Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Boğaza aşılama, Fischer 344 farelerle FRANCISELLA tularensis

6.6K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/56123

⸱

30 Eylül 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu iletişim kuralı boğaza aşılamalar Fischer 344 sıçan ile açıklar FRANCISELLA tularensis. Bu yordamı insanlar pulmoner maruz kalma bu potansiyel biothreat Ajan taklit eder ve aşı ve tedavi edici etkinliği pulmoner Tularemi karşı test etmek için kullanılabilir.

Özet

Pulmoner enfeksiyon bakteri FRANCISELLA tularensis ile ciddi ve ölümcül hastalık, Tularemi, insanlarda yol açabilir. Bir onaylanmış Tularemi aşısı insanlar için geçerli olmaması nedeniyle araştırma uygun hayvan modelleri kullanan aşı geliştirme üzerine odaklanmıştır. Fischer 344 sıçan F. tularensis enfeksiyon insan duyarlılık yansıtır ve bu nedenle Tularemi aşısı geliştirme için çekici bir model bir model olarak ortaya çıkmıştır. F. tularensis Fischer 344 fareyle boğaza aşı insanlarda akciğer pozlama taklit eder. Sıçan nefes borusu içine başarılı teslimat Akciğer teslimat için önemlidir. Laringoskop aydınlatma ile düzgün imzalat sıçan tracheae entübasyon için kullanılır; Nefes borusu içinde doğru bulma nefes algılamak için basit bir aygıt tarafından belirlenir. Entübasyon, F. tularensis kültürü şırınga ile ölçülen bir doz teslim edilir. Bu teknik aşısı etkinliğini değerlendirmek için fare nefes borusu içinde F. tularensis pulmoner teslim standartlaştıran.

Giriş

F. tularensis (Ft) insan hastalık nedenleri Tularemi. Bakteriler akciğer yönlendirme yolu iktisap zaman, bu yüksek morbidite ve mortalite1öğretilenbir Tularemi için yol açar. F. tularensis aerosolize formlarla ilişkili tehlike nedeniyle bir biothreat ajan olarak kabul edilir ve şu anda ABD'de insan kullanımı için onaylanan aşı Yoğun bir çaba aşı ve bu bakteriyel biothreat insan nüfusu ve yasadışı kullanıma karşı korumak için öğretilenbir Tularemi karşı tedavi edici önlemler geliştirmek için şu sıralar başlatıldı.

Tularemi araştırma çoğunu fareler F. tularensis enfeksiyon için aşırı duyarlıl....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu iş için bakım ve kullanım laboratuvar hayvanları Ulusal Sağlık Enstitüleri Kılavuzu'nda bulunan öneriler ile sıkı uygun olarak gerçekleştirildi. Kemirgenler içeren hayvan iletişim kuralları onayladı tarafından University of Texas San Antonio kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) iletişim kuralı'nı MU009(RA).

1. kateter hazırlamak, Trakea göstergesi ve F. tularensis Inoculum

  1. Hazırlamak kateter (20 G x 2 inç)
    1. 20 G x 2 iğne ve künt ve düz iğne ucu bitirmek ile eziyet kesilmiş bir döner aracı.
      Not: Körelmenin iğne uzunluğu yaklaşık 3 mm zaman tamamen körelmenin iğne oturmuş k....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

F. tularensis boğaza aşı içinde fare humoral yanıt enzim bağlı immunosorbent assay (ELISA) bakteri, UV-inaktive karşı tarafından belirlenen11daha önce açıklandığı gibi. Toplam immünoglobulin G (IgG) Fischer 344 sıçan Inaktif tüm cep telefonu bakteri öldürülmesinin biçilen post-boğaza aşılama ile Fn bir zayıflatılmış strain (107 CFU inoculum) 14 gün ve gün 28 (şekil 1). Sahte aşı fareler PBS intratracheally aldı. Ser.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Fischer 344 sıçan Tularemi aşısı geliştirme3için önemli bir model haline geliyor. Bunlar aerosoller teslim edildiğinden F. tularensis maruz pulmoner rota üzerinden weaponized F. tularensis, türlü karşı etkinlik gösteren için önemlidir. Farenin boğaza aşılama maruz sıçan akciğerlerinin F. tularensis ekipmanları üreten büyük, pahalı ve karmaşık aerosol gerek kalmadan kolaylaştırır. F. tularensis seçin Aracısı formları Ayrıca kullanan tüm deneylerin genellikle cidd.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa yoktur

Teşekkürler

Bu çalışmada sözleşmeli HDTRA1-14-C-0116 savunma tehdit azaltma Ajansı (DTRA) ve enfeksiyon genomik (DOD #W911NF-11-1-0136) mükemmellik merkezi tarafından desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
GreenLine fiber optik bıçak boyutu 0Carefusion5-5231-00Macintosh Amerikan profili
GreenLight sistemi laringoskop koluCarefusion4559GSP
Exel International Safelet I.V. KateterEXEL INTERNATIONAL26743
Kayma Uçlu Steril Şırıngalar 1mLBD309659
Geniş Nokta Pansuman Başparmak ForsepsTermo Bilimsel76-302
200 μ L bariyer ucuGeneseeScientific24-142
1.000 μ L pipet ucuOlympus Plastics24-173
Dremel 3000-2/28 Döner alet kitiDremel3000228
Kemirgen Entübasyon StandıBraintree ScientificRIS 200
İzofluranButler ScheinNDC 11695-6776-2
Kemirgen anestezi makinesiSurgivetVTC302 Klasik T3
Kemirgen Anestezi odasıBraintree BilimselAB 1

Kaynaklar

  1. Ellis, J., Oyston, P. C. F., Green, M., Titball, R. Tularemia. Clin Microbiol Rev. 15 (4), 631-646 (2002).
  2. Lyons, C. R., Wu, T. H. Animal models of Francisella tularensis infection. Ann N Y Acad Sci. 1105, (2007).
  3. Hutt, J. A., Lovchik, J. A., Dekonenko, A., Hahn, A. C., Wu, T. H.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Fischer 344 SıçanPulmoner TularemiAşı EtkinliğiLaringoskopik EntübasyonTrakeal Kateter YerleştirmeELISA Antikor YanıtıAerosol Bariyer FiltresiKemirgen Entübasyon Standı