Method Article

Polyamine tabanlı peptid Amphiphiles (PPAs) ve ilgili Biyomalzeme kendi kendine montaj sentezi için facile iletişim kuralı

DOI:

10.3791/57908

June 25th, 2018

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Polyamine tabanlı peptid amphiphiles (PPAs) sentezi gruplar bu reaktif işlevler maske korumanın akılcı kullanımı gerektiren birden çok Amin nitrogens, varlığı nedeniyle önemli bir sorundur. Bu yazıda, bu yeni sınıf kendi kendine montaj moleküllerin hazırlanması için facile yöntemi açıklanmaktadır.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Polyamine tabanlı peptid Amphiphiles (PPAs) kendi kendine montaj amfifilik Biyomalzeme-peptid amphiphiles (PAs) ile ilgili yeni bir sınıf vardır. Geleneksel PAs şarj edilmiş amino asitler (lizin, arginin), doğrudan bir lipid segmente bağlı olan veya nötr amino asitleri yapılan bir bağlayıcı bölge içerebilir grupları çözücü olarak sahip. PAs peptit dizisi ayarlama çeşitli türleri morfoloji yol açabilir. Benzer şekilde, PPAs hidrofobik bir kesimi ve tarafsız amino asitler sahip, aynı zamanda polyamine molekülleri çözücü (hidrofilik) gruplar su içerir. PAs modelinde olduğu gibi PPAs da küçük çubuklar, bükülmüş nano-şeritler ve erimiş nano-sayfaları, suda zaman da dahil olmak üzere çeşitli türleri morfoloji, içine kendi kendine monte edebilirsiniz. Ancak, bir tek polyamine molekül üzerinde birincil ve ikincil aminlerin varlığı PPAs sentezleme ne zaman önemli bir sorun teşkil etmektedir. Bu yazıda, katı faz peptid sentez (SPP'ler) kullanarak PPAs facile sentezi ulaşmak için edebiyat emsal üzerinde dayalı basit bir protokol gösteriyoruz. Bu iletişim kuralı PAs ve diğer benzer sistemleri sentezi için genişletilebilir. Biz de bölünme reçine, kimlik ve arıtma için gerekli adımları göstermektedir.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kendi kendine montaj peptid amphiphiles (PAs) genellikle aşağıdaki segmentlerinin oluşan Biyomalzeme bir sınıf vardır: (a) hidrofilik baş, (b) bağlayıcı bölge ve (c) hidrofobik kuyruk. Çoğu PAs literatürde açıklanan şarj edilmiş veya polar aminoasit artıkları1,2,3,4' oluşan bir hidrofilik baş sahip. PAs Biyomedikal ilaç dağıtım, hastalık teşhis, rejeneratif tıp, vb5de dahil olmak üzere geniş bir uygulama yelpazesi bulduk. Onların amino asit sıralamasına dayanan, PAs nanoyapıların küresel micelles ve nano-fila....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. genel protokol PPAs sentezi için

  1. Sentez (genellikle mmol) hesaplamak. Bu ölçek hedef PPA tutar kitle üzerinde temel alır. SPP'ler reaksiyon verimliliğini yavaş yavaş amino asit dizisi bir artış ile azalır unutmayın. Bu nedenle, tam reaksiyon verimlilik hesaplamak zordur.
  2. Reçine yükleme göre kullanılacak reçine ağırlığını hesaplayın. Yükleme kapsayıcı veya Çözümleme Protokolü reçine ve mmol/g içinde dile getirdi. Reçine ağırlığını hesaplamak için aşağıdaki formül kullanılır:
  3. 2-chlorotrityl klorür reçine dikkatlice tartmak (bizim'de yükleme ~0.85 mmol olduğu)
  4. Aşağıdaki özelliklere sahip bir fritted sentez gemi reçine yerleştiri....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sonra sentez ve arıtma ve fizikokimyasal veya biyolojik değerlendirme önce PPAs yeniden denetlenmiş işçiyiz ve saflık analitik HPLC kullanarak tespit önerilir. Malzeme karakterizasyonu veya biyolojik değerlendirme için PPAs bir saflığı olması gerekir > % 95. Şekil 2 HPLC izleme (üst) ve ürünün varlığını teyit maldı spectra (alt) gösterir. HPLC analitik sistemleri (AUC) eğri altındaki alan entegre ve bir AUC > % 95 ürün saflık için ilgili. HPLC UV tabanl.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada açıklanan protokoller PAs kuyuları ve peptid tabanlı molekülleri (örneğin, karma PA-peptoids) ile ilgili PPAs sentez için kullanılabilir. SPP'ler kullanarak peptidler sentezi basit bir işlem olmakla birlikte, biyolojik izleme molekülleri içeren peptidler sentezi özellikle zor olabilir. Polyamines spermine, spermidine, diethyelenetriamine, vb, gibi kanser hücreleri13hedefleme için izleme moleküller gibi davranabilir. PPAs farklı türleri morfoloji6nanoyapıları.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar hiçbir bildirmek için çıkar çatışması var.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu proje Nebraska Üniversitesi Tıp Merkezi (başlangıç fonlar, MC-S); tarafından finanse edildi NIH-COBRE, 5P20GM103480 (T. Bronich) ve Amerikan Kimya Birliği, darbe tekrarlama frekansı # 57434-DNI7(MC-S).

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
2-Klorotritil klorür reçinesi AappTecRTZ001
SynthwareTM sentez kabı ve nbsp;AldrichSYNP120050M
DiklorometanAcrosAC406920250Fisher Sci. Katalog #
Bilek ÇalkalayıcıBoekel Scientific401000-2
Kaiser test kitiSigma-Aldrich60017
2 - [(4,4-dimetil-2,6-dioksosikloheks-1-iliden) etil-amino]-etanolSigma-AldrichCDS004772
Susuz MetanolAkrosAC610981000Fisher Sci. Kataloğu #
Kloranil test kitiTCITCC1771-KITVWR Kataloğu #
Di-tert bütil di-karbonat AcrosAC194670250Fisher Sci. Katalog #
DimetilformamidFisher ScientificBP1160-4
HidrazinAkrosAC296815000FIsher Sci. Katalog #
(2- (1H-benzotriazol-1-il) -1,1,3,3-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat)p3biosystems31001
4-metil piperidin ve nbsp;AcrosAC127515000FIsher Sci. Katalog #
Trifloroasetik AsitAappTecCXZ035
Triizopropil SilanSigma-Aldrich233781
EterFisher ScientificE138-1
ve alfa; -Siyano-4-hidroksisinnamik asitSigma-AldrichC8982
9-AminoakridinSigma-Aldrich92817
Balıkçı markası  Şırınga Filtreleri: PTFE MembranFisher Scientific09-730-21

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cui, H., Pashuck, E. T., Velichko, Y. S., Weigand, S. J., Cheetham, A. G., Newcomb, C. J., Stupp, S. I. Spontaneous and x-ray-triggered crystallization at long range in self-assembling filament networks. Science. 327, 555-559 (2010).
  2. Pashuck, E. T., Cui, H., Stupp, S. I.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Polyamine based Peptide AmphiphilesSolid Phase Peptide SynthesisPeptide Amphiphile SynthesisSelf assembling BiomaterialsOctagonal Protecting GroupsChloranil TestKaiser TestTransmission Electron MicroscopyAtomic Force MicroscopyDynamic Light Scattering

Related Articles