Bu kağıt hazırlık ve göbek kordonu matris elde edilen Mezenkimal Kök hücre pulcuklarının bir ikili patellar tendon kusur modelinde bir fare ile değerlendirilmesi açıklanmaktadır. Bu model ile kabul edilebilir bir hastalık ilişkili ve tedavi edilmezse ve tedavi tendon arasındaki farklılıkları algılamak için bulundu ve iki tedaviler arasında test.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kök hücre tedavileri Sıçanlarda bir ikili Patellar Tendon yaralanma modelinde değerlendirilmesi
Bu makalede
Özet
Özet
Rejeneratif tıp geleneksel tedaviler meydan koşullar yeni alternatifler sağlar. Yaygınlık ve morbidite tendinopathy türlerin, karşıdan karşıya bu doku sınırlı iyileştirici özellikleri ile birlikte, hücresel tedaviler için arama istenir ve onların etkinliğini incelemek için deneysel modelleri geliştirilmesi tahrikli. Göbek kordonu matris elde edilen Mezenkimal Kök hücre (UCM-MSC) adaylardır çekici oldukları için bol, basit-e doğru toplamak, etik kaygılar ve teratoma oluşumu riskini engelleyecek, henüz ilkel embriyonik kök hücreleri daha yakından benzer daha Yetişkin doku kaynaklı MSCs. önemli ilgi kitosan üzerinde MSCs özellikleri kullanılarak küresel oluşumu geliştirmek için bir strateji olarak odaklanmıştır. UCM-MSCs, izole etmek için bu kağıt ayrıntıları teknikleri pulcuklarının kitosan film hazırlamak ve küresel oluşumu yüzey marker ifade üzerinde etkisini analiz. Sonuç olarak, bir ikili patellar tendon yaralanma modelinde fareler oluşturulması kitosan filmde oluşan UCM-MSC pulcuklarının vivo içinde implantasyonu için tanımlanır. Komplikasyon gözlenmedi morbidite ile ilgili olarak çalışmada, efektleri veya doku enfeksiyonu stres. Toplam fonksiyonel puanı 7 gün itibariyle işletilen Rats'in normal fareler daha düşük ama ameliyattan sonra 28 gün içinde normale döndü. Histolojik dokusu şifa puanları pıhtı yabancı cisim reaksiyonu ve 28 gün şifa ilerliyor tedavi Defektlerde 7 gün değerlendirildi varlığına doğruladı. Bu iki taraflı diz kapağı tendon kusur model arası bireysel değişim her fare iç denetimde oluşturulması yoluyla denetler, kabul edilebilir morbidite ile ilişkili ve tedavi edilmezse tendon ve tedaviler arasındaki farklar tespiti izin.
Giriş
Tendon hasarı önemli ağrı ve kas atrofi en yaygın nedenlerinden biri arasında tür1' dir. Veteriner tıpta, tendon ve bağ yaralanmaları atlar, özel ilgi ve yarış atları tüm yaralanmaları % 82 kas-iskelet sistemi dahil olanların % 46'sı tendon ve bağ2,3etkiler şunlardır. Skar dokusu oluşumu iyileşmiş tendonları biyomekanik özellikleri etkiler ve atletik kullanmak dönmek için korunan prognoz fleksör tendon yaralanmalarının sonra açıklar; Re-yaralanma 2 yıl içinde ilâ % 67'atların konservatif4ele meydana gelmektedir. Rejeneratif tıp geleneksel tedaviler zorluklar bir ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm yöntem tanımlamak burada kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Western Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü tarafından onaylanmıştır.
1. izolasyon ve MSCs at göbek kordonu matris genişlemesi
- Plasenta foaling gözlenen sonra yetişkin bir kısrak (hamile) elde etmek ve aseptik göbek kordonu plasenta den yalıtır. Göbek kordonu fosfat tamponlu tuz (PBS) % 1 penisilin-streptomisin (P/S) ile 4 ° C'de aktarım sırasında işleme kadar tutun.
- Göbek kordonu oda sıcaklığında %1 PBS ile iki kez yıkayın P/S 50 mL tüp içinde. Bölüm 150 mm plaka ve yıkama PBS oda sıcaklığında 1 P/S bir 50 mL tüp iki veya üç kez, kanın ç....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Mevcut çalışmada, ± SD (Standart sapma) demek gibi sonuçları sunulmuştur. Hücreleri 6 kısraklarda göbek bağları izole ve her hücre yüzey işaretçisine standart veya kitosan Klima altında ifade izole hücre satırlarının yüzdesi karşılaştırıldığında Friedman testi ile parametrik olmayan bir Varyans analizi ile olarak tekrarlanan önlemler. Tendon kusur modeli oluşturmak için 8 sıçan 7 gün ameliyat sonrası değerlendirme için kullanıldı ve 12 fareler 28 gün değerlendirmesi için kullanılmıştır. F.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Biz sonunda at doğal tendinopathies yönetiminde aday yaklaşımlar test niyetinde çünkü at hücreleri bu proje için seçildi. Nitekim, tendon yaralanmalarının at at yüzeysel dijital fleksör ve Aşil tendonu insanlar41yılında arasındaki biyolojik benzerliği nedeniyle tendinopathy adam doğal modelleri olarak çekici bulunmaktadır. Hücre yüzey işaretleyicileri CD44, CD90, CD105, CD34 ve MHC II immunophenotyping hücrelerinin hücresel tedavi42için uluslararası toplum tarafından öneril.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar hiçbir ifşa etmek çıkar çatışması var.
Teşekkürler
Yazarlar Dr Su, doktora, verileri onun istatistiksel analiz için kabul etmek istiyorum. Yazarlar ayrıca Dr. McClure, DVM, doktora DACLAM, anestezi onu tavsiye için teşekkür ederiz ve ağrı yönetimi protokolleri çalışmada kullanılan. Bu proje araştırma (12678v) ve USDA bölüm 1433 fonları (2090) için Western Üniversitesi Sağlık Bilimleri dairesi Başkan Yardımcısı gelen hibe tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| PBS 10x | Hyclone | SH30258.01 | Tüketilebilir |
| Kollajenaz tip IA | Worthington | LS004197 | Sarf Malzemesi |
| DMEM düşük glikozlu | Hyclone | SH30021. FS | Tüketilebilir |
| Fetal Sığır Serumu | Hiklonu | SH30910.03 | Tüketilebilir |
| Penisilin / Streptomisin 100x | Hidroklon | SV30010 | |
| Tüketilebilir Tripsin% 0.25 | Hidroksin | SH30042.01 | Tüketilebilir |
| Akaktaz | Yenilikçi Hücre Teknolojileri | AT104 | |
| Tüketilebilir Tripan mavisi | Hyclone | SV30084.01 | Sarf Malzemesi |
| Dimetil Sülfoksit | Sigma | D2650 | Sarf Malzemesi |
| Kitosan | Sigma | C3646 | Sarf Malzemesi |
| Sodyum Hidroksit | Sigma | S8045 | Sarf Malzemesi |
| Sığır Serumu Albümin Klonu | SH30574.01 | Sarf | |
| Malzemesi Yuvarlak alt polistiren tüp | Corning | 149591A | Sarf Malzemesi |
| Fare anti-at CD44 (FITC) | AbD serotec | MCA1082F | |
| Sarf Malzemesi Fare anti-sıçan CD90 (FITC) | AbD serotec | MCA47FT | |
| Sarf Malzemesi Fare anti-at MHC-II (FITC) | AbD serotec | MCA1085F | Sarf |
| Malzemesi Fare IgG1 (FITC) - İzotip Kontrolü | AbD serotec | MCA928F | Sarf |
| Malzemesi Fare monoklonal [SN6] - CD105 (FITC) | abcam | ab11415 | Tüketilebilir |
| Fare IgG1 (FITC) - İzotip Kontrolü | abcam | ab91356 | Tüketilebilir |
| Fare anti-insan CD34 (FITC) | BD | BDB560942 | |
| Tüketilebilir Fare IdG1 kappa (FITC) | BD | BDB555748 | Sarf Malzemesi |
| 7-AAD | BD | BDB559925 | Sarf Malzemesi |
| BD Accuri C6 Akış Sitometresi | BD | Ekipman | |
| Vacutainer 5 mL | Med Vet International | RED5.0 | Tüketilebilir |
| Asit-sitrat-dekstroz | Sigma | C3821 | Tüketilebilir |
| Kalsiyum Klorür | Sigma | C5670 | Tüketilebilir |
| Sevofluran | JD Medical | 60307-320-25 | Tüketilebilir |
| Sıçanlar | Charles Nehri | Suş kodu: 400 | Deney hayvanı |
| Sıçan cerrahi kiti | Harvard aparatı | 728942 | Ekipmanları |
| Cerrahi Bıçak #15 | MEDLINE | MDS15115 | Sarf Malzemesi |
| Sıçan MD's Baytril (2 mg / Tablet), Rimadyl (2 mg / Tablet) | Bio Serv | F06801 | Tüketilebilir |
| Poliglaktin 910, 5-0 | Ethicon | J436G | Sarf Malzemesi |
| Eosin alchol shandon | Thermo Bilimsel | 6766007 | Sarf Malzemesi |
| Harris Hematoksilen | Termo bilimsel | 143907 | Sarf Malzemesi |
Kaynaklar
- Rossdale, P. D., Hopes, R., Digby, N. J., offord, K. Epidemiological study of wastage among racehorses 1982 and 1983. Vet Rec. 116 (3), 66-69 (1982).
- Black, D. A., Tucci, M., Puckett, A., Lawyer, T., Benghuzzi, H. Strength of a new method of achilles tendon repair in the rat - ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
