Biz bir non-invaziv multimodal bleomycin Çift Kişilik boğaza korumak tarafından indüklenen fare akciğer fibrozis modelinin boyuna değerlendirmesi için mikro-CT ve floresan moleküler tomografi dayalı yaklaşım Imaging tanımlamak.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Yaklaşım Imaging Multimodal Bleomycin kaynaklı akciğer fibrozis farelerde boyuna değerlendirmesi için mikro-CT ve floresan moleküler tomografi dayalı
Bu makalede
Özet
Özet
İdiyopatik Pulmoner Fibrozis (IPF) akciğer fonksiyon ve solunum yetmezliği nedeniyle sonraki ölüm önemli bozulma nedenleri akciğer mimari, ilerici ve geri dönüşü olmayan imha ile karakterize bir ölümcül akciğer hastalığıdır.
Deneysel hayvan modelleri IPF patogenezinde bleomycin idare tarafından indüklenen. Bu çalışmada, bir çift boğaza bleomycin korumak tarafından indüklenen bir IPF benzer fare modeli araştırıyoruz. Standart histolojik Değerlendirmeler akciğer fibrozis çalışmak için kullanılan invaziv terminal işlemlerdir. Bu eser amacı akciğer fibrozis floresan moleküler tomografi (FMT) ve mikro-CT gibi noninvaziv görüntüleme teknikleri izlemektir Bu iki teknoloji Histoloji bulguları ile doğrulanmış gerçek zamanlı izleme non-invaziv IPF hastalık şiddeti ve ilerleme için devrimci bir fonksiyonel yaklaşım temsil edebilir. Farklı yaklaşımlar füzyonu nerede patolojik bir durumda oluşan moleküler olaylar ile FMT görülebilir ve sonraki anatomik değişiklikler mikro-CT tarafından izlenebilir IPF hastalığı anlamak için bir adım daha ileri temsil eder.
Giriş
İdiyopatik Pulmoner Fibrozis (IPF) ne yazık ki sık sık tanı1dört yıl içinde ölümcül akciğer fonksiyonları progresif azalma ile kronik akciğer hastalığı var. Hücre dışı matriks ifade ve fibroblast proliferasyonu IPF en önemli özellikleri vardır, ama Patogenez henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Birden fazla döngüleri akciğer yaralanmalara yol açar değişiklik Mezenkimal hücre döngüsü yayılması, abartılı birikimi fibroblastlar ve myofibroblasts, alveoler epitel hücreleri imha neden en desteklenen hipotezdir ve artan matris üretim. Arabulucu gibi matriks metalloproteinazların (MMPs) dysregulated fibrozis gelişiminde insan IPF veya hayvan modellerind....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Burada açıklanan tüm hayvan deneyleri Chiesi Farmaceutici ve ERASMUS MC hayvan deney protokol numarası altında intramural hayvan refahı Komitesi tarafından kabul edildi: EMC Avrupa Yönergesi 2010/63 UE ile uymak 3349 (138 / 14 / 07) İtalyan D.Lgs 26/2014 ve yeniden düzenlenen "Kılavuzu için bakım ve kullanım of Laboratory Animals"23.
Not: kullanılmadan önce kadın doğuştan C57Bl/6 (7-8 haftalık) fareler en az 7 gün yerel vivaryum koşullarına acclimatized (Oda sıcaklığı: 20-24 ° C; bağıl nem: % 40-70; 12-saat koyu döngüsü), standart kemirgen chow ücretsiz erişimine ve yumuşatılmış su dokunun.
....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Akciğer fibrozis lezyonların spontan çözünürlük üç hafta sonra tek bleomycin yönetim ve ılımlı yapısal değişiklikler sınırları bu modelin vurgulamak görülmektedir. Sadece koruyucu tedavi klinik pratikte17temsil etmiyor dar terapötik pencere nedeniyle gerçekleştirilebilir.
Burada, Çift Kişilik bleomycin boğaza korumak bizim protokolünden uzun süreli akciğer fibrozis fareler18de geli.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
IPF tedavi etmek için yeni ilaçların geliştirilmesi üzerinde odaklanan birçok araştırma grupları rağmen şu anda sadece iki hasta için kullanılabilir. Bir acil tıbbi gerek çünkü daha etkili tedaviler7 bulmak sadece akciğer transplantationis 4-5 yıl26yaşama uzatmak mümkün. Translasyonel tıp ve yeni ilaçların geliştirilmesi için gerekli ön koşul IPF ve Girişimsel hangi çalışmalar başarı klinikte akıllı özellikler taklit eden bir hayvan modeli durumu olduğunu. Ancak, varolan Pu.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.
Teşekkürler
Yazarlar Dr Daniela Pompilio ve Roberta Ciccimarra teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| FMT 2500 Floresan Tomografi Sistemi | Perkin Elmer Inc. | Deneysel Oluşturucu | |
| MMPsense 680 | Perkin Elmer Inc. | NEV10126 | Işıktan koruyun, probu 4 ° C'de saklayın; C |
| TrueQuant yazılımı | Perkin Elmer Inc. | ||
| Dişi akraba C57BL/6 | San Pietro NatisoneHorst, Hollanda (UD), | Kullanımdan önce, hayvanlar en az 5 gün boyunca yerel vivaryum koşullarına alıştırıldı | |
| İzofluran | ESTEVE spa | 571329.8 | Solumayın |
| Otomatik hücre sayacı | Dasit XT 1800J | Deneysel Oluşturucu | |
| Tuzlu Su Çözeltisi, %0.9 Sodyum Klorür (NaCl) | Eurospital | 15A2807 | |
| Quantum FX Micro-CT tarayıcı | Perkin Elmer A.Ş. | ||
| Streptomyces Verticillus'tan bleomisin sülfat | Sigma | B2434 | |
| Otomatik doku İşlemcisi | ATP700 Histo-Line Laboratuvarları | ATP700 | |
| Gömme sistemi | EG 1160 Leica Biosystems | EG 1160 | |
| Döner mikrotom ve nbsp; | Slee Cut 6062 | ||
| Dijital slayt tarayıcı | NanoZoomer S60, Hamamatsu Photonics | ||
| NIS-AR görüntü analiz yazılımı | Nikon | ||
| Masson' s Trikrom Boyama | Histo-Line Laboratuvarları | ||
| %10 nötr tamponlu formalin | Sigma | HT5012-1CS | |
| Penn-yüzyıl modeli DP-4M Kuru güç şişirici | Penn-century | DPM-EXT | |
| PE190 mikro tıbbi boru | 2biyolojik aletler snc | BB31695-PE / 8 | |
| İğnesiz şırınga 5 mL | Terumo | SS*05SE1 | Pistonun levhalarını makasla kesin |
| Hamilton 0.10 mL (model 1710) | Gaz geçirmez | 81022 | |
| Discofix 3 Musluk | Braun | 4095111 | |
| İğneli şırınga 1 mL | Pic solüsyonu | 3,071,260,300,320 | İğnesiz kullanım |
| Plastik besleme tüpleri 18 ga x 50 mm | 2biyolojik aletler snc | FTP-18-50 | Ucu eğik olarak kesin |
Kaynaklar
- Wynn, T. A. Integrating mechanisms of pulmonary fibrosis. J. Exp. Med. 208 (7), 1339-1350 (2011).
- Wynn, T. A., Ramalingam, T. R. Mechanisms of fibrosis: therapeutic translation for fibrotic disease. Nat. Med. 18 (7), 1028-1040 (2012).
- Moore, B. B.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
