Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kronik obstrüktif akciğer hastalığı manken tekrarlanan ozon maruz farelerde nesil
Bu makalede
Özet
Özet
Kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) tarafından kalıcı hava akımı sınırlama ve akciğer parenkima imha karakterizedir. Nüfus yaşlanma içinde bir çok yüksek insidansı vardır. Geçerli geleneksel tedaviler KOAH odak çoğunlukla açık belirti-modifiye ilaçlar için; Böylece, yeni tedavilerin geliştirilmesi acilen ihtiyacı vardı. KOAH nitelikli hayvan modelleri temel mekanizmaları karakterize etmek için yardımcı olabilir ve yeni ilaç tarama için kullanılabilir. Lipopolysaccharide (LPS) gibi geçerli KOAH modelleri veya domuz pankreas elastase (PPE)-indüklenen amfizem modeli, akciğerler ve airways KOAH benzeri lezyonlar oluşturur ancak aksi takdirde insan KOAH patogenezinde benzer değil. Bir sigara dumanı (CS)-indüklenen model kalır en popüler çünkü sadece solunum sistemi lezyonlarının KOAH gibi taklit eder, ama bu da insanlarda KOAH neden ana tehlikeli madde birini dayanır. Ancak, CS kaynaklı modeli zaman alıcı ve emek yoğun yönlerini önemli ölçüde kendi uygulamasında yeni uyuşturucu tarama sınırı. Bu çalışmada, biz başarıyla yeni KOAH manken fareler için ozon yüksek düzeyde maruz tarafından oluşturulan. Bu modeli aşağıda gösterilmiştir: 1) zorunlu Ekspiratuar cilt 25, 50 ve 75/zorla vital kapasite azalmıştır (FEV25/FVC, FEV50/FVC ve FEV75/FVC), akciğer fonksiyonu; bozulma gösteren 2) büyütülmüş akciğer alveoller akciğer parenkima imha ile; 3) yorgunluk zaman ve mesafe azalır; ve 4) artış iltihabı. Birlikte ele alındığında, bu veriler ozon pozlama (OE) modeli ozon dozun KOAH etyolojik faktörlerden biri olduğu için insanlara benzer bir güvenilir hayvan modeli olduğunu ispat. Ayrıca, sadece 6-8 hafta, 3-12 ay OE modeli KOAH araştırma için iyi bir seçim olabilir gösteren sigara dumanı modeli ikna etmek için gerektirir, ancak bir OE modeli oluşturmak için önceki çalışmalarımız, temel aldı.
Giriş
KOAH, Amfizem ve kronik bronşit gibi ölüm üçüncü önde gelen nedenidir 20201,2dünyada olabilir tahmin ediyor. KOAH potansiyel insidansı 40 yıldır eski bir popülasyondaki erkeklerde % 12,7 ve dişilerde3önümüzdeki 40 yıl içinde % 8.3 olduğu tahmin edilmektedir. Hiçbir ilaç KOAH hastaları4ilerleyici bozulma tersine çevirmek şu anda mevcuttur. KOAH güvenilir hayvan modelleri sadece hastalık patolojik süreci taklit talep ediyorum ama aynı zamanda kısa nesil süresi gerektirir. LPS veya bir PPE kaynaklı modeli de dahil olmak üzere geçerli KOAH modelleri amfizem benzeri s....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Not: OE model oluşturulan ve daha önce bildirilen araştırma 30 , 31 , 32 yılında kullanılan. Tüm hayvan deneyleri kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Shanghai Jiaotong Üniversitesi tarafından kabul edildi.
1. fareler
- ev patojen ücretsiz, 7 - için 9-hafta-yaşlı kadın BALB/c fareler bir hayvan bireysel havalandırılmış kafeslerde tesis altında kontrollü sıcaklık (20 ° C) ve nem (40-%60). 12 h ışık ve 12 h tesisin karanlık döngüsünde sağlar. Gıda sağlamak ve ad libitum su.
2. Ozon....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
3D µCT görüntüleri her grubun örnekleri şekil 1biriçinde görüntülenir. Önemli ölçüde daha büyük bir toplam akciğer hacim ozon maruz fareler vardı (şekil 1bir ve b) ve LAA % (şekil 1c) hava maruz kontrol fareler daha. Akciğer hacmi ve LAA % ozon pozlama31,32altı hafta sonra yükseltilmiş kaldı........
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu çalışmada, biz yeni bir KOAH model oluşturmak için güvenilir bir yöntem mevcut. Diğer modeller için (Yani, LPS ya da KKE modelleri) karşılaştırıldığında, bu OE model KOAH hastaları patolojik süreci beyannamedir. Sigara dumanı KOAH insan hasta40neden olan ana tehlikeli madde olduğundan, CS model en popüler KOAH model41,42kalır. Ancak, 3 - 12 ay R CS model gerektirir & D dönem için yeni ilaçlar. CS modeline göre geçerli OE mo.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Z.W.S. ve chilling geçerli çalışanları ve hücresel Biyomedikal grup hisse senedi opsiyonu sahipleri vardır (NASDAQ: CBMG). Diğer yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.
Teşekkürler
Yazarlar, bu iletişim kuralını µCT değerlendirilmesinde konusunda teknik yardım almak için Bay Boyin te (Şangay halk sağlığı Klinik Merkezi) için şükran ifade etmek istiyorum.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Bu çalışmada BALB/c fareleri | Slac Laboratory Animal, Shanghai, Çin | N/A | 7-9 haftalık dişi BALB/c fareleri kullanıldı. |
| Bireysel havalandırmalı kafesler | Suhang, Şangay, Çin | Model Numarası: MU64S7 | Kafesler, hayvan tesisinde fareleri barındırmak için kullanıldı. |
| Sızdırmazlık perspex-box | Suhang, Şangay, Çin | N/A | Kutu, ozon jeneratörünü içermek için kullanıldı. Fareler kutu içinde ozona maruz bırakıldı. |
| Elektrik jeneratörü | Zımpara Ozonizer, Uetze-Eltze, Almanya | Model 500 | Cihaz ozon üretmek için kullanıldı. |
| Ozon probu | ATi Technologies, Ashton-U-Lyne, Greater Manchester, UK | Ozone 300 | cihazı, ozon oluşumunu izlemek ve kontrol etmek için kullanıldı. |
| Pelltobarbitalum natricum | Sigma, St. Louis, MO, ABD | P3761 Fareler | pelltobarbitalum natricum'un intraperitoneal enjeksiyonu ile uyuşturuldu. |
| Mikro Bilgisayarlı Tomografi | GE Healthcare, Londra, ON, Kanada | RS0800639-0075 | Bu cihaz, akciğerin görüntülerini elde etmek için kullanıldı. |
| Micro-view 2.01 ABA yazılımı | GE Healthcare, Londra, ON, Kanada | Micro-view 2.01 | Bu cihaz, akciğeri yeniden yapılandırmak ve akciğerin hacmini, LAA'sını analiz etmek için kullanıldı. |
| Koşu bandı makinesi | Duanshi, Hangzhou, Zhejiang, Çin | DSPT-208 | Bu makine yorulma testi için usd idi. |
| Vücut pletismografı | eSpira & trade; Zorunlu Manevra Sistemi, EMMS, Edinburgh, Birleşik Krallık | Zorunlu Manevra Sistemi | Bu cihaz, spirometri solunum fonksiyonunu test etmek için kullanılmıştır. |
| Vantilatör | eSpira ve ticaret; Zorunlu Manevra Sistemi, EMMS, Edinburgh, Birleşik Krallık | Zorunlu Manevra Sistemi | Bu cihaz, spirometri solunum fonksiyonunu test etmek için kullanılmıştır. |
| Slayt döndürücü santrifüj | Denville Scientific, Holliston, MA, ABD | C1183 & nbsp; | BALF hücrelerini slaytlar üzerine döndürmek için kullanıldı. |
| Wright Staining | Hanhong, Şangay, Çin | RE04000054 | Askıya alınan BALF'taki makrofajları, nötrofilleri boyamak için kullanıldı. |
| Hemositometre | Hausser Scientific, Horsham, PA, ABD | 4000 | hücre saymak için kullanıldı. |
| IL-1 ve beta; | Abcam, Cambridge, MA, ABD | ab100704 | Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar. |
| IL-10 | Abcam, Cambridge, MA, ABD | ab46103 | Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar. |
| TNF-&alfa; | Abcam, Cambridge, MA, ABD | ab100747 | Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar. |
| Paraformaldehit | Sigma, St. Louis, MO, ABD | P6148 | Akciğer% 4 paraformaldehit ile şişirildi. |
| Parafin | Hualing, Şangay, Çin | 56# | Akciğeri gömmek için kullanıldı. |
| Döner Mikrotom | Leica, Wetzlar, Hessen, Almanya | RM2255 | Akciğeri kesitlemek için kullanıldı. |
| Hgaematoksilen ve Eozin (H & E) boyama çözeltisi | Solarbio, Pekin, Çin | G1120 | H & Morfometrik analiz için E boyama yapıldı. |
| Dik parlak alan mikroskobu | Olympus, Center Valley, PA, ABD | CX41 | H& E boyama slaytları. |
| Adobe Photoshop 12 | Adobe, San Jose, CA, ABD | Adobe Photoshop 12 | H üzerindeki alveollerin sayısını saymak için kullanıldı. E lekeli görüntüler. |
| GraphPad prizma 5 | Graphpad Software Inc., San Diego, CA | GraphPad prizma 5 | veri analizi ve rakamların üretimi için kullanılmıştır. |
Kaynaklar
- Lozano, R., et al. Global and regional mortality from 235 causes of death for 20 age groups in 1990 and 2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010. Lancet. 380, 2095-2128 (2012).
- Chapman, K. R., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
