Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bu makalede, aortik balon yaralanma sonra myointimal Hiperplazi (MH) gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterilmektedir.
Hayvan modelleri kullanımını daha iyi MH, Arteryel stenoz için bir önemli neden anlamak için önemlidir. Bu makalede, biz kurulan Gemi yaralanma modelleri büyük hayvanlarda ile karşılaştırılabilir bir fare balon denudation model göstermek. Aort denudation model balon kateter ile klinik ayarını taklit eder ve karşılaştırılabilir pathobiological ve fizyolojik değişikliklere yol açar. Kısaca, yatay bir kesi içinde aorta abdominalisgerçekleştirdikten sonra bir balon kateter olacak geminin eklenen, şişirilmiş ve retrogradely tanıttı. Enflasyon balon intima yaralanma ve geminin overdistension yol açacaktır. Kateter kaldırdıktan sonra aort kesi ile tek dikiş kapalı olacaktır. Bu makalede gösterilen modeli tekrarlanabilir, gerçekleştirmek, kolay ve hızlı ve güvenilir bir şekilde kurulabilir. Ekonomik bir biçimde uygulanabilir pahalı deneysel tedavi edici ajanlar değerlendirmek için özellikle uygundur. Farklı nakavt-fare suşları kullanarak, farklı genler MH gelişimi üzerine etkisi tespit edilebilir.
Koroner ve periferik arter arter stenoz morbidite ve mortalite hastalarda1üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bir altta yatan patolojik myointima Hiperplazi (MH), artan nükleer silahların yayılmasına karşı geçiş ve vasküler düz kas hücreleri (SMC)2hücre dışı matriks proteinlerinin sentezi ile karakterize bir mekanizmadır. SMC gemi media tabakası bulunur ve Lümen yüzeye stimülasyon geçirilir. Uyarıcı sinyalleri ve büyüme faktörleri, sitokinler, hücre-hücre iletişim, lipitler, hücre dışı matriks bileşenleri ve mekanik makas içerir Kuvvetleri3,4,5,6germek. Yaralanma damar duvarının, patolojik veya iyatrojenik, endotel hücre ve düz kas hücre hasarı neden ve inflamatuar reaksiyonları teşvik ve böylece MH7' ye yol.
Farklı hayvan modelleri Arteryel yaralanma ve myointima Hiperplazi çalışmaya şu anda kullanılabilir. Veya büyük hayvanlar domuzlar gibi köpekler benzer arter ve koroner anatomi insanlarla paylaşma avantajına sahip ve özellikle anjiyoplasti teknikleri, yordam ve aygıtları8araştıran çalışmalar için uygundur. Köpekler sadece gemi yaralanma11hafif bir yanıt ancak, domuz modelleri daha yüksek thrombogenicity9,10, dezavantajı vardır. Buna ek olarak, tüm büyük hayvan modellerinde özel konut, ekipman ve personel, yüksek maliyetleri ile bağlı olan ve her zaman bir kurum olarak mevcut değildir gerektirir. Sıçanlar ve fareler küçük hayvan modelleri içerir. Fareler için karşılaştırıldığında, fareler daha düşük maliyet avantajları ve knock out modelleri çeşitli varlığı var. Bu videoda açıklanan model ApoE-/-Batı bir diyetle beslenen yakından anjiyoplasti aterosklerotik gemiler12klinik ayarını taklit etmek için fareler ile kombine edilebilir. Önceki misal yolu ile tel yaralanma13, sıvı kuruma14, Bahar15ya da kol yaralanması16vasküler yaralanma indüklenen. Yaralanma doğası büyük ölçüde geliştirme ve MH Anayasası etkisi olacaktır beri gemi yaralanma ikna etmek için bir balon kateter kullanarak klinik ayarını taklit etmek için en iyi yoldur.
Bu makalede MH farelerde bir balon kateter ile ikna etmek için bir roman yöntemi açıklanmaktadır. İntimal katmanın ve aynı zamanda bir overdistension gemi indüksiyon kazıma bir RX-Port (şekil 1A) ile bir balon kateter (1.2 mm x 6 mm) kullanımına izin verir. Bu faktörlerin her iki MH gelişimi için önemli Tetikleyiciler vardır. 28 gün17bu model gözlem zamanı.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Hayvan insana ilişkin Bakım Kılavuzu laboratuvar hayvanlarının ilkeleri için uygun olarak alınan, Enstitüsü ile laboratuvar hayvan kaynakları tarafından hazırlanan ve ulusal sağlık Enstitüleri tarafından yayınlandı. Tüm hayvan iletişim kuralları sorumlu yerel otorite ('' Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Office sağlık ve tüketici koruma) Hamburg'') tarafından kabul edildi.
1. kateter hazırlık
Not: kateter ile ilgili bilgi için Malzemeler tablo bakın.
2. fare hazırlık
3. histopatoloji
4. ayirt mikroskobu
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Balon denudation MH geliştirme farelerde çalışmaya uygun bir modeldir. Hayvanlar cerrahiden de yeniden elde etmek ve mükemmel fiziksel durumu sonrası ameliyat göster. Bu model ile % 3 ölüm oranı cerrahi işlem nedeniyle daha az 50 farelerde kurduk. Şekil 1B -C temel cerrahi adımı göster. Bir cilt kesi sonra linea alba, aorta abdominalistanımlamak. Mikrocerrahi kelepçeler (şekil 1B) yerleştirin. A...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu yazı myointimal Hiperplazi gelişimini incelemek için bir fare modeli gösterir ve altta yatan patolojik süreçlerin araştırma ve test yeni ilaçlar veya tedavi olanakları sağlar.
Bu iletişim kuralı en kritik aort denudation adımdır. Aşırı denudation anevrizma oluşumu ve modeli başarısızlık için yol açacak gibi özel bakım bu adımı sırasında ödenmesi gerekmektedir. Öte yandan, denudation yeterince gerçekleştirilirse, çok az myointima geliştirecek. Bu nedenle, denudation adım yoğunluğunu sonucu v...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar ifşa gerek yok.
Yazarlar Christiane Pahrmann onun teknik yardım için teşekkür ederiz.
D.W. Max Kade Vakfı tarafından desteklenmiştir. Alınan T.D. hibe başka Kröner Fondation (2012_EKES.04) ve Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. araştırma hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; aldı. SCHR992/3-1, SCHR992/4-1).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 10-0 Ethilon sütür | Ethicon | 2814G | |
| 3 mL Şırınga | BD Medical | 309658 | |
| %37 HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| 5-0 prolen sütür | Ethicon | EH7229H | |
| 6-0 prolen sütür | Ethicon | 8706H | |
| Asit Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trikrom boyama |
| Antijen alma çözeltisi | Dako | S1699 | |
| Azofloksin | Waldeck | 1B-103 | Trikrom boyama |
| Bepanthen Göz ve Burun merhemi Bayer | 1578675 | Göz merhemi | |
| Betadine Çözeltisi | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
| C57BL/6J | Charles Nehri | Stok numarası 000664 | |
| Kelepçe aplikatörü | Güzel Bilim Aletleri | 18056-14 | ÇENE KARARTMASI: 4 x 0,75 mm UZUNLUK: 13 mm |
| Kollajen 3 | abcam | ab7778 | Antikor |
| DAPI | Thermo Fischer | D1306 | |
| Eşek anti-Keçi IgG AF555 | Invitrogen | A21432 | İkincil antikor Eşek |
| anti-Tavşan IgG AF488 | Invitrogen | A21206 | İkincil antikor |
| Eşek anti-Tavşan IgG AF488 | Invitrogen | A11055 | İkincil antikor |
| Eşek anti-Tavşan IgG AF555 | Invitrogen | A31572 | İkincil antikor |
| Etanol% 70 | Th. Geyer | 2270 | |
| Etanol% 96 | Th. Geyer | 2295 | |
| Etanol mutlak | Th. Geyer | 2246 | |
| FAP | abcam | ab28246 | Antikor |
| Forseps ince | Güzel Bilim Araçları | 11251-20 | |
| Forseps standardı | Güzel Bilim Araçları | 11023-10 | |
| Buzul Asetik Asit | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| Saç kesme makinesi | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Heparin | Rotexmedica | PZN 3862340 | 25.000 IE/mL |
| Yüksek sıcaklık koter seti | Bovie | 18010-00 | |
| Image-iT FX Sinyal Arttırıcı | Invitrogen | I36933 | Engelleme çözümü |
| Açık Yeşil SF | Waldeck | 1B-211 | Trikrom boyama |
| Mikrocerrahi kelepçe | Güzel Bilim Araçları | 18055-04 | Mikro Serin - 4mm |
| MINI TREK Koroner Dilatasyon Kateteri 1.20 mm x 6 mm / Hızlı Değişim | Abbott | 1012268-06U | |
| Molibdatofosforik asit hidrat | Merck | 1.00532.0100 | Trikrom boyama |
| NaCl %0,9 | B.Braun | PZN 06063042 Mad. No.: 3570160 | |
| İğne tutucu | Güzel Bilim Araçları | 12075-14 | |
| Novaminsülfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizol |
| Turuncu G | Waldeck | 1B-221 | Trikrom boyama |
| Parafin | Leica biyosistemleri | REF 39602004 | |
| PBS pH 7,4 | Gibco | 10010023 | |
| PFA %4 | Elektron Mikroskobu Bilimler | #157135S | |
| Ponceau S çözeltisi | Serva Elektroforez | 33427 | Trikrom boyama |
| Birincil antikor seyreltici | Dako | S3022 | |
| Prolong Gold Montaj çözümü | Thermo Fischer | P36930 | İmmünofloresan lekeli slaytlar için montaj çözümü |
| Değiştirilebilir İnce Uçlu | Bovie | H101 | |
| Rezorsin-Fuchsin Weigert | Waldeck | 2E-30 | Trikrom boyama |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
| Makas | Güzel Bilim Araçları | 14028-10 | |
| Makas Vannas tarzı | Güzel Bilim Araçları | 15000-03 | |
| İkincil antikor seyreltici | Dako | S0809 | |
| Hızlı etkili Yapıştırıcı MINIS 3x1g | UHU | 45370 | Siyanoakrilat |
| Sürgülü Raf | Ted Pella | 21057 | |
| SM22 | abcam | ab10135 | Antikor |
| SMA | abcam | ab21027 | Antikor |
| Boyama kabı | Ted Pella | 21075 | |
| Cerrahi mikroskop | Leica | M651 | |
| Tabotamp fibriller | Ethicon | 431962 | Emilebilir hemostat |
| Transpore Cerrahi Bant | 3M | 1527-1 | |
| U-100 İnsülin şırınga | BD Medical | 324825 | |
| Damar Genişletici | Güzel Bilim Araçları | 18603-14 | |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Weigerts demir hematoksilen Kiti | Merck | 1.15973.0002 | Trikrom boyama |
| Ksilen | Th. Geyer | 3410 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.