Yöntem makalesi

Formaldehit maruz bir fare modeli Atopik dermatit yenidoğan kapsaisin tedavi tarafından indüklenen etkileri

DOI:

10.3791/55987

⸱

27 Eylül 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Neuroscience Research Institute & Department of Physiology, College of Medicine, Korea University, 2Department of Pharmaceutics and Biotechnology, College of Medical Engineering, Konyang University, 3Division of Biological Science and Technology, Science and Technology College, Yonsei University Wonju Campus

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz burada fareler ve pozlama formaldehit teneffüs Atopik dermatit üzerinde etkilerini araştırmak için buharlaşmış formaldehit Atopik dermatit ikna etmek yenidoğan kapsaisin tedavi yöntemleri açıklanmaktadır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Atopik dermatit kronik pruritik Egzama Relaps ve özellikle gelişmiş ülkelerde dünya çapında hakim. Genetik ve çevresel faktörler arasındaki karmaşık etkileşimler Atopik dermatit patofizyolojisi içinde önemli bir rol oynamak için bilinir. Ancak, hala bu hastalığın patogenezinde detaylı bir resmini eksikliği. Böylece, Atopik dermatit ilerlemesini elucidating için uygun hayvan modelleri geliştirmek için önem taşıyor. Ayrıca, Atopik dermatit hava kirleticiler gibi çevresel faktörlerin etkisini araştıran hastalığın anlayış genişletir. Burada, Yenidoğan kapsaisin tedavi ile Sıçanlarda Atopik dermatit ve formaldehit sürekli konsantrasyon maruz Atopik dermatit çocuk ve ergen gelişimi üzerinde etkileri ortaya çıkarmak için fareler için bir protokol inducing bir yöntem tarif dönemleri. Bu protokoller için çeşitli deneyler başarıyla uygulanan ve diğer maddeler için kullanılabilir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Formaldehit (FA) inhalasyon, Atopik dermatit (AD) gelişimi etkileri sorguya çekmek için bir protokol reklam indüksiyon için kurulan ve geleneksel dolaşım odası SK kronik pozlama için geliştirilmiştir.

Genetik yatkınlık ve çevresel Tetikleyicileri1,2arasındaki karmaşık etkileşimler atfedilen bir kronik enflamatuar deri hastalığı reklamdır. Uygun bir hayvan modeli preklinik durumda reklam çalışması için gereklidir. Bu reklam patogenezinde çevresel faktörlerin etkisi altında elucidating en önemli olur. Ayrıca, daha iyi reklam ilerleme çevre Tetikleyicileri etkilerini araştırmak için bireysel çevresel faktörler ayırmak ve pozlama derecesini ölçmek için önemlidir.

Yenidoğan kapsaisin tedavi tarafından indüklenen reklam roman fare modeli göstermiştir. Bu reklam modeli3 epicutaneous Sensitizasyonu, genetik mühendisliğiyle reklam modelleri ve reklam4spontan fare modelleri tarafından indüklenen reklam modelleri gibi diğer reklam modelleri üzerinde bazı yararları vardır. İlk olarak, bu model yaşında 3 hafta, hangi bebek reklam karşılık gelir ve NC/Nga fare gibi reklam diğer spontan fare modelleri önceki reklam benzeri belirtiler gelişir. Bazı durumlarda, genetik mühendisliğiyle reklam modelleri, aksine reklam modelleri belirtileri çökmek ve kendiliğinden bir 20 haftalık süre içinde Relaps. Ayrıca, reklam benzeri belirtiler modelindeki indüksiyon sürecinin daha Alerjik Kontakt Dermatit indüksiyon işleminin perspektifte benzer epicutaneous Sensitizasyonu modelinin daha kolaydır.

Çocuk ve ergen dönemlerinde SK inhalasyon reklam gelişimi üzerinde etkileri çalışmaya bir akrilik cam odası ve konvansiyonel tıbbi oksijen regülatörü5 kullanarak SK maruz kalma bir hayvan modeli roman Protokolü girmiştik. Regülatör gaz akış oranları ayarlayarak sabit bir konsantrasyon ve çözüm konsantrasyonu hayvanlar ortaya çıkarmak bize izin verdi. Önceki çalışmalarda SK maruz hayvan modelleri için çeşitli yollar bildirdin. Xu et al. hangi SK çözüm için cilt6doğrudan uygulanan pozlama yöntemi açıklanmıştır. Başka bir çalışmada Protokolü SK gaz maruz kalma bir özel uçucu çözücüler jeneratör, modeli 49127kullanarak ele. Önceki çalışmalarda yöntemlerine göre yeni yöntemi daha kolay bulunuyor ve SK ek olarak diğer çözümleri için uygulanabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm yöntem tanımlamak burada uluslararası hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC), Kore Üniversitesi üniversite ve tıp. tarafından 6 hafta sonra doğum onaylanmış olan, Denemecileri enthansasia ikna etmek ve toplamak cilt ve serum sıçan gibi çeşitli örnekleri.

1. indüksiyon reklam Neonatal kapsaisin tedavi

  1. 5 mg/mL kapsaisin çözüm hazırlamak, kapsaisin 50 mg 1 ml Tween 80 ve %100 etanol 15 mL konik tüp içinde 1 mL ekleyin.
  2. Normal salin 8 mL konik tüp ekleyin. Hiçbir ayrı katmanlar görünür hale gelene kadar tüp şiddetle çalkalanır
  3. kapsaisin çözüm (10 µL/g) midline ve neonatal Sprague-Dawley rat boynun arka subkutan doku içine enjekte.
    1. Teslim (kritik) doğumdan sonra 48 h 12 h arasında kapsaisin.
      Not: enjeksiyon tarafından birkaç gün gecikirse, dermatit geliştirmek değil veya yalnızca birkaç hafta boyunca devam edecek. Enjeksiyon çok erken, solunum sıkıntısı nedeniyle şiddetli ağrı oluşabilir.
    2. Yenidoğan sıçanlarından emir kapsaisin enjeksiyon nedeniyle solunum durması önlemek için itmek Yenidoğan Bebeklerin nefes teşvik etmek veya solunum normal. yana capsaicin kaynaklı ağrı olabilir hale gelinceye kadar Yenidoğan Bebeklerin bir oksijen odasında tutmak göğüs nefes vazgeçirmek, genel anestezi ekleme muhtemelen nefes zorluk daha da kötüye. Böylece, Denemecileri anesthesics fareler yaşama artırmak için kullanmamalısınız.

2. Kaşıntı ve dermatit reklam, bir fare modeli değerlendirilmesi

  1. spontan tırmalamak davranış sayma tarafından prurit ölçümü
    1. hazırla plastik chambers (20 cm x 30 cm x 20 cm) için tam kapsama sağlamak için bir ayna ile donatılmış görüntüleme ve nefes farelerin sağlamak için delikleri için.
    2. Ayarla yukarı ve düzgün ayna sayısı ve fareler açık manzaralarını aynı anda kaydetmek için bir dijital video kamera ayarlayın.
    3. Yer sıçan plastik odası ve açılmasını engellemek için ağır bir nesne ile odası tavan kapak.
    4. 1 h sıçanlara spontan davranışlarını kayıt, video klipleri oynatmak ve davranışları tırmalamak sayısını saymak.
  2. Bir skorlama sistemi kullanarak deri lezyonu değerlendirilmesi
    1. indüksiyon odasında fare yerleştirin.
    2. Oksijen akış ölçer 2 L/dk turn akış hızı ve anestezi için % 3 isoflurane Buharlaştırıcı ayarlayın.
    3. Ölçüde ve dermatit kulaklar ve diğer bölgelerinde bir farenin şiddetini belirlemek.
    4. 0.25 cm 2 ve deri lezyonları aşağıdaki Tablo 1 tarafından şiddeti olarak deri lezyonları ölçüde birim boyutunu define: önem dizin; ölçüde önem çarpımının tarafından Dermatit puanı derecesini (Dermatit puanı görmek < güçlü sınıfı "xfig" = > şekil 1B).

3. Gaz halinde olan yakıtlar SK maruz kalma hayvanlar

  1. inhalasyon odası hazırlanması
    1. bir akrilik cam kutusu hazırlamak (55 cm x 40 cm x 35 cm) karşı taraflarda iki çıkışları olan.
    2. Dikkat. Dolaşımı SK gaz için giriş yüksek çıkış yerleştirin ve giriş, çıkış boyutunu büyütmek.
    3. Dikkat. Çıkışları, başka bir tarafında dahili gaz konsantrasyonu ölçümü için kapatılabilmesi için üç küçük pasajlar matkap.
      4. Her iki Outlet
    4. Bağlan tüpler. Bir çıkış tüp kan dolaşımı hood için veya emisyon gaz için bina dışında yere takıp diğer çıkış tüp tıbbi oksijen regülatörü bağlayın.
    5. Geleneksel fare kafesi akrilik cam kutusunun içine yerleştirir.
    6. Fareler için 5 hafta (2 h/gün ve haftada 5 gün) doğumdan sonra bir hafta koyarlar.
    7. Gaz kaçağı önlemek için mümkün olduğunca sıkı bir şekilde akrilik cam kutu mühür.
      Not: sıkı sızdırmazlık için kauçuk odası kapak içermelidir. Sıkı sızdırmazlık için odası sarmak için sarılmak film uygulamak.
  2. Bir tıbbi oksijen regülatörü kullanarak gaz halinde olan yakıtlar SK nesil
    1. SK 5 g 1 litre su Dissolve.
    2. %0,5 SK çözüm tıbbi oksijen regülatörü nemlendirici şişeye koy.
    3. Regülatör, giriş tüp bağladıktan sonra regülatör üzerinde açın ve 5 L/dak için akış hızı ayarlayın
    4. Çözüm konsantrasyonu ve gaz odasında konsantrasyonu belirlemek için akış hızı ayarlayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kapsaisin tedavi reklam fare modeli 7 hafta-in yaş, AD benzeri deri iltihabı şekil 1Aile sunulur. Reklam sıçan kapsaisin tedavi modelinin sağlam tırmalamak davranışları Video 1gösterilir. Yenidoğan kapsaisin tedavi Dermatit elde edildi ve davranışları Rat 3 hafta-in yaş tırmalamak ağırlaştırılmış ve reklam benzeri belirtiler birkaç hafta (şekil 1B, C) için kalıcı. Derecesi daha az şiddetli olması...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada reklam benzeri belirtiler Sıçanlarda indüksiyon için açıklanan protokol reklam patofizyolojisi eğitim için uyarlanmış ve uyuşturucu testi yapmak için bir tarama aracı olarak kullanılan. Gaz halinde olan yakıtlar SK maruz kapsaisin tedavi fareler için araç çeşitli hayvan modelleri çeşitli gazlar maruz etkilerini değerlendirmek için uygulanabilir.

Yenidoğan kapsaisin tedavi reklam modeli DNCB tedavi modeli9 ve epicutaneous Sensitizasyonu modeli gibi

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma genel refah tarafından desteklenen & güvenliği araştırma programı aracılığıyla Ulusal Araştırma Vakfı, Kore (NMG) Milli Eğitim Bakanlığı, Fen ve Teknoloji (NMK-2014M3C8A5030612) tarafından finanse edilen ve Chung Yang, Cha Young tarafından desteklenen Güneş, MD ve Jang Merhaba Joo Yeu Sa Memorial Fonu.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Tıbbi Oksijen RegülatörüYuyao Jiahua Tıbbiüretici sonuçları etkilemeyecek
Tüpüreticisi sonuçları etkilemeyecek
Akrilik HazneTaejin Acrylüreticisi sonuçları etkilemeyecek
Plastik HazneTaejin Acrylüreticisi sonuçları etkilemeyecek
Paraformaldehit, tozSigma158127üreticisi sonuçları etkilemeyecek
Wrap filmeUniwrapüreticisi sonuçları etkilemeyecek
KapsaisinSigmaM2028üreticisi sonuçları etkilemeyecek
Tween 80SigmaP4780üreticisi sonuçları etkilemeyecek
Dijital Video KameraSonyHDR-CX380yüreticisi etkilemeyecek sonuçları etkiler
İzofluranJW ilaçüreticisi sonuçları etkilemeyecektir

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466(2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels? Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Formaldehit MaruziyetiCilt LezyonlarKa nma DavranSerum IgEIL 4 EkspresyonuIL 13 EkspresyonuPruritus Alevlenmesi

İlgili makaleler