Üç boyutlu inflamatuar insan dokusu jinjiva karşılıkları

Li Xiao; Hisashi Okamura; Yasuo Kumazawa

doi:10.3791/57157

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Üç boyutlu inflamatuar insan dokusu jinjiva karşılıkları

9.6K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/57157

⸱

3 Nisan 2018

Li Xiao¹ , Hisashi Okamura² , Yasuo Kumazawa²

¹Department of Pharmacology, The Nippon Dental University, ²Department of Oral and Maxillofacial Surgery, The Nippon Dental University Hospital

Bu makalede

Özet

Protokol amacı bir enflamatuar insan jinjiva modeli içinde vitrooluşturmaktır. Bu doku model insan hücreleri, HaCaT keratinositler, dişeti fibroblastlar ve THP-1 makrofajlar, üç boyutlu koşullar altında üç tür ortak yetiştirerek. Dişeti iltihabı ve periodontitis gibi periodontal hastalıkların araştırılması için bu modeli uygulayabilirsiniz.

Özet

Periodontal (dişeti iltihabı ve periodontitis gibi) Yetişkin diş kaybına önde gelen nedenleri hastalıklardır. Periodontal hastalıkların temel Fizyopatoloji jinjiva içinde iltihabıdır. Geçerli modeller periodontal hastalıkların hayvan türleri içinde kurulmuştur. Ancak, hayvan modelleri Fizyopatoloji insanların, hücresel ve moleküler mekanizmaları analiz etmek ve periodontal hastalıklar için yeni ilaçların değerlendirmek üzere farklıdır. Burada, jinjiva (iGTE) vitroinsan inflamatuar doku karşılıkları yeniden inşa için detaylı bir iletişim kuralı mevcut. İlk insan dokusu karşılıkları jinjiva (GTE) insan hücreleri, insan dişeti fibroblastlar (HGF) ve insan derisi epidermal keratinositler (HaCaT), üç boyutlu koşullar altında da dahil olmak üzere iki tür kullanarak oluşturmak. Biz bir yara modeli GTE içinde bir delik açacak bir doku zımba kullanarak oluşturun. Kollajen jel ile karışık sonraki, insan THP-1 monosit GTE delik içine enjekte edilir. Tarafından adimistration 10 ng/mL phorbol 12-myristate 13-asetat (PMA) için 72 h THP-1 hücreleri ayrıştırılan GTE (iGTE) formu inflamatuar foci için makrofajlar içine (IGTE da-ebilmek var olmak stumilated ile 2 µg/mL lipopolisakkaritler (LPS) inflamasyonu başlatmak 48 saat ). IGTE inflamatuar jinjiva insan hücreleri ile üç boyutlu bir mimarisi kullanarak ilk vitro modeldir. IGTE periodontal hastalıklarda önemli patolojik değişiklikler (immunocytes hareket, fibryoblasts, epitel hücreleri, monosit ve makrofajlar arasında hücre içi etkileşimleri) yansıtır. GTE, yaralı GTE ve iGTE yara iyileşmesi çalışmaya çok yönlü araçlar, doku yenilenmesi, iltihap, hücre-hücre etkileşim ve ekran potansiyel ilaç periodontal hastalıklar için kullanılabilir.

Giriş

Yetişkin diş kaybına önde gelen nedenidir periodontal hastalıklardır. Dişeti iltihabı ve periodontitis en yaygın periodontal hastalıklardır. Her iki mevcut biyofilm aracılı akut veya kronik inflamatuar değişiklikler jinjiva. Periodontitis genellikle kronik inflamasyon sunar, ancak dişeti iltihabı akut iltihabı ile karakterizedir. Histolojik düzeyde, örneğin makrofajlar, lenfositler, plazma hücreleri ve mast hücreleri¹^,²bağışıklık hücrelerinin aktivasyonu bakteriyel bileşenleri tetikler. Bu bağışıklık hücreleri, özellikle makrofajlar, (dişeti epitel hücreleri, fibroblastlar, endotel hücreleri ve dokusunu da dah....