Geliştirilmiş Hücre yapışma Politetrafloroetilen Islak Kimya ve Peptit İmmobilizasyonu

Summary

Hücre yapışkanlığı, biyomalzeme araştırmaları ve doku mühendisliğindeki birçok yaklaşımın anahtarıdır. Peptitler ile önemli polimer PTFE'nin yüzey modifikasyonu için ıslak kimya kullanılarak adım adım bir teknik sunulmaktadır.

Abstract

malzemeler hücre yapışma özelliklerine sahip yüzey endowing biyomalzeme araştırma ve doku mühendisliğinde yaygın bir stratejidir. Bu durum, bu maddeler de önlenebilir yeni sentezlenmiş polimerlerden tanıtımı ile bağlantılı özelliği ve yasal sorunlar nedeniyle tıpta uzun süreli kullanımı vardır önceden onaylanmış bir polimer için özellikle ilgi çekicidir. Politetrafloroetilen (PTFE), vasküler greft üretimi için en sık kullanılan malzeme biri ama polimerin özelliklerini teşvik hücre yapışmasını yoksundur. Endotelizasyon örneğin, endotel hücrelerinin konfluent tabakası ile greft iç yüzeyi tam kapsamı esas olarak yapay bir arayüz trombojenisitesini azaltmak suretiyle, en iyi performans için anahtar kabul edilir.

Bu çalışma, peptit ile modifiye edilmiş PTFE üzerinde endotelyal hücrelerin büyümesini incelenmiş ve modifiye edilmemiş alt tabaka üzerine elde edilen bu sonuçlar karşılaştırır. ile Kavramaendotelyal hücre yapışma peptid Arg-Glu-Asp-Val (REDV) daha sonra konjügasyon adımları, ardından reaktif sodyum naftalenid ile fluorin-içeren polimerin aktivasyonu yoluyla gerçekleştirilir. Hücre kültürü, bir, iki haftalık bir süre boyunca gösterilmiştir peptid hareketsizleştirilmiş malzeme İnsan Umbilikal Ven Endotelyal Hücreleri (HUVECs) ve mükemmel hücresel büyüme kullanılarak gerçekleştirilir.

Introduction

Yani gelişmiş biyouyumluluk, hücre yapışma eksikliği, fibrotik kapsülleme ve trombojenitesine uyarılmasını göstermezler süredir onaylanan tıpta kullanılan çeşitli polimerler, birkaç söz. biyo ve biyolojik sistemi arasındaki etkileşimler özellikle implantın yüzeyinde yer alır. Bunun bir sonucu olarak, araştırma etkilenmez malzemenin yığın özelliklerini bırakarak istenilen uygulama için uygun özellikleri oluşturmak için yüzey değişimi üzerine odaklanmıştır. Fizyolojik olarak inert bir polimer olarak politetrafloroetilen (PTFE) gibi fıtığı cerrahi mesh ^1, ve en önemlisi, tıbbi bağlantı noktaları ² ve, vasküler greftler ³ gibi bi....

Protocol

Sodyum naftalinid Aktive Çözüm ve Yüzey Aktivasyon 1. hazırlanması

Not: iyi havalandırılan bir davlumbaz tepkilere yürütmek. yüksek derecede yanıcı çözücüler ve metalik sodyum gibi aşındırıcı metallerin işlemek için genel kurallara uyun. Naftalin Çok az miktarlarda dahi çok hoş olmayan bir koku (mothball), var! aksi belirtilmedikçe reaksiyonlar, oda sıcaklığında gerçekleştirilir. Sodyum azid son derece zehirlidir! THF moleküler elek (hacim olarak) üzerinde yaklaşık% 20 muhafaza edildi (% 99.9, Malzeme listesine bakınız). sodyum üzerinde gözle görülür bir su içeriği ile THF damıtmak. su eser miktarlarda mevcut olması durumunda, sodyum naftal....

Results

Önemli kimyasal reaksiyon adımlarının sonuçlar IR spektroskopisi (Şekil 1) ile izlendi. sodyum naftalenid ile ilk aktivasyon çift bağları oluşturur - ve küçük bir ölçüde - OH-işlevleri. Sinyal gösteren C = C bağının hemen hemen tamamen, hidroksil grubu taşıyan bir yüzey verecek şekilde oksidasyon ortadan kalkar. Daha fazla standart konjugasyon adımların analizi burada gösterilmemiştir. Aktivasyonu ve oksidasyona bağlı renk değişiklikleri kullanılan beklenen kimya ile uyu.......

Discussion

PTFE yüzey modifikasyonu protokolünün ayrıntılı açıklaması Şekil 6'da gösterildiği gibi, polimer omurgasından flor ortadan kaldırılması ile başlayarak ardışık adımlardan oluşur. Bunun bir sonucu olarak, bir katman konjuge karbon-karbon çift bağlarının bol miktarda içerir, meydana gelen naftalenid tedavisi üzerine geliştirilen koyu kahverengimsi renk ile uyum. Asidik hidrojen peroksit ile standart oksidasyon soluk kahverengi aydınlatıcı eşliğinde hidroksile yüzey, bu çift bağların kaybı yansıtmaktadı.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
PTFE folyo 0,5 mm	Cadillac Plastik	n/a
REDV peptit	Genecust	n/a	özel sentez >%95 saflıkta
izo-propanol	Sigma Aldrich	34965
tetrahidrofuran (THF)	Sigma Aldrich	401757
dimetilsülfoksit	Sigma Aldrich	D8418
moleküler elek 3 &	Sigma Aldrich	208574
sodyum metali	Sigma Aldrich	483745
fosfat tamponlu salin (PBS)	Sigma Aldrich	D8537
naftalin	Sigma Aldrich	147141
hidrojen peroksit% 30	Sigma Aldrich	95321
trikloroasetik asit	Sigma Aldrich	T6399 ve nbsp;
dietilen glikol diglisidil eter	Sigma Aldrich	17741
heksametilen diizosiyanat (HMDI)	Sigma Aldrich	52650
Calcein-	Sigma Aldrich	56496
sodyum bikarbonat	Sigma Aldrich	S6014
sodyum azid	Sigma Aldrich	71290
24 kuyulu plakalar	Greiner-Bio-One	662 160
ATR-FTIR spektrofotometre Nicolet Magna-IR 850	Nicolet	n/a
floresan mikroskobu Olympus X-70	Olympus	n/a
humbilikal ven endotel hücreleri (HUVEC'ler)	Lonza	n/a
ePTFE vasküler greft	Gore	n/a