$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Tüm yöntem tanımlamak burada: Hong Kong bir yerel klinik araştırmalar Etik Komitesi tarafından onaylanmış olan.
Not: kolaylık sağlamak için Tablo reçetesi listelenen ekipman retina görüntüleme ve daha sonraki analiz prosedürleri göstermek için kullanılır. Retinal vasküler parametrelerinin ölçüm Singapur I gemi değerlendirme programı (ŞİVA) 17 (sürüm 4.0, ulusal Singapur Üniversitesi, Singapur) kullanarak gösterilmiştir. Ancak, bu temel ilkeleri benzer kalması gibi ekipman farklı bir dizi kabul edilmesi unutulmamalıdır.
1. konular retina görüntüleme için hazırlamak
- Dilate konular ’ mydriatic agent'ı kullanarak öğrenciler. Yeterli Gözbebeklerin büyümesinden kurmak en az 15 dakika bekleyin.
2. Ölçmek Retinal vasküler parametrelerinden Fundus fotoğrafları kullanarak bir bilgisayar destekli analiz programı
Resim 1: Retinal vasküler parametrelerini ölçme prosedürleri gösteren şematik diyagramı. (A) elde edilir optik disk merkezli fundus fotoğrafları bir fundus kamera ile. şekil 1A ve şekil 2A iki fundus fotoğrafları en iyi kalite ile vardır. (B) fundus fotoğraf bulut tabanlı sunucuya Upload ve görüntü dönüştürme faktörü (ICF) dahil olmak üzere ilgili çalışma ayrıntıları girin. Diğer bilgisayar destekli analiz programları düzenlemek ve stok belgili tanımlık imge için bulut tabanlı olmayan yöntemler kullanabilir. (C) açık bilgisayar destekli analiz programı fundus fotoğrafı. (D) Mark optik disk merkezinin konumu ve (E) istemi otomatik olarak optik disk kenarında bir ölçüm ızgara yer için belgili tanımlık bilgisayar yazılımı. Damar tracings damar yollarında dayalı ve gemi koymak (F) yapı damarlarının çapları tahmin etmek için kapsar. Yanlış gemi tracings ve gemi kapsar el ile (G) ayarlama. Gemi kalibre, tortuosity, fraktal boyut ve çatallanma dahil olmak üzere retina vasküler parametreleri (H) ölçüsü bir spektrum. Adım (F) ve (H) adım adım (D) bazı analiz bilgisayar destekli programlar tarafından otomatik olarak gerçekleştirilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- Yakalamak bir fundus kamera ile fundus fotoğraf.
- Dönüş fundus kamera ve görüntü yakalama başlatma programı bilgisayarda. Konu çene düzgün chinrest ile baş kayışı karşı alın üzerine getirin. Işık demeti konuya düzgün hizalamak için denetimi mandalını ’ s öğrenci.
Hem de en küçük vizör her iki tarafta görününceye kadar - aydınlatma noktalar hizalanır. Konu Kılavuzu için eksternal fiksasyon hedef hareket ’ s gözleri optik disk vizör merkezindedir ve faiz (ROI) bölgeleri de sınırları içinde kadar. Retina üzerinde odaklanmaya odaklama düğmesi ayarlamak.
- Sıkıca eksternal fiksasyon hedefe bak ve konu sağlamak konu ’ gözleri yaşlarla dolu değildir.
- Bir görüntü ( resim 1A) yakalamak için deklanşöre düğmesi düşürmek.
- Yakalanan, şekil 2A standart olarak kullanarak fundus fotoğraf kalitesini kontrol edin. Görüntü atmak ve öğrenci kötü ise görüntü alma işlemi (yani, adım 2.1.1-2.1.4) tekrar dilate ( şekil 2B), optik disk görüntü ( şekil 2C), merkezinde değil veya odak ( şekil 2B) dışında görüntüdür.
- Mecburıyete çözünürlük (Yani, yaklaşık 3000 piksel x 2,000 piksel, daha--dan 150 dpi) ile TIFF formatında görüntü kaydedin.
Not: Burada protokol duraklatılmış.
- Tekrar fundus fotoğrafları diğer konular için elde etmek için adımlar 2.1.1-2.1.6.
- % 10 örnek görüntülerin rastgele seçin ve bu görüntüler ( şekil 3) optik diskler yüksekliğini ölçmek. Görüntü dönüştürme faktörü (ICF) formülü kullanarak hesaplar:
ICF 1.800 µm = / (ortalama piksel Yükseklik örneklenmiş görüntülerin optik disk).
- Yakalanan fundus fotoğraf bulut tabanlı sunucuya upload ve görüntü dönüştürme faktörü (ICF) ( şekil 1B) dahil olmak üzere ilgili çalışma ayrıntılarını girin.
Not: Protokol burada duraklatılmış. Diğer bilgisayar destekli analiz programları görüntüleri düzenlemek ve ICF kaydetmek için bulut tabanlı olmayan diğer yöntemleri kullanabilirsiniz.
Şekil 2: en iyi ve suboptimal kalitesi ile Fundus fotoğraf. Görüntü kalitesi, doğrudan retinal vasküler parametreleri sonraki ölçüm etkiler fundus fotoğraf makinesinin görüntü kalitesi hemen sonra resim alma, iade edilmesi gerekir. Bu eserler birini gözlem yapılırsa görüntü atılmalıdır. Bu görüntüler bir 50 ° fundus kamera ile ele geçirildi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
şekil 3: görüntü dönüştürme faktörü (ICF) hesaplanması. ICF hesaplamak için rasgele çalışması (Adım 1) görüntüleri % 10 örneği seçin. O zaman, ölçü yüksekliği (piksel cinsinden) optik disk görüntüleri (Adım 2) örneklenmiş. ICF formülü kullanarak hesaplar: ICF 1800 µm = / (ortalama piksel Yükseklik örneklenen görüntülerin optik disk), normal bir optik disk (Adım 3) yüksekliği yaklaşık 1800 µm nerede. Kamera kamera büyütme etkisi ve görüntü çözünürlüğü farklı olarak kullanılan her bir kamera için doğru bir ICF hesaplamak gereklidir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- bir bilgisayar destekli analiz programında fundus fotoğrafı açın. Gemi tracings oluşturmak ve yatıyordu retina damarlara gemi kapakları.
Not: Bu bölümde, SIVA program işlemleri göstermek için kullanılır. Ancak, SIVA programın diğer kullanılabilir bilgisayar destekli analiz programları tarafından yedek olabilir. Buna ek olarak, adımlar 2.2.2-2.2.3 otomatik olarak gerçekleştirilir göre bazı bilgisayar destekli analiz fundus fotoğrafı ne zaman programları (Yani adım 2.2.1) açıldı.
- ( şekil 1 c) bilgisayar destekli analiz programı ile fundus fotoğrafı açın.
- ( şekil 1 d) optik disk Merkezi konumunu işaretleyin.
- 'I tıklatın “ OD Merkezi ” düğme left işlevini panelde; fare imlecini yeşil bir daire tarafından değiştirilir.
- Yeşil Daire optik disk (OD) merkezine taşımak ve daire düzeltmek için sol tıklayın.
Yazılım otomatik olarak ölçüm kılavuz yerleştirin, gemi tracings ve la oluşturmak için - sory gemi kapakları ( şekil 1E ve 1F).
Not: Gemi kapakları damarlarının iç Lümen yaklaşık genişliği tahmin ölçü çizgileri vardır.
- 'I tıklatın “ OD bulmak ” OD RIM algılamak ve OD Merkezi konumuna bağlı bir ölçüm kılavuz olarak dört çemberler yerleştirmek için belgili tanımlık bilgisayar yazılımı-e sevketmek için düğmesini.
- 'I tıklatın “ işlem ” otomatik gemi izleme işlemi başlatmak için düğmesini.
- Ayarlama yanlış gemi tracings el ile. Muayene 12 başlar o ’ saat tüm gemi tracings doğrulanır emin olmak için saat yönünde bir şekilde pozisyon.
- Optik disk doğru algılanır ve ölçüm kılavuz doğru bir şekilde yerleştirildi kontrol edin. En içteki daire doğru optik disk RIM ( şekil 4A) anahatlarını göstermez el ile aşağıdaki adımları 2.2.2 2.2.3 için ölçüm kılavuz ayarlamak.
- Yanlış gemi türü (venüller karşı arteriyoller) ile etiketli gemi tracing(s) seçin ve tıklayın bıraktı “ gemi (T) türü ” gemi türü değiştirmek için düğmeyi.
Not: Arteriyoller kırmızı etiketli ve venüller mavi etiketli. Arteriyoller fizyolojik farklılıklarını dayalı venüller üzerinden ayrılır. Örneğin, venüller genellikle koyu renkli ve arteriyoller daha geniş. Gemi ile aynı gemi türü genellikle birbirine çapraz değil.
- Genişlet eksik gemi tracings tabi merdiven 2.3.3.1 için 2.3.3.2 ( 4B rakam).
Eksik gemi izleme distal sonunu tıklatın için
- kullanmak imleç
. Gemi izleme genişletmek için gemi yol boyunca noktalarda tıklayın bıraktı.
Gemi distal sonuna ulaşıldığında - izleme işlemini durdurun. Gemi distal parçası dışında ölçüm kılavuz düşerse en dıştaki beyaz daire, izleme durdurma (bkz. şekil 4B).
- Damar tracings damar yolları doğru çapraz site ( şekil 4 c) takip değil ayarlamak.
- Tıklayın “ seçin ” düğmesini tıklatın ve sonra gemi izleme yanlış noktasında tıklatın. ' I tıklatın “ Brea(k) Seg ” gemi izleme seçilen noktada kesmek için düğme. Bağlantısı kesilen segmenti seçin ve'ı tıklatın “ (Del) Seg ” onu silineceği düğmesi
- Adım 2.3.3.1 ve 2.3.3.2 kullanarak yeni bir gemi izleme yeniden inşa.
şekil 4: Ortak hatalar otomatik izleme. Otomatik gemi izleme tamamen doğru değildir ve manuel olarak ayar ölçüm doğruluğunu sağlamak için gereklidir. Bu rakam otomatik izleme ortak hataları gösterir ve en iyi sonuçlar manuel olarak ayar sonra gösterir. (A) optik disk Merkezi yanlış damgalı ve sapma sonraki ölçümler etkileyebilir ölçüm kılavuzunun bu yol. İdeal olarak, en içteki ölçüm kılavuzunun optik disk RIM Dış Çizgili Daire. (B) eksik gemi izleme fraktal boyut, tortuosity, vb damar yolu taşıyıcıyı sonuna kadar izlenen yanlış ölçüm neden olabilir. Gemi distal parçası dışında ölçüm kılavuz düşerse, izleme en dıştaki beyaz daire durdurulabilir. Tracings crossover sitelerdeki hata daha yüksek bir eğilim tabidir ve böylece özel dikkat gerektirir (C) gemi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- gemi kapakları tüm gemi kesimlerinde yatıyordu ve yanlış kapakları el ile devre dışı bırakın.
- 'I tıklatın “ bulmak kapsar ” gemi kapakları tüm gemi kesimlerinde otomatik olarak düzenlemek için düğme.
- Tüm gemi kapakları doğru bir şekilde yerleştirildi Eğer kontrol edin. Sol tıklayın ve sürükleyin kapakları olmayan gemi devre dışı bırakmak için imleci kapsar koydu dikey olarak gemi duvarları ( şekil 5A), damar yolu başka bir gemi ( şekil 5B), tarafından obscured veya kapakları abartma ya da gemi Lümen ( şekil 5C) genişliğini hafife.
şekil 5: yanlış gemi kapsar. Bu şekilde devre dışı ve sonraki ölçüm hariç yanlış gemi kapakları örnekleri gösterilmektedir. Gemiler (a) dikey değillerse gemi kapakları devre dışı. Ayrıca, eğer izlenen gemi başka bir gemi (B) altında gizlenmiş gemi kapakları da devre dışı veya gemi kapakları gemi (C) yaklaşık genişliğini temsil olamaz. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- gemi tracings ve gemi kapakları retinal vasküler parametreleri ölçmek
Not: adım 2.5 bilgisayar destekli analiz program tarafından otomatik olarak yapılır.
Bölge B ve alanı 0.5-2.0 disk çapı olarak bölge C 18 ( şekil 6A), optik disk kenar boşluğu uzak olarak optik disk kenar boşluğu uzak - Etiket alanı 0.5-1.0 disk çapı göre Ateroskleroz risk topluluklar (ARIC) değiştirilmiş Protokolü çalışma 19.
19 , 20 , 21 , - ölçü retinal vasküler kalibre bölge B ve bölge C ARIC değiştiren bir yaygın kabul yöntemi kullanarak, çalışma 22 , 23 , 24 , 25 , 26 ( şekil 6B).
- Gemi kapakları altı büyük arteriyoller ve retinal damar kalibre tahmin etmek için altı büyük venüller uzunlukları ölçmek.
- Retina arterioler özetlemek ve venular kalibre (CRAE) santral retinal arter eşdeğer olarak ve merkezi retinal damar eşdeğer (CRVE) sırasıyla 17 revize Knudtson kullanarak, – Parr-Hubbard formülü 18 , 19.
- ile C bölgedeki tüm gemileri tanımlamak bir genişliği > 40 µm. retina arterioler ve venular tortuosity üzerinden toplam kare eğriliği gemi tracings boyunca integrali hesaplayın ve değeri toplam yay uzunluğu, Selam ve dönüm noktaları ile normale 27 , 28.
- Toplam, arterioler, hesaplamak ve venular fraktal boyutları kurulan kullanarak C bölgesinden “ kutusunu sayma yöntemi ” 29 , 30 , 31.
- Görüntü eşit büyüklükte kareler bir dizi bölmek.
- Gemi tracings bir bölümünü içeren kutuları saymak.
- Farklı boyutları ile eşit büyüklükte kareler bir dizi kullanarak işlemi tekrarlayın.
- Gemi tracings kutularını boyutu logaritması karşı içeren kutuları sayının logaritması arsa ve elde edilen çizgisinin eğimini hesaplayın; Bu fraktal boyut olduğunu.
- Damarları ilk çatallanma bölgesinde C ile tanımlamak ve hesaplamak belgili tanımlık ilk iki kızı damarları 32 arasında ( şekil 6C) subtended açılar (θ). Ortalama dallanma açısı elde etmek için ortalama değeri hesaplamak.
- Hesaplama formülü kullanarak C bölgesinden dallanma katsayısı:
(d 1 2 + d 2 2) nerede d 0 ortalama gövde kalibre ve d 1 ve d 2 ortalama şube kalibre ( şekil 6C) / d 0 2,.
- Sınıflandırma penceresini kapatın. ' I tıklatın “ göndermek ” kademeli resim bulut tabanlı sunucuya yükleme ve otomatik olarak ölçülen retinal vasküler parametreleri kaydetmek için açılan iletişim içinde.
şekil 6: Retina damarlara Quantification. (A) bölge B (0.5-1.0 tanımlanan disk çapı disk kenar boşluğu uzak) gemi kalibre bölgesi B topluluklar çalışmada ateroskleroz Risk göre ölçmek için kullanılır. Bölge C (0.5-2.0 tanımlanan disk çapı disk kenar boşluğu uzak) gemi kalibre Bölgesi C ve retinal vasküler ağ parametreleri (örneğin, tortuosity, fraktal boyut ve çatallanma) bir spektrum ölçmek için kullanılır. (B) gemi kapakları retinal damar kalibre (veya çapları) tahmin etmek için kullanılan ölçü çizgileri vardır. Yanlış gemi kapakları el ile ölçü tutulmalıdır. Onların ilk çatallanma içinde var tüm gemileri C, program otomatik olarak bölge için (C) ilk çatallanma dallanma açıları (θ) ölçer. Buna ek olarak, dallanma katsayısı da formül kullanılarak hesaplanır: dallanma katsayısı = (d 1 2 + d 2 2) / d 0 2 gövde kalibre ve d 1 ve d nerede d 0, 2 şube kalibre vardır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
3. kalınlığı GC-IPL ve RNFL değerlendirmek

Şekil 7: RNFL ve GC-IPL kalınlık ölçüm işlemleri gösteren şematik diyagramı. Optik Koherens tomografi (OCT) ganglion hücre-iç Pleksiform tabaka (GC-IPL) ve (RNFL) retina Sinir lifi tabakası kalınlıkları ölçmek için kullanılabilir. (A, B) Yerleşik kullanarak GC-IPL ve RNFL kalınlıklarını ölçmek “ maküler küp ” ve “ optik disk küp ” sırasıyla protokolleri tarama. (C, D) Görüntü kalitesi hemen resim alma sonra kontrol edin. Görüntü atmak ve sinyal gücü 6'dan daha küçük veya hareket eserler tespit tarama işlemini yineleyin. (E, F) O zaman, yapılı program otomatik olarak tarama sonucu analiz ve yorum için bir rapor üretmek için-e sevketmek. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- Optik Koherens tomografi (OCT) kullanarak resim alma gerçekleştirmek.
- OCT programı açın ve seçin “ maküler küp ” protokolü yeni makula ( şekil 7A) başlatmak için tarama.
- Öğrenci chinrest ayarlayarak Iris viewport'un bulun. Öğrenci boyutu çok küçük ise daha düşük aydınlatma.
- 'I tıklatın “ otomatik odaklama ” düğmesini ve sonra “ en iyi duruma getir ” görüntü kalitesini artırmak için düğmesini.
- Konu hemen tarama başlamadan önce bir kaç kez göz kırp için talimat.
- Tıklama “ yakalama ” düğme-e doğru belgili tanımlık düğme çevresindeki kenarlığı yeşil olduğunda tarama başlatın. Resim alma sırasında hareket eserler önlemek için görsel fiksasyonu hedef üzerinde odaklanmaya konu talimat.
- şekil 7C standart olarak kullanarak tarama kalitesini gözden geçirin. Tarama sonucu atmak ve sinyal gücü 6 ( şekil 8A) küçüktür veya hareket eserler (kan damarlarının süreksizlik tarafından gösterilen) algılanır tarama işlemini yineleyin ( şekil 8B).
- Tarama sonucu Kaydet.
- Tekrar adımları 3.1.1-3.1.7 başka bir göz için.
- Bir optik sinir başı tarama gerçekleştirmek “ optik disk küp ” iletişim kuralı aşağıdaki tarama adımları 3.1.2 için 3.1.9 ( rakamlar 7B ve 7 D).
şekil 8: alt-optimal optik Koherens tomografi sonuçlarını. Optik Koherens tomografi (OCT) ortak alt-optimal sonuçlar içerir (a) zayıf sinyal gücü (kuvvet değerini < 6) ve (B) hareket eserlerin. Tarama kalitesi hemen resim alma sonra gözden geçirilmesi gereken ve inceden inceye gözden geçirmek-meli var olmak bu eserler karşılaşılan tekrarladı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
- maküler GC-IPL kalınlığı bir analiz çıktısını oluşturmak.
- Seçin “ maküler küp ” tarama analizi arayüzü gözlerinden kayıtlarının.
- Tıklama “ Ganglion hücre OU analiz ” tarama ( şekil 7E) GC-IPL kalınlığı değerlendirmek için otomatik olarak analiz algoritması başlatmak için.
Not: Adım 3.2.2 çözümleme algoritması tarafından otomatik olarak doldurulur.
- Oluşturmak sırasıyla yatay iç ve dış yarıçap 0.6 mm ve 2.4 mm olan bir 14.13 mm 2 fovea merkezli eliptik halka ve 0,5 mm ve 2.0 mm, dikey iç ve dış yarıçap sırasıyla.
Not: Boyutu ve eliptik halka şeklinde yakından makula Anatomi için uygun ve böylece RGCs normal gözleri 33 , 34 kalın nerede alanına karşılık gelir. GC-IPL bu alanda çok ince olduğu gibi halka iç halka içinde alan, ölçülen değildir.
- RNFL dış kenarlığını ve iç Pleksiform tabaka (IPL) GC-IPL ( Şekil 9) bulmak için dış kenarlığını segment.
- Ölçmek ortalama, en az ve sektörel altı (üstün, superotemporal, superonasal, inferonasal, düşük kaliteli, inferotemporal) makula GC-IPL fovea cen içinde kalınlıklarıIdari eliptik halka.
- Ölçülen GC-IPL kalınlıkları aygıtına karşılaştırmak ’ s normatif yaş eşlemeli iç veritabanı ve bir sapma harita ve bir önemi harita oluşturmak
- Bir analiz baskı üzerinde ölçüm sonuçları raporu.
- Analiz çıktının .pdf formatında kaydedin.

Şekil 9: Retina katmanları için kullanılan Retina nöronal yapısı değerlendirmesini. Retina sinir fiber tabaka (RNFL) ganglion hücre-iç Pleksiform tabaka ganglion hücre analizi (GCA) algoritması kullanılarak ölçülür ise optik sinir baş (ONH) algoritması kullanılarak ölçülür. ONH algoritması RNFL kalınlığını ölçmek için RNFL iç ve dış kenarlığını kesimleri. Retina Sinir lifi tabakası (RNFL) ve iç Pleksiform tabaka ganglion hücre Katmanı (un) kombine kalınlığı vermeye (IPL) dış kenarlığını GCA algoritma algılar ve IPL. UN ve IPL arasındaki sınır anatomik olarak belirsiz olduğu gibi un ve IPL kalınlıkları birlikte, ölçülür. Ancak, un ve IPL (Yani GC-IPL) kombine kalınlığını hala RGCs. sağlık göstergesidir Bu daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız şekil.
- RNFL kalınlığı ( şekil 7F) analiz çıktısını oluşturmak.
- Seçin “ optik disk küp ” tarama analizi arayüzü gözlerinden kayıtlarının.
- Tıklama “ ONH ve RNFL OU analiz ” tarama RNFL kalınlığı değerlendirmek için otomatik olarak analiz algoritması başlatmak için.
Not: Adımları 3.3.2.1-3.3.2.6 otomatik olarak analiz algoritması tarafından tamamlanabilir.
- RNFL kalınlığı, her bir tarama noktada ölçmek ve bir RNFL kalınlık Haritası oluşturma.
- Tanımlama karanlık bir nokta boyutu ve şekli bir optik disk aralığı ile tutarlı olan tarama merkezine yakın tespit tarafından optik disk
- Çevresinde RNFL kalınlık haritası üzerindeki optik disk çapı 3.46 mm Ölçüm kılavuz konumlandırın.
- Ölçü ve küresel, dört-çeyrek dairelerin (zamansal, üstün, burun ve daha aşağı), hesaplamak ve on iki-saat-saat parapapillary RNFL kalınlıkları ölçüm kılavuzunun.
- Ölçülen RNFL kalınlıkları aygıtına karşılaştırmak ’ s normatif yaş eşlemeli iç veritabanı ve bir sapma harita ve bir önemi harita oluşturmak.
- Bir analiz baskı üzerinde ölçüm sonuçları raporu.
- Analiz çıktının .pdf formatında kaydedin.