Yöntem makalesi

Hastalık Teşhis için Taşınabilir Görüntüleme ve Analiz ile birleştiğinde Manyetik Levitasyonunun

DOI:

10.3791/55012

⸱

19 Şubat 2017

 ,  ,  , 
1Biomedical Engineering Department, University of Connecticut, 2Mechanical Engineering Department, University of Connecticut

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hem akıllı telefon uyumlu bir cihazda hem de gömülü görüntüleme ve işlemeye sahip bir cihazda otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştirilmiş bir manyetik kaldırma tekniği sunuyoruz. Bu, kanıtlanmış iki biyomedikal uygulama ile hücrelerin yoğunluk dağılımını ölçmek için uygulanır: orak hücre hastalığı teşhisi ve beyaz ve kırmızı kan hücrelerinin ayrılması.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Şu anda, birçok klinik tanı prosedürü karmaşık, maliyetli, verimsiz ve dünyadaki büyük bir popülasyon için erişilemez. Özel ekipman ve eğitimli personel gereksinimleri, birçok tanı testinin uzaktan, merkezi klinik laboratuvarlarda yapılmasını gerektirir. Manyetik levitasyon basit ama güçlü bir tekniktir ve paramanyetik bir çözelti içinde süspanse edilen ve manyetik bir alana yerleştirilen hücrelere, manyetik bir kuvvet ile bir kaldırma kuvveti arasındaki denge ile belirlenen bir konumda uygulanabilir. Burada, yararlı bir tanı göstergesi olarak bir hastanın hücrelerinin yoğunluk dağılımını belirlemek için mikroskobik görüntüleme ve otomatik analize bağlı manyetik levitasyon kullanan, bakım noktası teşhisi için tasarlanmış çok yönlü bir platform teknolojisi sunuyoruz. Bu prensibe göre çalışan iki platform sunuyoruz: (i) yerleşik akıllı telefon kamerasının manyetik alandaki hücreleri görüntülemek için kullanıldığı ve bir akıllı telefon uygulamasının görüntüleri işlediği ve hücrelerin yoğunluk dağılımını ölçtüğü teknolojinin akıllı telefon uyumlu bir versiyonu ve (ii) görüntüleri yakalamak için bir kamera kartının kullanıldığı ve bağlı ince film transistörlü (TFT) ekranlı gömülü bir işlem biriminin sonuçları ölçtüğü ve görüntülediği bağımsız bir versiyon. Gösterilen uygulamalar şunları içerir: (i) orak hücre hastalığı teşhisine uygulanan sağlıklı bir fenotipe kıyasla bir hastalık fenotipine sahip bir hücre popülasyonunun değişen dağılımının ölçülmesi ve (ii) beyaz kan hücresi sitometrisi için beyaz kan hücrelerini kırmızı kan hücrelerinden ayırmak için uygulanan karakteristik yoğunluklarına göre farklı hücre tiplerinin ayrılması. Bu uygulamaların yanı sıra bu taşınabilir, kullanıcı dostu platform teknolojisi tarafından sağlanan temel yoğunluğa dayalı ölçümlerin gelecekteki uzantıları, bakım noktasında hastalık teşhis yeteneklerini önemli ölçüde artıracaktır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, bir teknoloji platformu ve hastalık için bir gösterge olarak hastanın hücrelerinin yoğunluğu dağılımını analiz için otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştiğinde manyetik kaldırma kullanan bir teknik sunuyoruz. yoğunluk tabanlı sitometri analizi için bu çok yönlü yaklaşım sonuçta hastalık teşhis bir dizi uygulanabilir. Ancak, sırayla nokta-bakım testi ile uyumlu olacak şekilde ve gelişmekte olan ülkelerde kullanmak, teknik düşük maliyet, taşınabilirlik ve kullanılabilirlik şartını yerine getirmelidir. Cihaz ve sarf malzemeleri kolayca düşük maliyetle elde edilmelidir. numune hazırlama, basit olmalı, analiz kullanıcı girişi veya yorumlanması için asgari gereksinimleri ile otomatik olmalıdır ve sonuçları hızlı bir şekilde iade edilmelidir. Bundan başka, cihaz klinik hem de gelişmekte olan ülkelerde yararlı olduğu kompakt ve taşınabilir olmalıdır. Böylece, nokta-bakım uyumlu technol manyetik olarak kaldırılmasının kullanmak için bir cihaz ve metod geliştirdikbağlantı otomatik görüntüleme ve görüntü analizi ile ogy hastanın hücrelerinin bir nüfus yoğunluğu dağılımı ile ilgili sonuçları döndürmek için.

Nokta-bakım teknolojileri mevcut klinik laboratuvar test prosedürleri üzerinde kayda değer bir avantaj sunuyoruz. mevcut teknoloji bir klinisyen tarafından sahip olunan çok pahalı ya da sağlık personeli tarafından yürütülecek çok karmaşık. Bu işlemlerin çoğu eğitimli bir teknisyen tarafından yapılmalıdır emek-yoğun protokolleri gerektirir. Bu nedenlerle, bu tür kan veya idrar gibi hasta numuneleri genellikle testin sonuçlarını almak için doktor birkaç gün sürebilir klinik test için bir uzaktan, merkezi test laboratuarı, transfer doktorun ofisinde toplanır. Bu (sigorta ödeyenler üzerinde bir mali yük neden) Bu test çok pahalı ve verimsiz hale getirir, bazı durumlarda tedavi sırasında gecikmelere veya komplikasyonlara neden, ve daha fazla sayıda kılardüşük kaynak ayarları ve gelişmekte olan ülkelerde erişilemez teşhis.

Burada, gömülü görüntüleme ve işleme (Şekil 1) ve akıllı telefon-uyumlu bir cihaza (Şekil 2) ile bir cihaz hem de otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştiğinde bir manyetik kaldırma tekniği sunuyoruz. Bu manyetik kaldırma tabanlı aygıtlar potansiyele sahip bir geniş uygulanabilir platform teknolojisi farklı tıbbi teşhis uygulamaları bir dizi uygulanacak temsil etmektedir. Manyetik kuvvet ve kaldırma kuvveti, 1, 2, 3: iki kuvvet arasında bir denge göre bir manyetik kaldırma yaklaşımı çalışır. bir tanecik, bir paramanyetik bir ortam içinde süspansiyon haline getirilmiş ve iki Magn arasındaki merkez hattına doğru yönde parçacık bir manyetik kuvvet etki, birbirine bakan kutbu olan iki mıknatıs tarafından üretilen manyetik alana yerleştirildiğinde ets. kaldırma kuvveti süspansiyon ortamı ile karşılaştırıldığında partikül bağıl yoğunluk neden olur ve, çevreleyen ortamda daha yoğun parçacıklar halinde az orta daha yoğun ve aşağı doğru parçacık halinde yukarı doğru olan almaktadır. Bu iki gücün dayanarak, parçacıklar bu iki kuvvetleri dengeleyen alanında bir denge kaldırma pozisyonu ulaşacak; Bu pozisyon, doğrudan daha az yoğun parçacıklar daha alanında düşük levitating yoğun parçacıklar parçacık yoğunluğu ile ilgilidir. Bir görüntüleme modülü ya yerleşik bir akıllı telefon makinesi 4, 5, 6 ya da büyütme merceğinin 7, 8 ile donatılmış bağımsız optik bileşenlerin, parçacık pozisyonları görselleştirmek için kullanılmaktadır. Görüntü işleme, ya bir akıllı telefon uygulaması ile 4, 5,= "xref"> 6 veya dahili bir veri işleme ünitesi 7, 8, daha sonra, bu nedenle, nüfus yoğunluğu dağılımı dağılımını ölçmek ve çekilen görüntülerin işler. Bu mililitre başına ilgi sadece birkaç partiküllerle gibi daha büyük bir numune (analiz etmek için, akışı, parçacıklar olarak kaldırılan doğrudan cihazın içine entegre edilmiş ve görüntüleme bölgesi boyunca (Şekil 2) geçerken analiz edilebilir.

figure-introduction-1
Şekil 1: Kendi kendine yeten Manyetik Levitasyonunun Platformu. (A) bir görüntü ekranı olan bir manyetik odaklama modülü, görüntüleme bileşenleri (bir ışık yayan diyot (LED), bir optik mercek ve bir kamera detektörü) ve bir işlem ünitesi içeren kompakt bir manyetik kaldırma cihazı. (B) cro Manyetik alan şiddetiNumune eklenir mıknatıslar arasındaki alanın ss bölüm. alan gücü mıknatıslar yüzeyinde büyük olan ve aralarında merkez de sıfırdır. (C) Parçacıklar, örneğin hücreler gibi, manyetik alan deneyimi çeşitli kuvvetler içinde: manyetikler arasında merkez doğru manyetik kuvvet (F m), büyüklüğü ile parçacığın pozisyonuna göre değişen; süspanse edici ortam o göreceli parçacık yoğunluğuna bağlıdır yerçekimi kuvveti (F g ') ve partikül hareketi direnen bir sürtünme kuvveti (F d). Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 8 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

figure-introduction-2
incirure 2: Smartphone uyumlu Akış destekli Manyetik Levitasyonunun Platformu. (A - c) Ön (a) sırt, yan (b) ve (c) manyetik kaldırma cihazı (d) cihazın bileşenleri şunlardır görüşleri: 1) Manyetik kaldırma modülü, sürekli mıknatıslar, bir büyüteç dahil, ve LED ve ışık difüzörü, bir mikrodenetleyici, pompa sürücü ve Bluetooth alıcısı da dahil olmak üzere 2) akıllı telefon kılıfı, 3) elektronik, 4) mikro pompa tutucu, 5) ayarlanabilir delik, 6) atık tüp tutucu, 7) pil tutucu, 8 ) örnek tutucu, 9) çift amaçlı standı ve kapak. (E) manyetik alan sayesinde numunenin pompalama gösteren şematik akış. (F) alan üzerinden pompalanan farklı yoğunluktaki parçacıklar hale nasıl gösteren manyetik kaldırma modülü, kesiti; daha az gibi Parçacık 1, olarak yoğun parçacıklar, daha yüksek bir kaldırma yüksekliği t dengelenmesi olacakBöyle Parçacık 2. olarak han yoğun parçacıklar, vd Amin, gelen izni ile, çoğaltılmıştır. 1 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Bu sistemde yoğunluk dağılım analizi için herhangi bir numunenin kullanılması için asgari gereksinimler hücreleri ya da yaklaşık olarak 5 um'den daha büyük ve yaklaşık 250 um (görüntüleme ve görüntü işleme için) boyutu daha düşük parçacıklar ve onun uyumluluğu bir süspansiyonunu elde etmek için yeteneği, burada kullanılan gadobutrol gibi para-manyetik bir solüsyon çözelti içinde karıştırılması. Hastalık teşhis için uyumlu uygulamalar, sağlıklı kontrollere göre bir hastalık taşırken doğal değiştirilmiş bir yoğunluğa sahip olan (I) 'in ilgili hücreler olanlar, (ii) bir yoğunluğa değişikliği bir reaktif ya da eklenmesi ile hücre içinde indüklenebilir içerir kısa bir alternatif tedavicubation süresi, ya da (iii) Farklı hücre tipleri tek bir numunede bulunan tanımlanmış ve doğal (ya da tedavi ile) olan benzersiz özelliklerinden yoğunluklarına sahiptir.

Orak hücre hastalığı aralıklı vazo-tıkayıcı olaylar ve kronik hemolitik anemi 9 neden olabilir bir kişinin kırmızı kan hücrelerinin (RBC) üretilecek olan hemoglobin, HbS, mutasyona uğramış bir biçimini, neden bir genetik bozukluktur. Bu hemoglobin izoelektrik son derece hassas ama onlar nokta-bakım ayarları ile uyumsuz olduğundan klinik test laboratuarı yapılmalıdır, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (HPLC) fraksiyon ya da hemoglobin elektroforezi odaklama kullanılarak teşhis edilir. Orak hücre hastalığı için Çözünürlük ve kağıt bazlı testler önerilmiştir, ancak genellikle sübjektif kullanıcı yorumuna ve doğrulayıcı testler gerektirir edilmiştir. Burada, RB daha yüksek bir yoğunluğa ulaşmak, hangi orak eritrositlerde tanımlamak için bir yoğunluk tabanlı bir yaklaşım kullanırOrak hücre hastalığı olmayan insanlardan Cs. Mekanizma, deoksijene koşulları 10, 11, 12, 13 yaşın altındaki orak hücreli anemi eritrositlerde RBC su kaybına yol açar hemoglobin, HbS mutasyona uğramış formu polimerizasyonunu içerir.

Beyaz kan hücreleri (lökosit) ve eritrosit 7: Bu yoğunluğa dayalı yaklaşım yoğunluğu temelinde farklı türde hücrelerin ayrılması için uygulanabilir. Lökosit genel yapısına enfeksiyonları mücadele sorumludur. WBC sitometri kanda bu hücrelerin sayısını ölçmek için kullanılan ve yararlı bir tanı aracı olarak hizmet vermektedir edilebilir. WBC enfeksiyonu, bağışıklık sistemi bozuklukları, ya da lösemi gösterebilir (genellikle mcL başına daha fazla 11.000 hücreleri kabul edilir) normalden yüksek sayar. WBC normal altındaki hesaplar (uL başına 3.500 hücre), otoimmün bozukluklar veya iklimlendirme kaynaklanabiliriyonları zarar veren kemik iliği. alternatif teknolojilerin aksine, burada sunulan işlem lökosit belirlenmesi amacıyla eritrositlerde veya lekeler parçalanması dayanmaz. WBC popülasyon yoğunluğu yoğunluk gradyan santrifüj 2, 3 ile daha önceden hesaplanan RBC nüfustan daha düşük olduğu rapor edilmiştir gibi bu hücre bazlı deney, ayırma işlemi için iki hücre türünün tek doğal yoğunlukları yararlanır.

1 dakikadan daha az gerektiren, 15 dakika ve otomatik görüntüleme ve analiz - uzak konumlarda değiştirici test ile karşılaştırıldığında, bu test, basit numune hazırlama (Şekil 3), 10 içindeki cihazda hücrelerinin ayrılması ile hızlıdır. Bu sayede, cihaz daha iyi, tıbbi kararlarını bildirmek tedavi fiziksel ve psikolojik acı hafifletmek için hemen tatbik izin ve komplikasyonlar derneğimizi riskini azaltmak için hızla sonuçları dönebilirsiniztıbbi bakım bir gecikme ile bir-. Bu teknik sayesinde minimum kullanıcı girişi veya yorumlanması ile bir sonuç döndürür basit örnek hazırlama ve otomatik görüntüleme ve analiz için yerinde klinik ortamlarda ya yapılabilir. Çünkü kalıcı numune analizi için mıknatıslar ve bir akıllı telefon veya görüntüleme ve görüntü işleme için basit elektrikli bileşenlerin ya kullanımını kullanarak basit bir yaklaşım kullanımı, cihaz yanı sıra her test maliyetleri bazı gelişmiş test prosedürleri ile karşılaştırıldığında çok az.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Etik Açıklama: İnsan kan örnekleri içeren tüm işlemler, kurumsal düzenlemelere göre yapılmıştır. Tüm protokoller gözden ve Kurumsal Değerlendirme Kurulu tarafından onaylanmıştır. Bir bilgilendirilmiş onam tüm katılımcılar tarafından verildi.

Orak Hücre Hastalığı Tanı 5 1. Numune Hazırlama, 8

  1. Hank Dengeli Tuz Çözeltisi (HBSS) içinde gadobutrol bir 50 mM çözelti hazırlayın.
  2. gadolinyum çözelti içinde 10 mM sodyum metabisülfit çözeltisi ile çözülmüştür.
    NOT: Sodyum metabisülfit Solunduğunda toksik ve güçlü deri ve doku tahriş ediyor. Su ile karıştırılmış bir korozif asittir. Yüksek sıcaklığa ısıtıldığında sülfür ve sodyum toksik oksit gazları yayarlar ayrışabilir.
  3. Parmak çubuğu veya Venipunktür ya vasıtasıyla kan örneği almak.
    1. Temiz, tek kullanımlık neşter ile bir delme cihazı kullanarak kan çizin. Apkat deldi sitede yakın basınç ve üç ya da dört kez pipet kullanarak kan toplama önce oluşmuş kan damlacık silin; bakmak değil, bu doku sıvısıyla numunenin kirlenmesine neden olacak gibi, doku sıkarak "süt" parmak için.
    2. Alternatif olarak, standart vene girme prosedürleri 14 kullanılarak kan çizin.
      NOT: Numuneler bir kaç saatten fazla depolanacak ise, EDTA gibi bir antikoagülan olan bir vacutainer içine kan toplamak.
  4. gadolinyum sodyum metabisülfit çözeltisi 100 ul kan az 1 uL ekleyin.

WBC Sitometri 7 2. Numune Hazırlama

  1. bölüm 1 deki gibi, Parmak çubuğu veya Venipunktür ya vasıtasıyla kan örneği almak.
  2. İsteğe bağlı: Bir RBC parçalama tamponu ile Lyse RBCs. Pipet 5 RBC parçalama tamponu 500 uL kanın uL ve 3 için oda sıcaklığında inkübe - 5 dak.
    NOT:Bu lökosit izole bir nüfus kaldırma aralığını doğrulamak için yapılabilir. Burada sunulan sonuçlar, eritrositler lökositlerden daha belirgin bir alt konumda havaya göstermektedir Ancak, bu adımı gerçekleştirmek için gerekli değildir.
  3. HBSS 25 mM Gd 1000: tam kan 1 seyreltin
    Not: 1 lize Örnek: 250 mM Gd 25 mM Gd içeren bir örnek elde etmek için, hücre liziz uygulandı eğer lize örnek 9 seyreltin.

Manyetik Levitasyonunun Platformu 4, 5, 6, 7, 8 Kullanılması Örneklerin 3. Analiz

  1. Manyetik kaldırma cihazı başlatın:
    1. kendi kendine yeten bir cihaz için, cihazın fişi o kadar güç sağlayacak ve düz bir yüzey üzerine yerleştirin.
    2. Akıllı telefon uyumlu sürümü için, akıllı telefon uygulamasını başlatmak ve görüntü girmek için sola kaydırındüz bir yüzeyde çekim modu, ve yer.
  2. Statik manyetik havalanma için:
    1. çözeltisi içine sonuna daldırma ve kılcal eylem yoluyla kılcal doldurmak için örnek vererek bir kare cam microcapillary tüpüne hazırlanmış örnek yükleyin.
    2. Yavaş yavaş bir ucunu malzemenin içine kılcal iterek bir tüp dolgu ile sonuna mühür.
    3. Tüp sadece 1 cm görünür kalır ve böylece manyetik kaldırma cihazının mıknatıslar arasındaki kılcal yerleştirin (bir örnek numune hazırlama için Şekil 3 bakınız).
      Not: Bu adım akıllı telefon uyumlu ve kendi kendine yeten cihazın her ikisi için de aynı kalır.
    4. Cihazı veya kılcal bozmadan 10 dakika bekleyin.
  3. Akış destekli manyetik havalanma için:
    1. Numune tüpüne örnek yükleyin.
    2. Numune kabı ve mi arasındaki giriş hortumunu bağlayıncrocapillary ve mikro-kılcal ve atık kabı arasında çıkış hortumunu bağlayın.
    3. LED yoğunluğu ve akış parametreleri ayarlayın.
  4. Daha sonra (kendi kendine yeten cihaz ve akıllı telefon uygulamasında ekranın alt kısmındaki kamera düğmesi düğmesini 3) bir görüntü yakalamak için yakalama düğmesine basın, hücreler görüş alanında görünür olduğundan emin olun.
    NOT: USB görüntüleri saklamak için kullanılırsa, "görüntüler" adında bir klasör oluşturun ve önceki cihaza açmadan USB takın. hiçbir sürücü varsa, cihaz dahili bellekteki görüntüleri depolamak ve daha sonra transfer olacak.
    NOT: Bazı görüntüler yakalanır ve görüntü yakalama arasındaki ½ cm hakkında içinde veya dışında kılcal hareket ettirerek anomalilerin riskini azaltmak için analiz edilebilir.
    NOT: (algılanır ve kullanıcı arayüzünde belirtildiği gibi) görüş alanı içinde hücre sayısı çok yüksek veya çok düşük ise, cihazın içinde veya dışında kılcal kaydırmaya veya başka bir sa hazırlamakmple.
  5. örnek çıkarın ve kurumsal veya yerel yönetmeliklere göre örnek atın. Kılcal damarların keskin olarak bertaraf edilmelidir.

figure-protocol-1
Şekil 3: Hazırlık ve Kullanıcı Arabirimi Örnek. (A) örnek hazırlama yöntemi, öznenin parmak neşter kan damlası oluşturularak, örnek test çözeltisine bir kan damlası aktarılması, örnek çalkalanması ve kılcal hareket aracılığı ile bir kılcal boru içine yüklenmesi ve bir manyetik kaldırma içine örnek yerleştirilmesini içerir cihaz. (B) Bu numune hazırlama adımları da numune hazırlama rehberlik cihazın ekranında görüntülenir. (C) Cihaz dört düğme içerir: düzgün ayar düğmesini kullanarak odağı ayarlamak amacıyla numune görüntü içine yakınlaştırmak için bir düğme; Bir düğme tek m elde etmek içineasurement (bir 5 s gecikme örneği eklemek için kullanıcı için zaman tanımak için uygulanmaktadır); time-lapse ölçümü (6 görüntü 5 s aralıklarla alınır); ve bir düğme kullanımdan sonra cihazı kapatmak için. Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 8 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

4. Görüntü Analizi 4, 5, 6, 7, 8

  1. Uygun numune (hücre dağılımı veya hücre tipi ayırma) için cihaz üzerinde bulunan görüntü analiz yazılımı çalıştırın.
    NOT: kendi kendine yeten cihaz için, analiz otomatik olarak gerçekleştirilir ve grafik kullanıcı arayüzü görüntülenir. Akıllı telefon uyumlu cihaz için, analiz yapmak, galeri a gidinistediğiniz video dosyasını seçin nd analiz edilecek.
  2. Gözlemlemek ve analiz çıktısı ekranda görüntülenen kaydedin.
    NOT: (örneğin orak hücre hastalığı teşhisi gibi) hücre dağılımı analizi için, çıkış hücresi nüfusun hapsi genişliği olacaktır.
    NOT: (örneğin WBC kimlik gibi) hücre tipi ayrılması için, çıkış tespit WBC nüfusa sahip bir görüntü olacaktır. mikrolitre başına hücre sayısını hesaplamak için, 2,000 faktörü ile görüntü başına lökosit ortalama sayısını çarpın. 5 lökosit gözlenmiştir Örneğin, bu / ml 10.000 lökosit işaret eder. / UL 11,000 lökosit - normal aralık genellikle 3500 olarak kabul edilir.
  3. veya ½ cm hakkında cihazın dışına numune tüpü hareketli ve yukarıda anlatıldığı gibi analiz edilecek başka bir görüntü yakalama analizler tekrarlayın.
    NOT: analizi 5 tekrarlamak için tavsiye edilir - hatalarını önlemek için numune başına 6 kez.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

orak hücre hastalığı tanısı için kullanılan bir tekniktir hücre yoğunluğu dağılımı analizi için, hedef hücre popülasyonunun dağılımının genişliği tespit etmektir. orak hücre hastalığı olmayan hastalardan alınan kan hücreleri öngörülebilir bir genişlik içinde sınırlı olacaktır. Orak hücre hastalığı olan hastalardan alınan hücreler hücre dağılımı bir düşüş eğikliği, daha geniş bir bölgesi boyunca dağıtılacak herhangi bir uygulama için (Şekil 4'e bakınız), bir eşik, sağlıkl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokol çerçevesinde kritik adımlar
Bu süreçte kritik faktörler mıknatıslar düzgün hizalama içerir. mıknatıslar yerinden hale veya cihaz içinde normalden daha fazla ayrılmış, bu sonuçları etkileyebilir. İşlemin bu hata veya diğer kontrol etmek için, bir yoğunluk kontrol edilen bir parçacık, örneğin polistiren mikro-küreler olarak, zaman içinde değişim kontrol etmek için periyodik olarak kullanılabilir. Dahası, kaldırma zamanı hücreleri dengeye ulaşması için izin vermek önemlidir. kırmızı kan hücreleri için, 10 d...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar Stephanie Knowlton ve Savaş Taşoğlu, bakım noktası teşhis çözümleri için burada açıklanan manyetik kaldırma platformunu ticarileştirmek için çalışan bir girişim olan mBiotics'in kurucularıdır ve bu girişimde hisse senedine sahiptirler. Burada açıklanan teknolojiyle ilgili olarak UCONN Dava No. 16-027 ile "Yoğunluğa Dayalı Ayırma, Tanımlama ve Ölçüm için Yerleşik Optik Görüntüleme ve Görüntü Analizi ile Manyetik Kaldırma" başlıklı geçici bir patent dosyalanmıştır.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, orak hücreli hasta örnekleri sağladıkları için Boston Çocuk Hastanesi/Dana-Farber Kanser Enstitüsü'nden Dr. Matthew Heeney'e ve Yale-New Haven Hastanesi'nden Dr. Farzana Pashankar'a teşekkür eder. Yazarlar, bu örneklerin test edilmesindeki ve verilerin derlenmesindeki yardımları için Chu H. Yu ve Ashwini Joshi'ye teşekkür eder.

ST, bu araştırmanın finansal desteği için Amerikan Kalp Derneği Bilim İnsanı Geliştirme Hibesi'ne (15SDG25080056) ve Connecticut Üniversitesi Araştırma Mükemmeliyet Programı ödülüne teşekkür eder. SK, bu materyalin Ulusal Bilim Vakfı Lisansüstü Araştırma Bursu (DGE-1247393) tarafından desteklenen çalışmalara dayandığını kabul eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Gadavist (Bayer)Jefferson Medical and Imaging2068062Gadavist, bir gadolinyum şelatı olan 1M gadobutrol içerir. 15 / ca ile 2 ml şişe satın aldık.
Kare cam mikrokılcal tüplerVitrocom827050 mm uzunluk yeterlidir
Sodyum metabisülfitSigma-AldrichS9000Kimyasal formül: Na2< / sub>S2< / sub>O5< / sub>
Leica Microsystems Critoseal tüp sızdırmazlık maddesiFisher Scientific02-676-20
Hank'in Dengeli Tuz ÇözeltisiSigma-AldrichH9269  SIGMA
Tripsin-EDTASigma-AldrichT4049Veya kullanılan hücre tipi için önerilen başka bir reaktif
MICROLET 2 Ayarlanabilir Delme CihazıWalgreens246567Biyogüvenlik protokollerine göre kullanıldığında herhangi bir delme cihazı kabul edilebilir Microlet
LancetsWalgreens667474Tek kullanımlık olmalı ve tekrar kullanılmamalıdır
Hausser Parlak Çizgi Fazlı HemasitometreFisher Scientific02-671-6Veya hücre sayımı için tercih edilen herhangi bir yöntem
ACK Lysing BufferThermoFisherA1049201 

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tasoglu, S., Khoory, J., Tekin, H., Thomas, C., Karnoub, A., Ghiran, I., Demirci, U. Levitational Image Cytometry with Temporal Resolution. Advanced Materials. 27 (26), 3901-3908 (2015).
  2. Tasoglu, S., Yu, C. H., Liadudanskaya, V., Guven, S., Migliaresi, C., Demirci, U. Magnetic Levitational Assembly for Living Material Fabrication. Advanced Healthcare Materials. 4 (10), 1469-1476 (2015).
  3. Tasoglu, S., Yu, C. H., Gungordu, H. I., Guven, S., Vural, T., Demirci, U. Guided and magnetic self-assembly of magnetoceptive gels. Nature Communications. 5, 4702(2014).
  4. Amin, R., Knowlton, S., Yenilmez, B., Hart, A., Joshi, A., Tasoglu, S. Smart-phone Attachable, Flow-Assisted Magnetic Focusing Device. RSC Advances. 6, 93922-93931 (2016).
  5. Knowlton, S. M., Sencan, I., Aytar, Y., Khoory, J., Heeney, M. M., Ghiran, I. C., Tasoglu, S. Sickle Cell Detection Using a Smartphone. Sci Rep. 5, 15022(2015).
  6. Knowlton, S., Yu, C. H., Jain, N., Ghiran, I. C., Tasoglu, S. Smart-Phone Based Magnetic Levitation for Measuring Densities. PLoS One. 10 (8), e0134400(2015).
  7. Yenilmez, B., Knowlton, S., Tasoglu, S. Self-Contained Handheld Magnetic Platform for Point of Care Cytometry in Biological Samples . Advanced Materials Technologies. 1, 1600144(2016).
  8. Yenilmez, B., Knowlton, S., Yu, C. H., Heeney, M., Tasoglu, S. Label-Free Sickle Cell Disease Diagnosis Using a Low-Cost, Handheld Platform. Adv Mat Tech. 1 (5), 1600100(2016).
  9. Bender, M. A., Douthitt Seibel, G., et al. GeneReviews. Pagon, R. A. , University of Washington. Seattle, Seattle, WA. (1993).
  10. Kaul, D. K., Fabry, M. E., Windisch, P., Baez, S., Nagel, R. L. Erythrocytes in sickle cell anemia are heterogeneous in their rheological and hemodynamic characteristics. J Clin Invest. 72 (1), 22-31 (1983).
  11. Joiner, C. H. Gardos pathway to sickle cell therapies? Blood. 111 (8), 3918-3919 (2008).
  12. Finch, J. T., Perutz, M. F., Bertles, J. F., Döbler, J. Structure of Sickled Erythrocytes and of Sickle-Cell Hemoglobin Fibers. Proc Natl Acad Sci. 70 (3), 718-722 (1973).
  13. Lew, V. L., Etzion, Z., Bookchin, R. M. Dehydration response of sickle cells to sickling-induced Ca(++) permeabilization. Blood. 99 (7), 2578-2585 (2002).
  14. Ernst, D. J. NCCLS Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture: Approved Standard-Sixth Addition. 27 (26), (2007).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

H cre Yo unlu u AnaliziHasta Ba Tan KitleriOrak H creli AnemiBeyaz Kan H cresi SitometrisiAk ll Telefon UygulamasKapiler T pGadobutrol zeltisiKan rne i Haz rlama

İlgili makaleler