RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Research Article
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Hem akıllı telefon uyumlu bir cihazda hem de gömülü görüntüleme ve işlemeye sahip bir cihazda otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştirilmiş bir manyetik kaldırma tekniği sunuyoruz. Bu, kanıtlanmış iki biyomedikal uygulama ile hücrelerin yoğunluk dağılımını ölçmek için uygulanır: orak hücre hastalığı teşhisi ve beyaz ve kırmızı kan hücrelerinin ayrılması.
Şu anda, birçok klinik tanı prosedürü karmaşık, maliyetli, verimsiz ve dünyadaki büyük bir popülasyon için erişilemez. Özel ekipman ve eğitimli personel gereksinimleri, birçok tanı testinin uzaktan, merkezi klinik laboratuvarlarda yapılmasını gerektirir. Manyetik levitasyon basit ama güçlü bir tekniktir ve paramanyetik bir çözelti içinde süspanse edilen ve manyetik bir alana yerleştirilen hücrelere, manyetik bir kuvvet ile bir kaldırma kuvveti arasındaki denge ile belirlenen bir konumda uygulanabilir. Burada, yararlı bir tanı göstergesi olarak bir hastanın hücrelerinin yoğunluk dağılımını belirlemek için mikroskobik görüntüleme ve otomatik analize bağlı manyetik levitasyon kullanan, bakım noktası teşhisi için tasarlanmış çok yönlü bir platform teknolojisi sunuyoruz. Bu prensibe göre çalışan iki platform sunuyoruz: (i) yerleşik akıllı telefon kamerasının manyetik alandaki hücreleri görüntülemek için kullanıldığı ve bir akıllı telefon uygulamasının görüntüleri işlediği ve hücrelerin yoğunluk dağılımını ölçtüğü teknolojinin akıllı telefon uyumlu bir versiyonu ve (ii) görüntüleri yakalamak için bir kamera kartının kullanıldığı ve bağlı ince film transistörlü (TFT) ekranlı gömülü bir işlem biriminin sonuçları ölçtüğü ve görüntülediği bağımsız bir versiyon. Gösterilen uygulamalar şunları içerir: (i) orak hücre hastalığı teşhisine uygulanan sağlıklı bir fenotipe kıyasla bir hastalık fenotipine sahip bir hücre popülasyonunun değişen dağılımının ölçülmesi ve (ii) beyaz kan hücresi sitometrisi için beyaz kan hücrelerini kırmızı kan hücrelerinden ayırmak için uygulanan karakteristik yoğunluklarına göre farklı hücre tiplerinin ayrılması. Bu uygulamaların yanı sıra bu taşınabilir, kullanıcı dostu platform teknolojisi tarafından sağlanan temel yoğunluğa dayalı ölçümlerin gelecekteki uzantıları, bakım noktasında hastalık teşhis yeteneklerini önemli ölçüde artıracaktır.
Burada, bir teknoloji platformu ve hastalık için bir gösterge olarak hastanın hücrelerinin yoğunluğu dağılımını analiz için otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştiğinde manyetik kaldırma kullanan bir teknik sunuyoruz. yoğunluk tabanlı sitometri analizi için bu çok yönlü yaklaşım sonuçta hastalık teşhis bir dizi uygulanabilir. Ancak, sırayla nokta-bakım testi ile uyumlu olacak şekilde ve gelişmekte olan ülkelerde kullanmak, teknik düşük maliyet, taşınabilirlik ve kullanılabilirlik şartını yerine getirmelidir. Cihaz ve sarf malzemeleri kolayca düşük maliyetle elde edilmelidir. numune hazırlama, basit olmalı, analiz kullanıcı girişi veya yorumlanması için asgari gereksinimleri ile otomatik olmalıdır ve sonuçları hızlı bir şekilde iade edilmelidir. Bundan başka, cihaz klinik hem de gelişmekte olan ülkelerde yararlı olduğu kompakt ve taşınabilir olmalıdır. Böylece, nokta-bakım uyumlu technol manyetik olarak kaldırılmasının kullanmak için bir cihaz ve metod geliştirdikbağlantı otomatik görüntüleme ve görüntü analizi ile ogy hastanın hücrelerinin bir nüfus yoğunluğu dağılımı ile ilgili sonuçları döndürmek için.
Nokta-bakım teknolojileri mevcut klinik laboratuvar test prosedürleri üzerinde kayda değer bir avantaj sunuyoruz. mevcut teknoloji bir klinisyen tarafından sahip olunan çok pahalı ya da sağlık personeli tarafından yürütülecek çok karmaşık. Bu işlemlerin çoğu eğitimli bir teknisyen tarafından yapılmalıdır emek-yoğun protokolleri gerektirir. Bu nedenlerle, bu tür kan veya idrar gibi hasta numuneleri genellikle testin sonuçlarını almak için doktor birkaç gün sürebilir klinik test için bir uzaktan, merkezi test laboratuarı, transfer doktorun ofisinde toplanır. Bu (sigorta ödeyenler üzerinde bir mali yük neden) Bu test çok pahalı ve verimsiz hale getirir, bazı durumlarda tedavi sırasında gecikmelere veya komplikasyonlara neden, ve daha fazla sayıda kılardüşük kaynak ayarları ve gelişmekte olan ülkelerde erişilemez teşhis.
Burada, gömülü görüntüleme ve işleme (Şekil 1) ve akıllı telefon-uyumlu bir cihaza (Şekil 2) ile bir cihaz hem de otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştiğinde bir manyetik kaldırma tekniği sunuyoruz. Bu manyetik kaldırma tabanlı aygıtlar potansiyele sahip bir geniş uygulanabilir platform teknolojisi farklı tıbbi teşhis uygulamaları bir dizi uygulanacak temsil etmektedir. Manyetik kuvvet ve kaldırma kuvveti, 1, 2, 3: iki kuvvet arasında bir denge göre bir manyetik kaldırma yaklaşımı çalışır. bir tanecik, bir paramanyetik bir ortam içinde süspansiyon haline getirilmiş ve iki Magn arasındaki merkez hattına doğru yönde parçacık bir manyetik kuvvet etki, birbirine bakan kutbu olan iki mıknatıs tarafından üretilen manyetik alana yerleştirildiğinde ets. kaldırma kuvveti süspansiyon ortamı ile karşılaştırıldığında partikül bağıl yoğunluk neden olur ve, çevreleyen ortamda daha yoğun parçacıklar halinde az orta daha yoğun ve aşağı doğru parçacık halinde yukarı doğru olan almaktadır. Bu iki gücün dayanarak, parçacıklar bu iki kuvvetleri dengeleyen alanında bir denge kaldırma pozisyonu ulaşacak; Bu pozisyon, doğrudan daha az yoğun parçacıklar daha alanında düşük levitating yoğun parçacıklar parçacık yoğunluğu ile ilgilidir. Bir görüntüleme modülü ya yerleşik bir akıllı telefon makinesi 4, 5, 6 ya da büyütme merceğinin 7, 8 ile donatılmış bağımsız optik bileşenlerin, parçacık pozisyonları görselleştirmek için kullanılmaktadır. Görüntü işleme, ya bir akıllı telefon uygulaması ile 4, 5,= "xref"> 6 veya dahili bir veri işleme ünitesi 7, 8, daha sonra, bu nedenle, nüfus yoğunluğu dağılımı dağılımını ölçmek ve çekilen görüntülerin işler. Bu mililitre başına ilgi sadece birkaç partiküllerle gibi daha büyük bir numune (analiz etmek için, akışı, parçacıklar olarak kaldırılan doğrudan cihazın içine entegre edilmiş ve görüntüleme bölgesi boyunca (Şekil 2) geçerken analiz edilebilir.

Şekil 1: Kendi kendine yeten Manyetik Levitasyonunun Platformu. (A) bir görüntü ekranı olan bir manyetik odaklama modülü, görüntüleme bileşenleri (bir ışık yayan diyot (LED), bir optik mercek ve bir kamera detektörü) ve bir işlem ünitesi içeren kompakt bir manyetik kaldırma cihazı. (B) cro Manyetik alan şiddetiNumune eklenir mıknatıslar arasındaki alanın ss bölüm. alan gücü mıknatıslar yüzeyinde büyük olan ve aralarında merkez de sıfırdır. (C) Parçacıklar, örneğin hücreler gibi, manyetik alan deneyimi çeşitli kuvvetler içinde: manyetikler arasında merkez doğru manyetik kuvvet (F m), büyüklüğü ile parçacığın pozisyonuna göre değişen; süspanse edici ortam o göreceli parçacık yoğunluğuna bağlıdır yerçekimi kuvveti (F g ') ve partikül hareketi direnen bir sürtünme kuvveti (F d). Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 8 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

incirure 2: Smartphone uyumlu Akış destekli Manyetik Levitasyonunun Platformu. (A - c) Ön (a) sırt, yan (b) ve (c) manyetik kaldırma cihazı (d) cihazın bileşenleri şunlardır görüşleri: 1) Manyetik kaldırma modülü, sürekli mıknatıslar, bir büyüteç dahil, ve LED ve ışık difüzörü, bir mikrodenetleyici, pompa sürücü ve Bluetooth alıcısı da dahil olmak üzere 2) akıllı telefon kılıfı, 3) elektronik, 4) mikro pompa tutucu, 5) ayarlanabilir delik, 6) atık tüp tutucu, 7) pil tutucu, 8 ) örnek tutucu, 9) çift amaçlı standı ve kapak. (E) manyetik alan sayesinde numunenin pompalama gösteren şematik akış. (F) alan üzerinden pompalanan farklı yoğunluktaki parçacıklar hale nasıl gösteren manyetik kaldırma modülü, kesiti; daha az gibi Parçacık 1, olarak yoğun parçacıklar, daha yüksek bir kaldırma yüksekliği t dengelenmesi olacakBöyle Parçacık 2. olarak han yoğun parçacıklar, vd Amin, gelen izni ile, çoğaltılmıştır. 1 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Bu sistemde yoğunluk dağılım analizi için herhangi bir numunenin kullanılması için asgari gereksinimler hücreleri ya da yaklaşık olarak 5 um'den daha büyük ve yaklaşık 250 um (görüntüleme ve görüntü işleme için) boyutu daha düşük parçacıklar ve onun uyumluluğu bir süspansiyonunu elde etmek için yeteneği, burada kullanılan gadobutrol gibi para-manyetik bir solüsyon çözelti içinde karıştırılması. Hastalık teşhis için uyumlu uygulamalar, sağlıklı kontrollere göre bir hastalık taşırken doğal değiştirilmiş bir yoğunluğa sahip olan (I) 'in ilgili hücreler olanlar, (ii) bir yoğunluğa değişikliği bir reaktif ya da eklenmesi ile hücre içinde indüklenebilir içerir kısa bir alternatif tedavicubation süresi, ya da (iii) Farklı hücre tipleri tek bir numunede bulunan tanımlanmış ve doğal (ya da tedavi ile) olan benzersiz özelliklerinden yoğunluklarına sahiptir.
Orak hücre hastalığı aralıklı vazo-tıkayıcı olaylar ve kronik hemolitik anemi 9 neden olabilir bir kişinin kırmızı kan hücrelerinin (RBC) üretilecek olan hemoglobin, HbS, mutasyona uğramış bir biçimini, neden bir genetik bozukluktur. Bu hemoglobin izoelektrik son derece hassas ama onlar nokta-bakım ayarları ile uyumsuz olduğundan klinik test laboratuarı yapılmalıdır, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (HPLC) fraksiyon ya da hemoglobin elektroforezi odaklama kullanılarak teşhis edilir. Orak hücre hastalığı için Çözünürlük ve kağıt bazlı testler önerilmiştir, ancak genellikle sübjektif kullanıcı yorumuna ve doğrulayıcı testler gerektirir edilmiştir. Burada, RB daha yüksek bir yoğunluğa ulaşmak, hangi orak eritrositlerde tanımlamak için bir yoğunluk tabanlı bir yaklaşım kullanırOrak hücre hastalığı olmayan insanlardan Cs. Mekanizma, deoksijene koşulları 10, 11, 12, 13 yaşın altındaki orak hücreli anemi eritrositlerde RBC su kaybına yol açar hemoglobin, HbS mutasyona uğramış formu polimerizasyonunu içerir.
Beyaz kan hücreleri (lökosit) ve eritrosit 7: Bu yoğunluğa dayalı yaklaşım yoğunluğu temelinde farklı türde hücrelerin ayrılması için uygulanabilir. Lökosit genel yapısına enfeksiyonları mücadele sorumludur. WBC sitometri kanda bu hücrelerin sayısını ölçmek için kullanılan ve yararlı bir tanı aracı olarak hizmet vermektedir edilebilir. WBC enfeksiyonu, bağışıklık sistemi bozuklukları, ya da lösemi gösterebilir (genellikle mcL başına daha fazla 11.000 hücreleri kabul edilir) normalden yüksek sayar. WBC normal altındaki hesaplar (uL başına 3.500 hücre), otoimmün bozukluklar veya iklimlendirme kaynaklanabiliriyonları zarar veren kemik iliği. alternatif teknolojilerin aksine, burada sunulan işlem lökosit belirlenmesi amacıyla eritrositlerde veya lekeler parçalanması dayanmaz. WBC popülasyon yoğunluğu yoğunluk gradyan santrifüj 2, 3 ile daha önceden hesaplanan RBC nüfustan daha düşük olduğu rapor edilmiştir gibi bu hücre bazlı deney, ayırma işlemi için iki hücre türünün tek doğal yoğunlukları yararlanır.
1 dakikadan daha az gerektiren, 15 dakika ve otomatik görüntüleme ve analiz - uzak konumlarda değiştirici test ile karşılaştırıldığında, bu test, basit numune hazırlama (Şekil 3), 10 içindeki cihazda hücrelerinin ayrılması ile hızlıdır. Bu sayede, cihaz daha iyi, tıbbi kararlarını bildirmek tedavi fiziksel ve psikolojik acı hafifletmek için hemen tatbik izin ve komplikasyonlar derneğimizi riskini azaltmak için hızla sonuçları dönebilirsiniztıbbi bakım bir gecikme ile bir-. Bu teknik sayesinde minimum kullanıcı girişi veya yorumlanması ile bir sonuç döndürür basit örnek hazırlama ve otomatik görüntüleme ve analiz için yerinde klinik ortamlarda ya yapılabilir. Çünkü kalıcı numune analizi için mıknatıslar ve bir akıllı telefon veya görüntüleme ve görüntü işleme için basit elektrikli bileşenlerin ya kullanımını kullanarak basit bir yaklaşım kullanımı, cihaz yanı sıra her test maliyetleri bazı gelişmiş test prosedürleri ile karşılaştırıldığında çok az.
Etik Açıklama: İnsan kan örnekleri içeren tüm işlemler, kurumsal düzenlemelere göre yapılmıştır. Tüm protokoller gözden ve Kurumsal Değerlendirme Kurulu tarafından onaylanmıştır. Bir bilgilendirilmiş onam tüm katılımcılar tarafından verildi.
Orak Hücre Hastalığı Tanı 5 1. Numune Hazırlama, 8
WBC Sitometri 7 2. Numune Hazırlama
Manyetik Levitasyonunun Platformu 4, 5, 6, 7, 8 Kullanılması Örneklerin 3. Analiz

Şekil 3: Hazırlık ve Kullanıcı Arabirimi Örnek. (A) örnek hazırlama yöntemi, öznenin parmak neşter kan damlası oluşturularak, örnek test çözeltisine bir kan damlası aktarılması, örnek çalkalanması ve kılcal hareket aracılığı ile bir kılcal boru içine yüklenmesi ve bir manyetik kaldırma içine örnek yerleştirilmesini içerir cihaz. (B) Bu numune hazırlama adımları da numune hazırlama rehberlik cihazın ekranında görüntülenir. (C) Cihaz dört düğme içerir: düzgün ayar düğmesini kullanarak odağı ayarlamak amacıyla numune görüntü içine yakınlaştırmak için bir düğme; Bir düğme tek m elde etmek içineasurement (bir 5 s gecikme örneği eklemek için kullanıcı için zaman tanımak için uygulanmaktadır); time-lapse ölçümü (6 görüntü 5 s aralıklarla alınır); ve bir düğme kullanımdan sonra cihazı kapatmak için. Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 8 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
4. Görüntü Analizi 4, 5, 6, 7, 8
orak hücre hastalığı tanısı için kullanılan bir tekniktir hücre yoğunluğu dağılımı analizi için, hedef hücre popülasyonunun dağılımının genişliği tespit etmektir. orak hücre hastalığı olmayan hastalardan alınan kan hücreleri öngörülebilir bir genişlik içinde sınırlı olacaktır. Orak hücre hastalığı olan hastalardan alınan hücreler hücre dağılımı bir düşüş eğikliği, daha geniş bir bölgesi boyunca dağıtılacak herhangi bir uygulama için (Şekil 4'e bakınız), bir eşik, sağlıklı bu karşı kontrol numuneleri dağılımı genişliği arasındaki ayarlanabilir 5, 8 "hastalık için olumlu" "sağlıklı" arasında bir kesme olarak örnekler.

Şekil 4: Densit Analiz Manyetik Levitation örneğiKan Örneklerinde Orak Hücre Hastalığı için Göstergesi Olarak y Dağılımı. Sol tarafta, kırmızı kan hücreleri de dar bir bölge içinde hapsedilir. Sağda, kırmızı kan hücrelerinin bir alt kümesi aşağı dağılımı eğriltme ve lohusalık genişliğini artırarak, daha büyük bir yoğunluk ve dolayısıyla daha düşük bir kaldırma yüksekliği ulaşmak. Ölçek çubuğu = 200 mikron. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Bir numunenin yoğunluk dağılımını analiz etmek, bir hesaplama algoritması cihazı içinde uygulanır. İlk olarak, dikey ve yatay eksen boyunca piksel yoğunluğu geçişlerini hesaplanır. mıknatıs kenarları ve kılcal kenarlar dikey piksel degrade profillerinde zirveleri olarak algılanır. İç kılcal kenarları arasındaki mesafe, piksel olarak 0.7 mm olduğu bilinmektedir ve bu nedenle, SCALI olarak kullanılanfaktörü ng milimetre piksel mesafeleri dönüştürmek. yatay eksen boyunca piksel yoğunluğu degrade hücreleri nerede olduğunu büyüğüdür. Bu gradyan profili analiz ve Gauss eğrisine uygun olduğu. Bu eğrinin değeri 4 kez standart sapma hapsi genişliği olarak bildirilmektedir.
Şekil 5 Sonuçlar kontrol ve orak hücreli anemi örneklerinin her ikisi için de hapsi genişlikleri göstermektedir. Burada, (50 mikron üstü) daha büyük bir sınırlandırıcı genişliğine sahip numuneler orak hücre hastalığı pozitif olarak düşünülebilir ve bu eşiğin altında olanlar hastalık için negatif olduğu kabul edilecektir. Orak hücre dağılımının analizi için diğer yöntemler ve arkadaşları, incelenmiş ve Yenilmez tarafından bildirilmiştir unutulmamalıdır. 8

şekil5: Orak Hücre Hastalığı Tanı için Etrafının genişliği miktarının belirlenmesi. kontrol (n = 4 konular üzerinde 48 görüntüler) ve orak hücre hastalığı (n = 93 resim üzerinde 10 konuları), kırmızı kan hücrelerinin hapsi genişliği için deneysel sonuçlar. Sonuçlar, Mann-Whitney-Wilcoxon iki yönlü test (normal yaklaşım, n, 1 = 3, n = 2 = 10, Z = -2,6764, p = 0,0074) 'e göre istatistiksel olarak anlamlıdır. bıyık örneklerinden minimum ve maksimum hapsetme genişlikleri test temsil ve yıldızlarla outliers temsil etmektedir. Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 8 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Kan örneklerinde lökosit tanımlamak için kullanılabilir partikül ayrılması için, amaç, iki farklı popul tanımlamaktırations. popülasyonlarının farklı yoğunluklara sahip ise, bunlar görüş alanında farklı bölgelerde gözlenecektir. Bu nedenle, farklı yoğunluklara sahip iki veya daha fazla parçalarının homojen popülasyonları ayrılması üzerine, çoklu popülasyonunu resimde görülen ve görüntü analiz algoritması 4 kullanılarak tespit edilebilir, levitated edilebilir (bakınız Şekil 6).
iki farklı hücre tiplerinin ayrımı analiz etmek için, bir algoritma dengede iki ayrı popülasyonlarını ayıran hangi uygulanmaktadır. orak hücre hastalığı analizi için tarif edilene benzer şekilde, iki Gauss dağılımı örnek, yerine tek bir eğri uyum vardır. Piksel yoğunluğu geçişlerini her zirve farklı bir hücre popülasyonu temsil eder. Bu verilere uygun Gauss eğriler iki Gauss eğrisinin ortalama olarak (alt mıknatısın konumuna göre) ortalama kaldırma yüksekliği vermek vesınırlandırıcı eğrisinin 7 standart sapması olarak genişliği.

Şekil 6: Farklı Sıklıklarının ile mikropartiküllerin Karma Nüfus Manyetik Levitation örneği. (A) 12.5, 200 mM arasında değişen beş farklı Gd konsantrasyonlarda kaldırma yüksekliği mikrosfer yoğunluğu ilişkilendirmek Kalibrasyon eğrileri. Eğim dolayısıyla daha büyük bir çözünürlük (küçük yoğunluk farklılıkları yani duyarlılık) sunan Gd en düşük konsantrasyonlarda yüksektir. eğim algılama artan dizi gösteren Gd yüksek konsantrasyonlarda için ancak daha düşük çözünürlüğe sahip en düşük düzeydedir. (B), iki dakika boyunca iki farklı yoğunluklara sahip homojen bir örneği küreciklerin zaman bağımlı ayrılması. denge (sağ) at, iki ayrı bantlar görüntü anal tarafından tespit edilirSalman kararı algoritması. Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 7 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Herhangi bir belirli bir uygulama için farklı yoğunluklara sahip tek tek hücre türlerini belirlemek için, ilk olarak istenen kaldırma yüksekliği ölçmek için her seferinde bir hücre tipi havaya tavsiye edilir. Şekil 7a eritrositler parçalanır edildiği bir kan örneğinden lökosit kaldırma yüksekliğini gösterir. Bu daha fazla analiz için lökosit lohusalık bölgeyi tanımlar. Sonuçlar eritrosit Böylece, lökosit kaldırma pozisyonuna göre, kan numuneleri ayırt edilebilir lökosit ve daha düşük havaya olduğunu göstermektedir. görüş verilen herhangi bir alanda hacmi 0.5 uL olduğunu. 1 oranında seyreltildi örneklerde: 1000, lökosit sayısı / ml sayılarak hesaplanır2.000 7 kat görünümü ve çarparak alanında lökosit sayısı.

Şekil 7: Tüm Kan WBC Sitometri. (A) RBC lisizini takiben kan lökosit Levitasyonunun. Bu lökosit 25 mM Gd manyetik alanda havaya hangi aralığını tanımlar. (B) WBC sayım Örnek (lökosit mavi oklarla işaretli). Üst çerçeve dolgu lökosit gösterir ve alt çerçeve ve alt çerçeve kakma RBC nüfusu gösterir. Yenilmez gelen izni ile, çoğaltılamaz, vd. 7 Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Yazarlar Stephanie Knowlton ve Savaş Taşoğlu, bakım noktası teşhis çözümleri için burada açıklanan manyetik kaldırma platformunu ticarileştirmek için çalışan bir girişim olan mBiotics'in kurucularıdır ve bu girişimde hisse senedine sahiptirler. Burada açıklanan teknolojiyle ilgili olarak UCONN Dava No. 16-027 ile "Yoğunluğa Dayalı Ayırma, Tanımlama ve Ölçüm için Yerleşik Optik Görüntüleme ve Görüntü Analizi ile Manyetik Kaldırma" başlıklı geçici bir patent dosyalanmıştır.
Hem akıllı telefon uyumlu bir cihazda hem de gömülü görüntüleme ve işlemeye sahip bir cihazda otomatik görüntüleme ve analiz ile birleştirilmiş bir manyetik kaldırma tekniği sunuyoruz. Bu, kanıtlanmış iki biyomedikal uygulama ile hücrelerin yoğunluk dağılımını ölçmek için uygulanır: orak hücre hastalığı teşhisi ve beyaz ve kırmızı kan hücrelerinin ayrılması.
Yazarlar, orak hücreli hasta örnekleri sağladıkları için Boston Çocuk Hastanesi/Dana-Farber Kanser Enstitüsü'nden Dr. Matthew Heeney'e ve Yale-New Haven Hastanesi'nden Dr. Farzana Pashankar'a teşekkür eder. Yazarlar, bu örneklerin test edilmesindeki ve verilerin derlenmesindeki yardımları için Chu H. Yu ve Ashwini Joshi'ye teşekkür eder.
ST, bu araştırmanın finansal desteği için Amerikan Kalp Derneği Bilim İnsanı Geliştirme Hibesi'ne (15SDG25080056) ve Connecticut Üniversitesi Araştırma Mükemmeliyet Programı ödülüne teşekkür eder. SK, bu materyalin Ulusal Bilim Vakfı Lisansüstü Araştırma Bursu (DGE-1247393) tarafından desteklenen çalışmalara dayandığını kabul eder.
| Gadavist (Bayer) | Jefferson Medical and Imaging | 2068062 | Gadavist, bir gadolinyum şelatı olan 1M gadobutrol içerir. 15 / ca ile 2 ml şişe satın aldık. |
| Kare cam mikrokılcal tüpler | Vitrocom | 8270 | 50 mm uzunluk yeterlidir |
| Sodyum metabisülfit | Sigma-Aldrich | S9000 | Kimyasal formül: Na2< / sub>S2< / sub>O5< / sub> |
| Leica Microsystems Critoseal tüp sızdırmazlık maddesi | Fisher Scientific | 02-676-20 | |
| Hank'in Dengeli Tuz Çözeltisi | Sigma-Aldrich | H9269 SIGMA | |
| Tripsin-EDTA | Sigma-Aldrich | T4049 | Veya kullanılan hücre tipi için önerilen başka bir reaktif |
| MICROLET 2 Ayarlanabilir Delme Cihazı | Walgreens | 246567 | Biyogüvenlik protokollerine göre kullanıldığında herhangi bir delme cihazı kabul edilebilir Microlet |
| Lancets | Walgreens | 667474 | Tek kullanımlık olmalı ve tekrar kullanılmamalıdır |
| Hausser Parlak Çizgi Fazlı Hemasitometre | Fisher Scientific | 02-671-6 | Veya hücre sayımı için tercih edilen herhangi bir yöntem |
| ACK Lysing Buffer | ThermoFisher | A1049201 |