Yöntem makalesi

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı manken tekrarlanan ozon maruz farelerde nesil

DOI:

10.3791/56095

⸱

25 Ağustos 2017

 ,  ,  , 
1Cellular Biomedicine Group, Shanghai, 2Cellular Biomedicine Group, Cupertino, 3Department of Respiratory Medicine, Shanghai General Hospital, Shanghai Jiaotong University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) tarafından kalıcı hava akımı sınırlama ve akciğer parenkima imha karakterizedir. Nüfus yaşlanma içinde bir çok yüksek insidansı vardır. Geçerli geleneksel tedaviler KOAH odak çoğunlukla açık belirti-modifiye ilaçlar için; Böylece, yeni tedavilerin geliştirilmesi acilen ihtiyacı vardı. KOAH nitelikli hayvan modelleri temel mekanizmaları karakterize etmek için yardımcı olabilir ve yeni ilaç tarama için kullanılabilir. Lipopolysaccharide (LPS) gibi geçerli KOAH modelleri veya domuz pankreas elastase (PPE)-indüklenen amfizem modeli, akciğerler ve airways KOAH benzeri lezyonlar oluşturur ancak aksi takdirde insan KOAH patogenezinde benzer değil. Bir sigara dumanı (CS)-indüklenen model kalır en popüler çünkü sadece solunum sistemi lezyonlarının KOAH gibi taklit eder, ama bu da insanlarda KOAH neden ana tehlikeli madde birini dayanır. Ancak, CS kaynaklı modeli zaman alıcı ve emek yoğun yönlerini önemli ölçüde kendi uygulamasında yeni uyuşturucu tarama sınırı. Bu çalışmada, biz başarıyla yeni KOAH manken fareler için ozon yüksek düzeyde maruz tarafından oluşturulan. Bu modeli aşağıda gösterilmiştir: 1) zorunlu Ekspiratuar cilt 25, 50 ve 75/zorla vital kapasite azalmıştır (FEV25/FVC, FEV50/FVC ve FEV75/FVC), akciğer fonksiyonu; bozulma gösteren 2) büyütülmüş akciğer alveoller akciğer parenkima imha ile; 3) yorgunluk zaman ve mesafe azalır; ve 4) artış iltihabı. Birlikte ele alındığında, bu veriler ozon pozlama (OE) modeli ozon dozun KOAH etyolojik faktörlerden biri olduğu için insanlara benzer bir güvenilir hayvan modeli olduğunu ispat. Ayrıca, sadece 6-8 hafta, 3-12 ay OE modeli KOAH araştırma için iyi bir seçim olabilir gösteren sigara dumanı modeli ikna etmek için gerektirir, ancak bir OE modeli oluşturmak için önceki çalışmalarımız, temel aldı.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

KOAH, Amfizem ve kronik bronşit gibi ölüm üçüncü önde gelen nedenidir 20201,2dünyada olabilir tahmin ediyor. KOAH potansiyel insidansı 40 yıldır eski bir popülasyondaki erkeklerde % 12,7 ve dişilerde3önümüzdeki 40 yıl içinde % 8.3 olduğu tahmin edilmektedir. Hiçbir ilaç KOAH hastaları4ilerleyici bozulma tersine çevirmek şu anda mevcuttur. KOAH güvenilir hayvan modelleri sadece hastalık patolojik süreci taklit talep ediyorum ama aynı zamanda kısa nesil süresi gerektirir. LPS veya bir PPE kaynaklı modeli de dahil olmak üzere geçerli KOAH modelleri amfizem benzeri semptomlar5,6tetikleyebilir. Tek bir yönetim veya işaretli neutrophilia bronchoalveolar lavaj sıvı (BALF), artar pro-inflamatuar aracılar (Örneğin, TNF-α ve IL-1β) BALF veya serum, fare ya da sıçan sonuçlarında LPS veya KKE bir haftalık meydan okuma akciğer üretir parenkimal imha genişlemiş hava boşluk ve sınırları hava akımı5,6,7,8,9,10. Ancak, LPS veya KKE insan KOAH nedenleri değildir ve böylece patolojik süreç11taklit değil. CS kaynaklı manken üretilen bir kalıcı hava akımı sınırlama, akciğer parenkima yıkım ve fonksiyonel egzersiz kapasitesi düşük. Ancak, geleneksel bir CS Protokolü KOAH model12,13,14,15oluşturmak için en az 3 ay gerekir. Böylece, iki gereksinimlerini karşılayan yeni, daha etkili bir hayvan modeli oluşturmak önemlidir.

Son zamanlarda, ek olarak sigara, hava kirliliği ve mesleki maruz kalma KOAH16,17,18daha yaygın nedenleri olmuştur. Ozon, önemli kirletici biri olarak (değil önemli bileşeni hava kirliliği rağmen), doğrudan solunum yolu ile tepki ve çocuklar ve genç yetişkinler19,20,21 akciğer dokusuna zarar ,22,23,24,25. Ozon yanı sıra LPS, KKE ve CS, de dahil olmak üzere diğer uyarıcılar bir ciddi pulmoner oksidatif stres ve DNA hasarı biyokimyasal yolları katılmaktadırlar ve inisiyasyon ve promosyon KOAH26,27bağlantılıdır. Bazı KOAH hastaları belirtileri gösteren ozon Akciğer işlev18,28,29bozabilir ozon için maruz sonra bozulabilir başka bir faktördür. Bu nedenle, biz tekrar tekrar 7 hafta boyunca fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir KOAH model oluşturulan; Bu hava akımı kusurları ve akciğer parenkima hasarı önceki araştırmalar30,31,32benzer sonuçlandı. Biz bu çalışmada kadın farelere OE Protokolü genişletilmiş ve başarılı bir şekilde bizim önceki çalışmalar30,31,32erkek farelerde gözlenen amfizem çoğaltılamaz. KOAH ölüm oranı erkeklerde azaldı ama birçok ülkede33kadınlarda artmıştır çünkü KOAH manken dişilerde mekanizmaları çalışmaya ve kadın KOAH hastaları için tedavi yöntemleri geliştirmek için gereklidir. Tüm cins OE modeline uygulanabilirliği KOAH manken olarak kullanmak için daha fazla destek ödünç.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Not: OE model oluşturulan ve daha önce bildirilen araştırma 30 , 31 , 32 yılında kullanılan. Tüm hayvan deneyleri kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Shanghai Jiaotong Üniversitesi tarafından kabul edildi.

1. fareler

  1. ev patojen ücretsiz, 7 - için 9-hafta-yaşlı kadın BALB/c fareler bir hayvan bireysel havalandırılmış kafeslerde tesis altında kontrollü sıcaklık (20 ° C) ve nem (40-%60). 12 h ışık ve 12 h tesisin karanlık döngüsünde sağlar. Gıda sağlamak ve ad libitum su.

2. Ozon veya hava pozlama

  1. Generate ozon ile sızdırmazlık akrilik (örneğin Perspex) kutusunda bir elektrik jeneratörü. Blow hava iç ve kutunun dışında bağlı bir hava havalandırma borusu aracılığıyla küçük Hava üfleyici kullanarak kutudan. Kutusuna bir ozon sonda kullanarak ozon konsantrasyonu izlemek. Kutusunda ozon konsantrasyonu başına 2.5 parçaları ulaşır kadar bekleyin milyon (ppm).
    Not: Ozon sonda otomatik olarak Ozon Jeneratör açık veya kapalı geçiş yapabilir ve ozon seviyesi 2.5 ppm at kutusundaki koruyabilirsiniz.
    2. Ozon seviyesi 2.5 ppm ulaştığında
  2. fareler ve metin kutusuna yerleştirin. Fareler kutusunda 3 h için her zaman için ozon karşılaşmazlar devam.
    Not: Kutu sırasında 3 h otomatik olarak Ozon Jeneratör açık veya kapalı geçiş yaparak bir ozon düzeyi 2.5 ppm koruyabilirsiniz ve CO 2 üfleme tarafından üretilen farelerin kutunun dışında.
  3. (3 günde bir kez) 7 hafta boyunca haftada iki ozon Etkilenmeler (3 saat süren her maruz kalma) vermek; aynı zamanda ve aynı süre için hava kontrol fareler ortaya çıkarmak.

3. Mikro bilgisayarlı tomografi

  1. pelltobarbitalum natricum mayi enjeksiyonu ile fareler 7 haftanın sonunda, anestezi (% 1, 0.6 - 0.8 ml/100 g) göre fare değil görmek için bireysel durumlarda doz ayarlama bir ayak çimdik. için monitör yanıt ve fare sürekli nefes frekansta tutun; ve gönüllü yok hareketleri var işlemler sırasında olduğundan emin olun.
  2. Bir mikro Bilgisayarlı Tomografi (µCT) odasında imzalat fareler yer.
  3. Kalibre standart protokol ve üreticinin kullanma µCT ' s yönergeleri. X-ışını tüpü 50 ayarla kV ve 450 µA mevcut.
    Not: Her ikisi de x-ışını ve Dedektör fareler döndürmek.
  4. Bir dilim için 300 MS bir çekim hızı ve bir dilim kalınlığı 0,093 mm etkili piksel boyutunu 515 projeksiyonlar 0.092 mm, kazanılması by µCT çözümlemesi yapma.
  5. Akciğer alınan görüntüleri bir yazılım kullanarak yeniden. En az ve en çok gri tonlamalı sırasıyla-750 ve-550 Hounsfield daxilində ayarlayarak gri tonlamalı görüntü parlaklığını ayarlayın.
    Not: Yazılım otomatik olarak akciğer parankimi ve düşük-zayıflama alan (LAA) 34 , 35 hacimleri hesaplar.
  6. Toplam akciğer hacmi LAA hacimce bölerek LAA (LAA %) yüzdesini hesaplamak.

4. koşu bandı Test

  1. fareler adaptasyon bir test üzerinde bir koşma koşu bandı makine. Not 10 m/dk 10 dk hızında vermek: yordamı yürütülen elektrik her zaman kapalı olduğunda.
  2. yönetici bir yorgunluk testi fareler için.
    1. Fare hızı 10 m/dak 5 dakika süreyle ısınmak
    2. Artmak belgili tanımlık hız 15 m/dk 10 dakika süreyle
    3. Egzersiz yoğunluğu artırmak: 5 m/dak, 20 m/dak başlangıç tarafından hızı artan fareler kadar her 30 dk. 36 çalıştırmak devam edemiyor.
  3. Çalışan mesafe ve çalışma süresi yorgunluk mesafe ve yorgunluk zaman, anılan sıraya göre toplam kayıt.

5. pulmoner fonksiyon ölçümleri

  1. pelltobarbitalum natricum mayi enjeksiyonu ile fareler anestezi (% 1, 0.6 - 0.8 ml/100 g) göre fare yaptığını görmek için bireysel durumlarda doz ayarlama bir ayak çimdik değil yanıt vermek ve fareler spontan solunum. monitör korumuştur ve fare sürekli nefes frekansta tutun kadar bekleyin; ve gönüllü yok hareketleri var işlemler sırasında olduğundan emin olun.
  2. Dikkatle fareler tracheostomize ve bilgisayar kontrollü bir vantilatöre bağlı bir vücut Pletismograf yerleştirebilirsiniz.
    Not: Havalandırma proksimale endotrakeal tüp bulunan bir vana ile kontrol edilir. Belgili tanımlık tertibat yarı statik basınç birimi manevra ve manevra hızlı akış hacminin de dahil olmak üzere farklı yarı otomatik manevralar sağlar.
  3. Her nefes döngüsü tam bitiminde elde edilir ve ortalama 150 nefes/dk düzenli nefes desen kadar basınç kontrollü havalandırma yoluyla imzalat fare sıklığını nefes empoze.
  4. Yarı statik basınç-hacim manevra aygıtla Pletismograf içinde oluşturulan negatif basınç kullanarak gerçekleştirmek.
  5. Hızlı Akış birim manevra FVC ve FEV kaydetmek için yarı statik basınç-hacim döngüler içinde gerçekleştirin. + 30 cm H 2 akciğer şişirmek O ve hemen sonrasında kalan birim FEV ilk 25, 50 ve soluk verme (FEV 25 75 ms-30 cm H 2 de O. kayıt olana sona erme zorlamak için son derece olumsuz bir basınç bağlanmak FEV 50 ve FEV 75, sırasıyla). Suboptimal manevralar reddetmek. Her tek fare ile her test için düzenleyeceği en az tüm sayısal parametreler için güvenilir bir ortalaması elde etmek için üç kabul edilebilir manevralar.

6. BALF koleksiyonu

  1. ardından terminal anestezi ile pelltobarbitalum natricum ((%1, 1,8-2.4 ml/100 g) fareyi bir ayak çimdik cevap değil ve nefes kaybetmek görmek için bireysel durumlarda göre doz ayarlamak), lavaj PBS 2 mL 1 mm çaplı endotrakeal tüp ve sonra al BALF 10 üzerinden ile fareler.
  2. Erişim tarihi lavaj aliquots havuz ve onlara 4 ° C ve 250 x g 10 dakika süreyle santrifüj kapasitesi
  3. İçin acele kullanma süpernatant toplamanız ve kalan-80 ° C ya da sıvı azot,.
  4. Bir hemasitometre kullanarak hücreleri toplam sayısını saymak.
  5. PBS ve sonra spin (1400 x g, 6 dk.) 250 µL slayta bir slayt spinner santrifüj kullanarak resuspended hücrelerinin hücre Pelet resuspend.
  6. İçin geçerli Wright boyama hücreleri slaytlara üreticiye göre ' s protokolü.
  7. Fare başına 200 hücreleri saymak; 400 X büyütme altında; Standart Morfoloji göre hücreleri makrofajlar veya nötrofil, tanımlamak ve sayıları saymak.

7. Kalp kan örnekleme

  1. kardiyak ponksiyon yoluyla kan toplamak, 1.5 mL tüpler, içine yük ve buz 30 dakika süreyle devam et
  2. 2000 g x ve 4 5 min için kan örnekleri santrifüj kapasitesi ° C.
  3. Süpernatant (serum) için yeni bir tüp aktarın ve-80 ° C ya da sıvı azot depolayın.
  4. IL-1β için serum hazırlamak IL-10 ve ilgili ELISA Kitleri kullanarak TNF-α algılama testleri.

8. Akciğer xarakteristikaları analizi

  1. teşrih akciğerler ve fareler üzerinden tracheas.
    1. Cerrahi bir tahta üzerine euthanized her fare hemen kurbandan sonra konumlandırın.
    2. Uzak platysma incelemek ve görselleştirmek ve trakeal halkalar erişmek için ön trakeal kaslar.
    3. Açık yukarıya göğüs boşluğuna. Akciğerler ve nefes borusu incelemek, ama kalp akciğerlerden ayırmayın.
  2. %4 paraformaldehyde PE90 polietilen boru aracılığıyla içeren bir şırınga endotrakeal kateter bağlanmak.
    Dikkat: Paraformaldehyde zehirlidir. Eldiven ve koruyucu gözlük ve duman başlık içinde çözüm kullanın.
  3. Tamamen %4 paraformaldehyde (10 damla, ~ 200 µL) kullanarak akciğer endotrakeal kateter şişirmek. Kalp enflasyon tamamlandıktan sonra kaldırın.
  4. Bakım için en az 4 h %4 paraformaldehyde 10 mL içeren 15 mL tüp içinde akciğer
  5. Embed parafin akciğerde. 5-µm bölümleri parafin blok bir döner microtome ile kesit elde. Kesit sırasında maruz maksimum yüzey alanı bronş ağacının alanı içinde akciğer dokusunun.
  6. Xarakteristikaları için Hematoksilen ve Eozin çözümlemesi (H & E) bölümleri boyama.
  7. Bölümleri alan parlak dik mikroskopla (objektif lens, 20 X; pozlama süresi, 1.667 ms) görüntü.
  8. İki müfettişler tedavi protokolü kör bağımsız olarak saymak histolojik kesitler var. Ortalama doğrusal kesme noktası (L m) arası alveoler septal duvar mesafe ölçmek için bir parametre olarak kullanmak. Aşağıdaki adımları uygulayarak L m belirlemek:
    1. bölümleri görüntüleri Photoshop açın ve beş 550 µm uzun hatları ile görüntü üzerinde reticule kılavuz çizin.
    2. Alveoller arasında kılavuz çizgisi sayısını.
    3. L m kılavuz çizgisi uzunluğunu alveoller sayısına bölünmesi ile hesaplayın. Miktar için fare başına beş bölüm görüntü. Her bölümün (alan başına bir görüntü) on görüntüleri ve rastgele değerlendirmek. Bir alan önde ya da başka bir yöne hareket ettirerek airways ve gemiler alan seçimi sırasında kaçının.
      Not: Veri ortalama ± S.E.M. sunulmaktadır Un eşleştirilmiş bir t-test hava maruz fareler ve fareler ozon maruz arasında karşılaştırma için gerçekleştirilmiştir. Her grubun üç hayvan önemli farkı hesaplamak için kullanılmıştır. P-değeri < 0,05 olarak önemli kabul.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

3D µCT görüntüleri her grubun örnekleri şekil 1biriçinde görüntülenir. Önemli ölçüde daha büyük bir toplam akciğer hacim ozon maruz fareler vardı (şekil 1bir ve b) ve LAA % (şekil 1c) hava maruz kontrol fareler daha. Akciğer hacmi ve LAA % ozon pozlama31,32altı hafta sonra yükseltilmiş kaldı....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada, biz yeni bir KOAH model oluşturmak için güvenilir bir yöntem mevcut. Diğer modeller için (Yani, LPS ya da KKE modelleri) karşılaştırıldığında, bu OE model KOAH hastaları patolojik süreci beyannamedir. Sigara dumanı KOAH insan hasta40neden olan ana tehlikeli madde olduğundan, CS model en popüler KOAH model41,42kalır. Ancak, 3 - 12 ay R CS model gerektirir & D dönem için yeni ilaçlar. CS modeline göre geçerli OE mo...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Z.W.S. ve chilling geçerli çalışanları ve hücresel Biyomedikal grup hisse senedi opsiyonu sahipleri vardır (NASDAQ: CBMG). Diğer yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, bu iletişim kuralını µCT değerlendirilmesinde konusunda teknik yardım almak için Bay Boyin te (Şangay halk sağlığı Klinik Merkezi) için şükran ifade etmek istiyorum.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Bu çalışmada BALB/c fareleriSlac Laboratory Animal, Shanghai, ÇinN/A7-9 haftalık dişi BALB/c fareleri kullanıldı.
Bireysel havalandırmalı kafeslerSuhang, Şangay, ÇinModel Numarası: MU64S7Kafesler, hayvan tesisinde fareleri barındırmak için kullanıldı.
Sızdırmazlık perspex-boxSuhang, Şangay, ÇinN/AKutu, ozon jeneratörünü içermek için kullanıldı. Fareler kutu içinde ozona maruz bırakıldı.
Elektrik jeneratörüZımpara Ozonizer, Uetze-Eltze, AlmanyaModel 500 Cihaz ozon üretmek için kullanıldı.
Ozon probuATi Technologies, Ashton-U-Lyne, Greater Manchester, UKOzone 300cihazı, ozon oluşumunu izlemek ve kontrol etmek için kullanıldı.
Pelltobarbitalum natricumSigma, St. Louis, MO, ABDP3761 Farelerpelltobarbitalum natricum'un intraperitoneal enjeksiyonu ile uyuşturuldu.
Mikro Bilgisayarlı TomografiGE Healthcare, Londra, ON, KanadaRS0800639-0075Bu cihaz, akciğerin görüntülerini elde etmek için kullanıldı.
Micro-view 2.01 ABA yazılımıGE Healthcare, Londra, ON, KanadaMicro-view 2.01 Bu cihaz, akciğeri yeniden yapılandırmak ve akciğerin hacmini, LAA'sını analiz etmek için kullanıldı.
Koşu bandı makinesi Duanshi, Hangzhou, Zhejiang, ÇinDSPT-208Bu makine yorulma testi için usd idi.
Vücut pletismografıeSpira & trade; Zorunlu Manevra Sistemi, EMMS, Edinburgh, Birleşik KrallıkZorunlu Manevra SistemiBu cihaz, spirometri solunum fonksiyonunu test etmek için kullanılmıştır.
VantilatöreSpira ve ticaret; Zorunlu Manevra Sistemi, EMMS, Edinburgh, Birleşik KrallıkZorunlu Manevra SistemiBu cihaz, spirometri solunum fonksiyonunu test etmek için kullanılmıştır.
Slayt döndürücü santrifüjDenville Scientific, Holliston, MA, ABDC1183 & nbsp;BALF hücrelerini slaytlar üzerine döndürmek için kullanıldı.
Wright StainingHanhong, Şangay, ÇinRE04000054  Askıya alınan BALF'taki makrofajları, nötrofilleri boyamak için kullanıldı.
HemositometreHausser Scientific, Horsham, PA, ABD4000hücre saymak için kullanıldı.
IL-1 ve beta;Abcam, Cambridge, MA, ABDab100704Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar.
IL-10Abcam, Cambridge, MA, ABDab46103Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar.
TNF-&alfa;Abcam, Cambridge, MA, ABDab100747Serumdaki ilgili faktörleri test etmek için kullanıldılar.
Paraformaldehit Sigma, St. Louis, MO, ABDP6148Akciğer% 4 paraformaldehit ile şişirildi.
ParafinHualing, Şangay, Çin56#Akciğeri gömmek için kullanıldı.
Döner MikrotomLeica, Wetzlar,  Hessen, AlmanyaRM2255Akciğeri kesitlemek için kullanıldı.
Hgaematoksilen ve Eozin (H & E) boyama çözeltisiSolarbio, Pekin, ÇinG1120H & Morfometrik analiz için E boyama yapıldı.
Dik parlak alan mikroskobuOlympus, Center Valley, PA, ABDCX41H& E boyama slaytları.
Adobe Photoshop 12Adobe, San Jose, CA, ABDAdobe Photoshop 12H üzerindeki alveollerin sayısını saymak için kullanıldı. E lekeli görüntüler.
GraphPad prizma 5Graphpad Software Inc., San Diego, CAGraphPad prizma 5veri analizi ve rakamların üretimi için kullanılmıştır.
,

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Lozano, R., et al. Global and regional mortality from 235 causes of death for 20 age groups in 1990 and 2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010. Lancet. 380, 2095-2128 (2012).
  2. Chapman, K. R., et al. Epidemiology and costs of chronic obstructive pulmonary disease. Eur Respir J. 27, 188-207 (2006).
  3. Afonso, A. S., Verhamme, K. M., Sturkenboom, M. C., Brusselle, G. G. COPD in the general population: prevalence, incidence and survival. Respir Med. 105, 1872-1884 (2011).
  4. Rabe, K. F., et al. Global strategy for the diagnosis, management, and prevention of chronic obstructive pulmonary disease: GOLD executive summary. Am J Respir Crit Care Med. 176, 532-555 (2007).
  5. Ogata-Suetsugu, S., et al. Amphiregulin suppresses epithelial cell apoptosis in lipopolysaccharide-induced lung injury in mice. Biochem Biophys Res Communi. 484, 422-428 (2017).
  6. Oliveira, M. V., et al. Characterization of a Mouse Model of Emphysema Induced by Multiple Instillations of Low-Dose Elastase. Front Physiol. 7, 457(2016).
  7. Vernooy, J. H., Dentener, M. A., van Suylen, R. J., Buurman, W. A., Wouters, E. F. Long-term intratracheal lipopolysaccharide exposure in mice results in chronic lung inflammation and persistent pathology. Am J Respir Cell Mol Biol. 26, 152-159 (2002).
  8. Birrell, M. A., et al. Role of matrix metalloproteinases in the inflammatory response in human airway cell-based assays and in rodent models of airway disease. J Pharm Exp Ther. 318, 741-750 (2006).
  9. Gamze, K., et al. Effect of bosentan on the production of proinflammatory cytokines in a rat model of emphysema. Exp Mol Med. 39, 614-620 (2007).
  10. Vanoirbeek, J. A., et al. Noninvasive and invasive pulmonary function in mouse models of obstructive and restrictive respiratory diseases. Am J Respir Cell Mol Biol. 42, 96-104 (2010).
  11. Wright, J. L., Cosio, M., Churg, A. Animal models of chronic obstructive pulmonary disease. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 1-15 (2008).
  12. Huh, J. W., et al. Bone marrow cells repair cigarette smoke-induced emphysema in rats. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 301, 255-266 (2011).
  13. Schweitzer, K. S., et al. Adipose stem cell treatment in mice attenuates lung and systemic injury induced by cigarette smoking. Am J Respir Crit Care Med. 183, 215-225 (2011).
  14. Guan, X. J., et al. Mesenchymal stem cells protect cigarette smoke-damaged lung and pulmonary function partly via VEGF-VEGF receptors. J Cell Biochem. 114, 323-335 (2013).
  15. Gu, W., et al. Mesenchymal stem cells alleviate airway inflammation and emphysema in COPD through down-regulation of cyclooxygenase-2 via p38 and ERK MAPK pathways. Sci Rep. 5, 8733(2015).
  16. Cordasco, E. M., VanOrdstrand, H. S. Air pollution and COPD. Postgrad Med. 62, 124-127 (1977).
  17. Berend, N. Contribution of air pollution to COPD and small airway dysfunction. Respirology. 21, 237-244 (2016).
  18. DeVries, R., Kriebel, D., Sama, S. Outdoor Air Pollution and COPD-Related Emergency Department Visits, Hospital Admissions, and Mortality: A Meta-Analysis. COPD. 14 (1), 113-121 (2016).
  19. Penha, P. D., Amaral, L., Werthamer, S. Ozone air pollutants and lung damage. IMS Ind Med Surg. 41, 17-20 (1972).
  20. Stern, B. R., et al. Air pollution and childhood respiratory health: exposure to sulfate and ozone in 10 Canadian rural communities. Environ Res. 66, 125-142 (1994).
  21. Tager, I. B., et al. Chronic exposure to ambient ozone and lung function in young adults. Epidemiology. 16, 751-759 (2005).
  22. Romieu, I., Castro-Giner, F., Kunzli, N., Sunyer, J. Air pollution, oxidative stress and dietary supplementation: a review. Eur Respir J. 31, 179-197 (2008).
  23. Hemming, J. M., et al. Environmental Pollutant Ozone Causes Damage to Lung Surfactant Protein B (SP-B). Biochemistry. 54, 5185-5197 (2015).
  24. Chu, H., et al. Comparison of lung damage in mice exposed to black carbon particles and ozone-oxidized black carbon particles. Sci Total Environ. 573, 303-312 (2016).
  25. Jin, M., et al. MAP4K4 deficiency in CD4(+) T cells aggravates lung damage induced by ozone-oxidized black carbon particles. Environ Toxicol Pharmacol. 46, 246-254 (2016).
  26. Brusselle, G. G., Joos, G. F., Bracke, K. R. New insights into the immunology of chronic obstructive pulmonary disease. Lancet. 378, 1015-1026 (2011).
  27. Valavanidis, A., Vlachogianni, T., Fiotakis, K., Loridas, S. Pulmonary oxidative stress, inflammation and cancer: respirable particulate matter, fibrous dusts and ozone as major causes of lung carcinogenesis through reactive oxygen species mechanisms. Int J Environ Res Public Health. 10, 3886-3907 (2013).
  28. Medina-Ramon, M., Zanobetti, A., Schwartz, J. The effect of ozone and PM10 on hospital admissions for pneumonia and chronic obstructive pulmonary disease: a national multicity study. Am J Epidemiol. 163, 579-588 (2006).
  29. Lee, I. M., Tsai, S. S., Chang, C. C., Ho, C. K., Yang, C. Y. Air pollution and hospital admissions for chronic obstructive pulmonary disease in a tropical city: Kaohsiung, Taiwan. Inha Toxicol. 19, 393-398 (2007).
  30. Triantaphyllopoulos, K., et al. A model of chronic inflammation and pulmonary emphysema after multiple ozone exposures in mice. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 300, 691-700 (2011).
  31. Li, F., et al. Effects of N-acetylcysteine in ozone-induced chronic obstructive pulmonary disease model. PLoS ONE. 8, e80782(2013).
  32. Li, F., et al. Hydrogen Sulfide Prevents and Partially Reverses Ozone-Induced Features of Lung Inflammation and Emphysema in Mice. Am J Respir Cell Mol Biol. 55, 72-81 (2016).
  33. Rycroft, C. E., Heyes, A., Lanza, L., Becker, K. Epidemiology of chronic obstructive pulmonary disease: a literature review. Int J Chron Obstruct Pulmon Dis. 7, 457-494 (2012).
  34. Washko, G. R., et al. Airway wall attenuation: a biomarker of airway disease in subjects with COPD. J Appl Physiol. 107, 185-191 (2009).
  35. Yamashiro, T., et al. Quantitative assessment of bronchial wall attenuation with thin-section CT: An indicator of airflow limitation in chronic obstructive pulmonary disease. AJR Am J Roentgenol. 195, 363-369 (2010).
  36. Tang, X., et al. Arctigenin efficiently enhanced sedentary mice treadmill endurance. PLoS ONE. 6, e24224(2011).
  37. Schmidt, G. A., et al. Official Executive Summary of an American Thoracic Society/American College of Chest Physicians Clinical Practice Guideline: Liberation from Mechanical Ventilation in Critically Ill Adults. Am J Respir Crit Care Med. 195, 115-119 (2017).
  38. ATS Committee on Proficiency Standards for Clinical Pulmonary Function Laboratories. ATS statement: guidelines for the six-minute walk test. Am J Respir Crit Care Med. 166, 111-117 (2002).
  39. Shigemura, N., et al. Autologous transplantation of adipose tissue-derived stromal cells ameliorates pulmonary emphysema. Am J Transplant. 6, 2592-2600 (2006).
  40. Bchir, S., et al. Concomitant elevations of MMP-9, NGAL, proMMP-9/NGAL and neutrophil elastase in serum of smokers with chronic obstructive pulmonary disease. J Cell Mol Med. , 1-12 (2016).
  41. Fricker, M., Deane, A., Hansbro, P. M. Animal models of chronic obstructive pulmonary disease. Expert Opin Drug Discov. 9, 629-645 (2014).
  42. Perez-Rial, S., Giron-Martinez, A., Peces-Barba, G. Animal models of chronic obstructive pulmonary disease. Arch Bronconeumol. 51, 121-127 (2015).
  43. Antunes, M. A., et al. Effects of different mesenchymal stromal cell sources and delivery routes in experimental emphysema. Respir Res. 15, 118(2014).
  44. Celli, B. R., MacNee, W., Force, A. E. T. Standards for the diagnosis and treatment of patients with COPD: a summary of the ATS/ERS position paper. Eur Respir J. 23, 932-946 (2004).
  45. U.S. Preventive Services Task Force. Screening for chronic obstructive pulmonary disease using spirometry: U.S. Preventive Services Task Force recommendation statement. Ann Intern Med. 148, 529-534 (2008).
  46. Ward, R. E., et al. Design considerations of CareWindows, a Windows 3.0-based graphical front end to a Medical Information Management System using a pass-through-requester architecture. Proc Annu Symp Comput Appl Med Care. , 564-568 (1991).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Ozon Maruziyet ModeliFare KOAH ModeliAkci er Fonksiyon De erlendirmesiMikrobilgisayarl TomografiV cut PletismografEgzersiz Tolerans TestiBronkoalveoler LavajKardiyak Kan rneklemesiParaformaldehit Fiksasyonu

İlgili makaleler