklığına segmentli edilmiştir. Superior mezenterik arter (SMA) tam damar tıkanıklığı neden olduğu bağırsak iskemi büyük hayvanların ve kemirgenler 9-11 IR kolay ve yaygın olarak kullanılan bir modeldir. Bununla birlikte, bağırsak farklı alanlarda hasar karşı farklı duyarlılığa sahiptir. Buna ek olarak, yaralanma değişken derecelerde iskemik hasar ve kurtarma sonucu süresi farklı anestezik, analjezik, arter tıkanıklığı teknikleri aralığı yanı sıra tutarsızlık birden STUDIE karşısında IR biyoloji anlayışımızı karıştırıcıs. Tablo 1 fare IR çalışmalarda bu tutarsızlıkları ortaya koymaktadır. kısa iskemik kez (30-45 dakika) kullanarak büyük dezavantajı vakalar ve kontroller arasındaki fark farklar görülebilir bunun üzerine kurtarma penceresi hedefliyor. epitele Hafif yaralanma, bu nedenle, reperfüzyon sonrası bir saat çözülmesi patolojik ölçümlerini epitel iadesinde farklılıkları bulmak gerekebilir uzman olabilir. Bunun tersine, aşırı hasar, iskemik yaralanma, 100 dakika tarafından görülen ölüm oranını ve geri kazanım süresi arttıkça, iade artık mümkün değildir epitel, tam soyulma- neden olabilir. Bu nedenle, burada bizim tarlada bu tekniğin standardizasyonu teşvik etmek mortalite olmadan tekrarlanabilir yaralanma ile sonuçlanan farelerde bağırsak IR ayrıntılı prosedürü açıklar. Bağırsak İR yaralanma Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Hayvan çalışmaları Sağlık kılavuzların Ulusal Enstitüsü ile uygun olarak yapıldı ve Kurumsal Hayvan Bakım tarafından onaylanmış ve Trudeau Enstitüsü Komitesi kullanın. 8-12 haftalık C57BL / 6 fareleri çalışma için kullanıldı.

Cerrahi 1. Hazırlık

  1. Hazırlayın ve cerrahi aletler sterilize edin.
  2. burun konisi ve ısıtmalı pad ile izofluran tabanlı anestezi sistemi hazırlayın. Emin olun ısıtmalı ped ısınmış değil (<39 ºC).
  3. izofluran gazı tahliye teneke kutu bloke veya herhangi bir şekilde tıkalı olmayan kutunun altındaki egzoz portları sağlamak için doğru pozisyonda olduğundan emin olun. teneke kutu üzerindeki prosedür ve belge ağırlığı öncesinde gazı tahliye bidonunu tartılır. teneke kutu ağırlığı birikmiş ağırlık (~ 12 saat) 50 g aştığında teneke kutu atın.

2. Anestezi

  1. indüksiyon odasında% 3 izofluran ile fare anestezisi (1 L / dkO 2).
    1. dik kalması için bir yetersizlik ile anestezi derinliği değerlendirmek maksatlı istemli hareket, göz kırpma refleksinin kaybı, kas gevşeme ve yanıt kaybı kaybı (firma basıncı ile ayak veya kuyruk tutam) stimülasyon refleks.
    2. göğüs duvarı ve karın hareketlerini gözlemleyerek solunum hızı ve desen değerlendirin. Optimal anestezi altında nefes hızı dakikada ortalama ~ 55-65 nefes olmalıdır.
    3. indüksiyon odasından fareyi çıkarın ve hızlı bir şekilde fare karın alan tıraş.
  2. kornea kuruma önlemek için, gözlerde mülayim oftalmik merhem yerleştirin.
  3. Isıtmalı pad üzerinde fare yerleştirin ve anestezi sistemine burun konisi yoluyla bağlayın. Emin olun lateks burun konisi membran sıkıca fare başının üzerinde oturur ve izofluran hiçbir sızıntı yoktur.
  4. subkutan ağrı çağlayan rüzgar engellemek için% 1.5 izofluran oranını azaltmak ve buprenorfini (0.1 mg / kg) ve ketamin (10 mg / kg) enjekte edilir.
  5. th Wipe% 70 etanol ve ardından Betadinede cerrahi çözeltisi ile ıslatılmış steril pamuklu çubuk ile çalışma alanının e cilt.

3. Cerrahi

  1. işletim makas ile orta çizgi 3-5 cm laparotomi olun. tuzlu su ile nemlendirilmiş steril yapışkan olmayan ped ile kapak operasyonu alanı. çekum ve ileum izole etmek ve tuzlu su içinde nemli bir pamukla kullanarak superior mezenterik arter maruz kalmaktadır.
  2. Uygulayarak klibi kolaylaştırmak bunu scissors.To ince iris kullanarak superior mezenterik arter çevreleyen mezenterinde küçük nicks yapmak için, hafifçe soyunma forseps ile bağırsak yükseltmek ve (istenilen klip pozisyonunda Şekil superior mezenterik arterin her iki tarafında mezenterin kesti 1A). Ardından, klip uygulamadan önce istenen klip konumunda alanına steril tuzlu su birkaç damla ekleyin.
    Not: sham ameliyatı 3.2 adıma cerrahi prosedürü takip etmek. klipleri geçerli değildir. Bunun yerine, katma ılık s tarafından nemli dokusu korumakaline olarak 1 saat süre ile 3.6 tarif edilmiştir. Daha sonra, 4.1 adıma geçin,
  3. Çekum (Şekil 1B) bitişik iskemik ileum 5-7 cm'lik bölge oluşturmak için bir klip uygulayıcı kullanılarak mikrovasküler klipleri (70 g kuvveti) ile superior mezenterik arterin birinci dereceden dalları tıkamak. Gemilerin konumu muhafazakar olmasına rağmen, fareler arasında küçük farklılıklar (Şekil 1 örneklere bakınız) olabilir. Bu nedenle, 2 ya da 3 klip genellikle (Şekil 1A, D, E, siyah oklar klipleri yerini görmek) gereklidir.
    Not: Yüksek kaliteli gemi klipleri kullanın. Yüksek basınç klipleri damarlarının zarar ve tamamen kan akışını bloke olmayabilir alçak basınç klipleri (<30 gr) ise rejenerasyon önleyebilir.
  4. Iskemik bağırsak bölgesini (Şekil 1) demarking, gemilerin karşısında iki mikrovasküler klipler kullanarak bağırsağın (40 g kuvveti) ile kollateral kan akışını engeller. kollateral damarların tıkanması için gereklidirBitişik kan damarlarından kan akımını engellemek (Şekil 1A, D, E, yeşil oklar klipleri yerini bakınız).
  5. İsteğe bağlı: kan pıhtılaşmasını önlemek için heparin çözeltisi (6 USP birim / ml) ekleyin. İzole bağırsağa heparin solüsyonu 0.5 ml ilave ilave edildi.
  6. tuzlu su ile ıslak steril yapışmayan pedi hassas silme bezleri, 37 ° C'ye kadar önceden ısıtılmış ve cerrahi alanı için de geçerlidir. mendil tüm prosedür sırasında ıslak kalır emin olun.
  7. boyunca% 1-1.5 izofluran anestezi ile 60 dakika iskemi koruyun. iskemi prosedür doğru yapılırsa, iskemik bölge yaklaşık 30 dakika içinde renk şarap kırmızı değişecektir. Başarılı tıkanıklığı gösteren iskemi (Şekil 1, sağ paneller) sırasında genişlemiş klip konumuna uzak kan damarlarını unutmayın.
  8. Yakından iskemi safhasında fare izleyin. Ameliyat sitesini kapsayan yapışmayan pad tuzlu su çözeltisi uygulamaya devam.
  9. işaretdoku üzerinde Gill`s 3 hematoksilen 20 ul pipetleme iskemik alanın kenarları (Şekil 1E, sağ panel) karşılaştırma için aynı fare iskemik doku ve komşu sağlıklı dokulara hasat kolaylaştırmak için.

4. reperfüzyon Sahne

  1. iskemi sonunda klip alanında serum fizyolojik birkaç damla ekleyin ve hafifçe klip uygulayıcı ile mikrovasküler klipsleri çıkarın. Sonra, yavaşça tuzlu nemlendirilmiş pamuk ipuçlarını kullanarak geri karın boşluğuna bağırsak itin. yapışmayan dolgusunu çıkarın ve 9 mm paslanmaz çelik yara klipleri kullanarak karın duvarı ve cilt kapatın. reperfüzyon, 3 saat daha uzun gerçekleştirilirse, deri üzerinde yara klipleri uygulamadan önce karın duvarı kapatmak için bir emilebilir Vicryl dikiş kullanır.
  2. reperfüzyon fazı için, istenen süre (30 dakika, 60 dakika, 120 dakika veya 180 dakika) için ısıtıldı temiz bir kafes fareler koruyun.
  3. her 30 dk istikrarı sağlamak için en az hayvanları kontrol edin.
5. Otopsi ve Küçük Bağırsak Hasat

  1. CO reperfüzyon sonrası istenilen zamanda servikal dislokasyon tarafından takip 2 doz aşımı fareler Euthanize.
  2. karın boşluğu açmak ve daha fazla analiz için iskemik bağırsak doku toplanır. yaralanmaya herhangi bir sistemik reaksiyon için hesap için bir iç kontrol olarak yaralı doku bitişik Hasat sağlıklı normal doku.
    Not: Bu kontrol sahte ameliyatlı farenin İR kaynaklı yaralanmalara sistemik reaksiyonuna maruz çünkü plasebo kontrol fareleri ameliyat daha uygundur.
  3. uzunlamasına sonra tuzlu su ile doldurulur ve ekli sonda iğne ile bağırsağın 30 ml şırınga kesmek kullanılarak bağırsak içeriği yıkayın. bağırsak örnek gen ekspresyon analizi için gerekli ise, uzunlamasına 1.5 mm'lik bir fragmanını kesilmiş ve histolojik analiz için geri kalan parça kullanımı.
  4. histolojik analiz için, intest rulo forseps bir çift kullanarak bir İsviçre rulo hazırlamakine.
  5. Haddelenmiş formunu korumak doku kasetlerde biyopsi köpük pedler (Şekil 2) arasındaki bağırsak parçaları yerleştirin. % 10 tamponlu formalin içine kasetleri yerleştirin.
  6. En az 24 saat süreyle formalin doku sabitleyin. Ek bir 24 saat boyunca% 70 etanol ile formalin değiştirin. Oda sıcaklığında süresiz% 70 etanol saklayın dokusu.
  7. Parafin gömün, 5 mikron bölümleri kesmek ve hematoksilen ve eozin standart bir protokol (Şekil 3) kullanılarak leke.

6. Puanlama

  1. Tablo 2'de özetlendiği gibi. Fare iskemi-reperfüzyon hasarı Puan uygun bir puanlama yöntemini seçin.
  2. İsteğe bağlı: Yaralanma şiddeti bölümü boyunca değişir beri dört bölüme görüş alanını bölün.
  3. körü körüne edilen puanlar her bölümün ortalama notu hesaplayın.
  4. Olguların ve kontrol arasındaki yaralı doku notu karşılaştırmak yanı sıra incie Bir Dunn çoklu karşılaştırmalar testi tarafından izlenen bir Kruskal-Wallis Testi kullanılarak doku yara almadan kurtuldu.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Biz farelerde ileum tekrarlanabilir IR kaynaklı yaralanma elde etmek için IR cerrahi deneysel protokol optimize. Örnek sonuçlar bu bölümde gösterilmiştir.

Şekil 1 ileum iskemi ikna etmek için mikrovasküler klipler pozisyon örneklerini gösterir. Siyah oklar superior mezenterik arterin birinci dereceden dallarını kapatılmasıy ana klip konumunu gösterir. Yeşil oklar kollateral damarlardan kan akışını engellemek i...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bağırsak IR yaralanma fare modellerinin geliştirilmesi büyük ölçüde doku hasarının mekanizmaları iyi anlaşılmasını sağlamıştır ve doku hasarı 7,9,11,34 en aza indirmek için potansiyel terapötik stratejilerin geliştirilmesine yardımcı oldu. Bu protokolün kritik adımlar mikrovasküler klip doğru konumlandırma, IR yaralanma iskemi ve uygun histolojik değerlendirme doğru zamanlama vardır.

iskemi süresi daha sonraki epitel hasar için kritik öneme sahiptir. morbidite ve deneysel fareleri...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir

Teşekkürler

Rus Bilim Vakfı tarafından desteklenen bu çalışma, hayır verin. 14-50-00060 ve LLC RUSCHEMBIO. Bu çalışma aynı zamanda (CJ için) 294.083 (AVT için), ve NIH hibe RO1 DK47700 tarafından hibe Amerika Crohn`s ve Kolit Vakfı tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Isıtmalı Ped Güneş IşınıE12107-819Alternatif: Braintree Scientific ısıtmalı ped
Masa üstü araştırma anestezi MakinesiVascoUCAP 0001-0000171Alternatif: Parkland Scientific, V3000PS
Burun KonisiParkland ScientificARES500
Çöpçü teneke kutu ve yedek kartuşParkland Scientific80000, 80120
İndüksiyon OdasıSurgivetV711802
IsofluranPiramal HealthcareNDC 66794-013-10Kontrollü madde, IACUC
Hayvan kesme makinesi ile iletişime geçin ve nbsp;Oster Oster Golden A5 078005-050-003
Oftalmik merhemWebster8804604
BuprenorfinMcKesson562766Kontrollü madde, IACUC ile iletişime geçin
Ketaset (Ketamin HCl)PfizerNADA 45-290Kontrollü madde, IACUC ile iletişime geçin
Pamuk ipuçlarıPüriten tıbbi ürünler806-WCKullanmadan
BetadinePurdue Ürünleri67618-150-17%10 Povidon-İyot
Steril tuzlu su çözeltisiAspen46066-807-60Kullanmadan önce oda sıcaklığına ayarlayın
IR kemirgen termometresiBIOSEBBIO-IRB153
Mikro vasküler klipsler, 70 gRoboz Cerrahi RS5424, RS5435Alternatif: WPI 14121, SMA oklüzyonu için
Mikro vasküler klipsler, 40 gRoboz Cerrahi RS6472Alternatif: WPI 14120, teminat damarları tıkanıklığı için
Forseps uygulayanWorld Precision Instruments14189Alternatif: Roboz #RS-5410 veya  #RS-5440
Gill's 3 hematoksilenThermo Scientific14-390-17
Cerrahi zımbalar, Refleks 9 mmHücre Noktası Bilimsel201-1000
Autoclip uygulayıcıBeckton Dickinson427630
Byopsy köpük pedSimportM476-1
Doku kasetiFisher Healthcare15182701AHistosette II kombinasyon kapağı ve tabanı
%10 tamponlu formalinFisher Scientific245-684
Cerrahi iris makasıWorld Precision Instruments501263-G SCAlternatif: Roboz RS6816
Ameliyat makasıWorld Precision Instruments501219-GAlternatif: Roboz RS6814
Pansuman forsepsRoboz Surgical RS-5228, RS-8122Alternatif: World Precision Instruments 1519-G
Heparin, endotoksin içermez, 300 USP birim / flakon, 50 mgSigma2106
Refleks yara klipsi çıkarma forsepsRoboz Cerrahi RS-9263Alternatifi: Dünya Hassas Aletleri: 500347 Fareler
C57BL / 6J fareler Jackson LaboratuvarStok No 0664
Telfa yapışmayan pansumanlar, 3 x 4, sterilCoviden1050
Fisherbrand transfer pipetleriFischer Scientific13-711-5AMDamla damla tuzlu su eklemek için pipet kullanın
önce otoklav klips

Kaynaklar

  1. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17, 1391-1401 (2011).
  2. Lenaerts, K., et al. New insights in intestinal ischemia-reperfusion injury: implications for intestinal transplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 298-303 (2013).
  3. Yasuhara, H. Acute mesenteric ischemia: the challenge of gastroenterology. Surg Today. 35, 185-195 (2005).
  4. Perez-Chanona, E., Muhlbauer, M., Jobin, C. The microbiota protects against ischemia/reperfusion-induced intestinal injury through nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 (NOD2) signaling. Am J Pathol. 184, 2965-2975 (2014).
  5. Lee, H., et al. Delineating the relationships among the formation of reactive oxygen species, cell membrane instability and innate autoimmunity in intestinal reperfusion injury. Mol Immunol. 58, 151-159 (2014).
  6. Yoshiya, K., et al. Depletion of gut commensal bacteria attenuates intestinal ischemia/reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 301, G1020-G1030 (2011).
  7. Wu, M. C., et al. The receptor for complement component C3a mediates protection from intestinal ischemia-reperfusion injuries by inhibiting neutrophil mobilization. Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 9439-9444 (2013).
  8. Muhlbauer, M., Perez-Chanona, E., Jobin, C. Epithelial cell-specific MyD88 signaling mediates ischemia/reperfusion-induced intestinal injury independent of microbial status. Inflamm Bowel Dis. 19, 2857-2866 (2013).
  9. Gonzalez, L. M., Moeser, A. J., Blikslager, A. T. Animal models of ischemia-reperfusion-induced intestinal injury: progress and promise for translational research. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 308, G63-G75 (2015).
  10. Megison, S. M., Horton, J. W., Chao, H., Walker, P. B. A new model for intestinal ischemia in the rat. J Surg Res. 49, 168-173 (1990).
  11. Goldsmith, J. R., et al. Intestinal epithelial cell-derived mu-opioid signaling protects against ischemia reperfusion injury through PI3K signaling. Am J Pathol. 182, 776-785 (2013).
  12. Cuzzocrea, S., et al. Glycogen synthase kinase-3beta inhibition attenuates the development of ischaemia/reperfusion injury of the gut. Intensive Care Med. 33, 880-893 (2007).
  13. Farber, A., et al. A specific inhibitor of apoptosis decreases tissue injury after intestinal ischemia-reperfusion in mice. J Vasc Surg. 30, 752-760 (1999).
  14. Ben, D. F., et al. TLR4 mediates lung injury and inflammation in intestinal ischemia-reperfusion. J Surg Res. 174, 326-333 (2012).
  15. Watson, M. J., et al. Intestinal ischemia/reperfusion injury triggers activation of innate toll-like receptor 4 and adaptive chemokine programs. Transplant Proc. 40, 3339-3341 (2008).
  16. Watanabe, T., et al. Activation of the MyD88 signaling pathway inhibits ischemia-reperfusion injury in the small intestine. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 303, G324-G334 (2012).
  17. Murayama, T., et al. JNK (c-Jun NH2 terminal kinase) and p38 during ischemia reperfusion injury in the small intestine. Transplantation. 81, 1325-1330 (2006).
  18. Park, P. O., Haglund, U., Bulkley, G. B., Falt, K. The sequence of development of intestinal tissue injury after strangulation ischemia and reperfusion. Surgery. 107, 574-580 (1990).
  19. Jilling, T., Lu, J., Jackson, M., Caplan, M. S. Intestinal epithelial apoptosis initiates gross bowel necrosis in an experimental rat model of neonatal necrotizing enterocolitis. Pediatr Res. 55, 622-629 (2004).
  20. Aprahamian, C. J., Lorenz, R. G., Harmon, C. M., Dimmit, R. A. Toll-like receptor 2 is protective of ischemia-reperfusion-mediated small-bowel injury in a murine model. Pediatr Crit Care Med. 9, 105-109 (2008).
  21. Tatum, P. M., Harmon, C. M., Lorenz, R. G., Dimmitt, R. A. Toll-like receptor 4 is protective against neonatal murine ischemia-reperfusion intestinal injury. J Pediatr Surg. 45, 1246-1255 (2010).
  22. Fleming, S. D., et al. Anti-phospholipid antibodies restore mesenteric ischemia/reperfusion-induced injury in complement receptor 2/complement receptor 1-deficient mice. J. Immunol. 173, 7055-7061 (2004).
  23. Fleming, S. D., et al. Mice deficient in complement receptors 1 and 2 lack a tissue injury-inducing subset of the natural antibody repertoire. J. Immunol. 169, 2126-2133 (2002).
  24. Lapchak, P. H., et al. Platelets orchestrate remote tissue damage after mesenteric ischemia-reperfusion. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 302, G888-G897 (2012).
  25. Rehrig, S., et al. Complement inhibitor, complement receptor 1-related gene/protein y-Ig attenuates intestinal damage after the onset of mesenteric ischemia/reperfusion injury in mice. J. Immunol. 167, 5921-5927 (2001).
  26. Hoffman, S. M., Wang, H., Pope, M. R., Fleming, S. D. Helicobacter infection alters MyD88 and Trif signalling in response to intestinal ischaemia-reperfusion. Exp Physiol. 96, 104-113 (2011).
  27. Moses, T., Wagner, L., Fleming, S. D. TLR4-mediated Cox-2 expression increases intestinal ischemia/reperfusion-induced damage. J Leukoc Biol. 86, 971-980 (2009).
  28. Feinman, R., et al. HIF-1 mediates pathogenic inflammatory responses to intestinal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 299, G833-G843 (2010).
  29. Lapchak, P. H., et al. The role of platelet factor 4 in local and remote tissue damage in a mouse model of mesenteric ischemia/reperfusion injury. PloS one. 7, e39934(2012).
  30. Wen, S. H., et al. Ischemic postconditioning during reperfusion attenuates intestinal injury and mucosal cell apoptosis by inhibiting JAK/STAT signaling activation. Shock. 38, 411-419 (2012).
  31. Wang, F., et al. Temporal variations of the ileal microbiota in intestinal ischemia and reperfusion. Shock. 39, 96-103 (2013).
  32. Zou, L., Attuwaybi, B., Kone, B. C. Effects of NF-kappa B inhibition on mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 284, G713-G721 (2003).
  33. Hassoun, H. T., et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone protects against mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 282, G1059-G1068 (2002).
  34. Stallion, A., et al. Ischemia/reperfusion: a clinically relevant model of intestinal injury yielding systemic inflammation. J Pediatr Surg. 40, 470-477 (2005).
  35. Blikslager, A. T., Roberts, M. C., Rhoads, J. M., Argenzio, R. A. Is reperfusion injury an important cause of mucosal damage after porcine intestinal ischemia? Surgery. 121, 526-534 (1997).
  36. Barker, N., et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5. Nature. 449, 1003-1007 (2007).
  37. Victoni, T., et al. Local and remote tissue injury upon intestinal ischemia and reperfusion depends on the TLR/MyD88 signaling pathway. Med Microbiol Immunol. 199, 35-42 (2010).
  38. Watanabe, T., et al. Toll-like receptor 2 mediates ischemia-reperfusion injury of the small intestine in adult mice. PloS one. 9, e110441(2014).
  39. Pope, M. R., Fleming, S. D. TLR2 modulates antibodies required for intestinal ischemia/reperfusion-induced damage and inflammation. J. Immunol. 194, 1190-1198 (2015).
  40. Leung, F. W., Su, K. C., Passaro, E. Jr, Guth, P. H. Regional differences in gut blood flow and mucosal damage in response to ischemia and reperfusion. Am J Physiol. 263, G301-G305 (1992).
  41. Chiu, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal. Arch Surg. 101, 478-483 (1970).
  42. Quaedackers, J. S., et al. An evaluation of methods for grading histologic injury following ischemia/reperfusion of the small bowel. Transplant Proc. 32, 1307-1310 (2000).
  43. Bianciardi, P., Scorza, R., Ghilardi, G., Samaja, M. Xanthine oxido-reductase activity in ischemic human and rat intestine. Free Radic Res. 38, 919-925 (2004).
  44. Yandza, T., et al. The pig as a preclinical model for intestinal ischemia-reperfusion and transplantation studies. J Surg Res. 178, 807-819 (2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Süperior Mezenterik ArterMikrovasküler KliplerHistolojik AnalizHematoksilin Eozin BoyamaSwiss Roll TekniğiTNF Alfa EkspresyonuIL-1 BetaIL-6Cxcl2 Kemokini
Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.