Yöntem makalesi

Kapsamlı değerlendirme etkinliği ve güvenliği üç tamamlayıcı yöntemlerle plasenta hedefli ilaç dağıtım

DOI:

10.3791/58219

⸱

10 Eylül 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory for Reproductive Health, Institute of Biomedicine and Biotechnology, Shenzhen Institutes of Advanced Technology, Chinese Academy of Sciences, 2College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, 3Key Laboratory of Chemical Engineering Process and Technology for High-efficiency Conversion, College of Chemistry and Material Sciences, Heilongjiang University, 4Department of Obstetrics and Gynecology, Wayne State University School of Medicine

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Biz emanet ve plasenta hedefli ilaç dağıtım etkinliğini değerlendirmek için üç yöntem kullanır bir sistem tarif: nanopartikül birikimi, plasenta ve fetal gelişim izlemek için yüksek frekanslı ultrason izlemek için Imaging vivo içinde ve HPLC doku için ilaç dağıtım ölçmek için.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hiçbir etkili tedaviler Şu anda plasenta ilişkili gebelik komplikasyonları için mevcut ve maternal ve fetal yan etkileri en aza indirerek uyuşturucu hedeflenen teslimat için plasenta stratejileri geliştirmek zor kalır. Hedeflenen nanopartikül taşıyıcıları plasental bozuklukları tedavisi için yeni fırsatlar sağlar. Biz son zamanlarda sentetik plasental kondroitin sülfat A bağlama peptid (plCSA-BP) uyuşturucu için plasenta sunmak için nano tanecikleri rehberlik için kullanılan olabilir gösterdi. Bu protokol için biz birlikte kullanılan üç ayrı Yöntemler istihdam plCSA-BP tarafından ilaç dağıtım için plasenta verimliliğini değerlendirmek için bir sistem ayrıntılı olarak tarif: vivo içinde görüntüleme, yüksek frekanslı ultrason (HFUS) ve yüksek performans Sıvı Kromatografi (HPLC). HFUS ve HPLC plCSA BP Birleşik nano tanecikleri etkili bir şekilde ve özellikle metotreksat için plasenta teslim olduğunu gösterdi iken vivo içinde kullanarak canlı hayvan, plasenta içinde görüntüleme, plCSA-BP-güdümlü nano tanecikleri görüntülenir. Böylece, bu yöntemlerin bir bileşimini plasenta ilaçlara hedeflenen teslimat ve birkaç gebelik komplikasyonları için yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi için etkili bir araç kullanılabilir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Plasenta-aracılı gebelik komplikasyonları, ön eklampsi, gebelik kaybı, ablasyo plasenta ve küçük Gebelik yaşı (SGA), dahil olmak üzere yaygın ve önemli fetal ve maternal morbidite ve mortalite1,2kurşun, 3ve çok az ilaçlar gebelik tedavisi4,5bozuklukları için etkili olduğu kanıtlanmıştır. Daha seçici ve daha güvenli plasenta hedefli ilaç dağıtım stratejileri geliştirme gebelik sırasında modern ilaç tedavisi zor kalır.

Son yıllarda, çeşitli raporlar uteroplacental dokulara ilaçların teslim hedeflenen peptidler veya antikorlar ile kaplama Nano tanecikleri tarafından plasenta hedefli araçları olarak odaklı olması. Bu bir anti-epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR)6 antikor, tümör-posta peptidler (CGKRK ve iRGD)7, plasenta hedefli peptidler8, plasental damarlara hedefli peptidler9 ve karşı antikor içerir oksitosin reseptör10.

Burada, sentetik plasental kondroitin sülfat A bağlama peptid (plCSA-BP) nano tanecikleri ve onların uyuşturucu payloads hedeflenen teslimatı plasenta11için kullanılabileceğini göstermektedir. PlCSA-BP-güdümlü nano tanecikleri plasental trofoblast hedef çünkü yöntemleri hedefleme bildirilen uteroplacental tamamlayıcı niteliktedir.

Non-invaziv bir yöntem olarak vivo içinde görüntüleme plasenta özel gen ekspresyonu fareler12izlemek için kullanılan ve indocyanine yeşil (ICG) yaygın görüntüleme sistemleri13floresan kullanarak nano tanecikleri izlemek için kullanılmıştır, 14,15. Böylece, intravenöz plCSA BP Birleşik nano tanecikleri ile floresan Imager hamile farelerde plCSA-INP dağılımını görselleştirmenizi ICG (plCSA-INPS) yüklü enjekte. Biz daha sonra metotreksat (MTX) intravenöz enjekte-hamile fareler plCSA-NPs yüklü. Yüksek frekanslı ultrason (HFUS), non-invaziv, başka bir gerçek zamanlı görüntüleme aracı16,17 fetal ve plasental geliştirme farelerde izlemek için kullanıldı. Son olarak, yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) plasenta ve fetusa MTX dağıtım ölçmek için kullanılır.

Bu protokol için plasenta hedefli ilaç dağıtım verimliliğini değerlendirmek için plCSA-BP-güdümlü nanocarriers tarafından kullanılan üç yöntem sistem biz ayrıntılı olarak tarif.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan bakım ve kullanım Komitesi, Shenzhen ileri teknoloji enstitüleri, Çin Bilimler Akademisi tarafından onaylanan tüm fare deneyleri kesinlikle takip protokolleri (SIAT-IRB-160520-YYS-FXJ-A0232).

1. plasental kondroitin sülfat A hedefli Lipid-polimer nano tanecikleri sentezi

  1. MTX ve ICG yüklü lipid-polimer nano tanecikleri sentez (MNPs ve INPS sırasıyla) ve nano tanecikleri plCSA BP Birleşik (plCSA-MNPs ve plCSA-INPS) açıklandığı gibi detay başka bir yerde18.

2. floresans in vivo görüntüleme

  1. Hamile fareler hazırlanması
    1. Büyük bir kafes içinde aynı yük verimli bir erkek ile kadın CD-1 fareler (8-12 hafta) yerleştirin (erkek: kadın = 1:2) öğleden sonra ve onay vajinal takılan şu sabah. Vajinal bir fiş görülmektedir, fare embriyonik gün 0,5 (E0.5) tanımlayın.
    2. Ev hamile yalnız fare ile karanlık bir 14 h ışık/10 h patojen ücretsiz hayvan bir odada döngüsü ve E14.5 kadar yiyecek ve su ücretsiz erişim sağlar.
  2. Nano tanecikleri İntravenöz enjeksiyon
    1. Önce yordamı, nano tanecikleri 0,22 mikron şırınga filtreden filtrasyon tarafından sterilize. Hamile fare E11.5 miktar ve birim nanopartikül enjeksiyon belirlemek için tartmak.
      Not: Nanopartikül enjeksiyon birim daha az % 1'den (birim/ağırlık) hamile fare vücut ağırlığının olması gerekir. Örneğin, nanopartikül enjeksiyon hacmi az 0.25 mL 25 g Mouse olmalıdır.
    2. Kuyruk ven genişletmek için kuyruk için 5-10 dk bir ısıtma yastığı ile sıcak.
    3. Enjeksiyon önce 28 g insülin enjektör INPS veya plCSA-INPS Aspire edin.
    4. Hamile fare fare kuyruğu ven erişimi kısıtlayan bir holding aygıt aktarın. Kuyruk bir alkol bez ile temizleyin. Sonra şırıngayı kuyruk damar içine ekleyin. Yavaş yavaş INPS veya plCSA-INPS (5 mg/kg ICG eşdeğeri) enjekte bile basınçla üzerinde 5-10 s.
      Not: Bu sonucu iğne damar içinde olduğunu gösterir çünkü bir blister kuyruk üzerinde görünüyorsa enjekte durdurmak. Şırınga hastalık iletim en aza indirmek için fare ve çapraz bulaşma arasında paylaştırılmamalıdır.
    5. Enjeksiyon zamanını kaydetmek. Bu arada, normalde 30-60 s alır enjeksiyon siteye kadar kanama durur, hafif basınç uygulayın.
  3. Vivo içinde görüntüleme
    1. 30 dakika sonra enjeksiyon, görüntü görüntüleme sistemi içinde vivo floresans kullanarak hamile fareler.
    2. 1.0 L/dak ve isoflurane anestezi biriminin ilişkili bir odasında % 2-4, bir oksijen akış hızı ile hamile fareler anestezi ve yavaş tarafından tam anestezi ve düzenli nefes doğrulayın. Ardından, görüntüleme odasına taşıyın. Hayvanlar sırtüstü pozisyonda tutmak görüntüleme odasına imzalat hamile fareler yer.
    3. Burun konisi % 1-2 isoflurane inhalasyon anestezi korumak için 1.0 L/dak bir oksijen akış hızı ile izin vermek için burnun ve ağzın üzerine getirin.
    4. ICG floresans sinyalleri görüntüye 2D-floresan ve fotografik parametreleri seçin. Otomatik poz ve uyarma/emisyon dalga boylarında ayarlamak 710/820 nm.
    5. Görüntüleme yordamının sonunda, anestezi durdurmak için isoflurane akını ve dikkatli bir şekilde hamile fareler için onların kafes dönmek.
    6. 48 h nanopartikül enjeksiyon sonra isofluorane ile hamile fareler anestezi ve baraj tarafından servikal çıkığı kurban. Fetus ve Graefe forseps, Graefe doku forseps, kullanma ve makas dissekan plasenta toplamak.
    7. Plasenta ve fetusa görüntüleme odası ve 2.3.4. adımda açıklanan yöntemi kullanarak görüntü içine yerleştirin.

3. HFUS değerlendirme embriyonik gelişim

  1. Hayvan modelleri
    1. Elde etmek ve hamile fareler 2.1. adımda açıklandığı şekilde hazırlayın.
    2. Görüntü hamile farelere E 6,5 (protokol 3.2 ve 3.3.3) adlı HFUS kullanın. İlk olarak, gün E6.5 embriyo görselleştirme tarafından gebelik onaylayın ve sonra rastgele hamile fareler üç gruba ayırmak: MNP grubu, plCSA-MNP grubu ve fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) grubu.
    3. PBS, MNPs veya plCSA-MNPs (1 mg/kg MTX eşdeğer) 2.2 adımda anlatıldığı gibi E6.5 başlayan her geçen gün hamile fareler kuyruk damar enjekte.
  2. Görüntüleme için hazırlık
    1. 24 h nano tanecikleri, enjeksiyon sonra görüntü görüntüleme sistemi HFUS kullanarak hamile fareler.
    2. Hamile fareler 2.3.2. adımda açıklandığı gibi anestezi. Görüntüleme platformu entegre sıcaklık denetimleri açın ve platformu ile 37-42 ° c onceden Hamile fareler bant kullanarak platformda sırtüstü pozisyonda güvenli.
    3. Yer burun konisi burun üzerinde anestezi birimine bağlı. % 2 isoflurane oksijen akış oranı 1.0 L/dk sabit anestezi korumak için geçerlidir.
    4. Kimyasal saç depilatory bir krem kullanarak karından kaldırın. Kalan kremayı iyice suya batırılmış gazlı bezle silin ve sonra karın jel kaplin akustik ile ceket.
  3. Yordam görüntüleme
    1. 40 MHz transducer mekanik kol yerleştirin.
    2. Fetus ve plasenta boyuna görüntüleri ile ilgi odak bölgede bulunan bölge edinmek için dönüştürücü pozisyonunu ayarlayýn.
    3. B-mod görüntüleme ve çözümleme
      Not: Film 1bakın.
      1. B-modu düğmesini tıklatın ve fetus ve plasenta görünüme gelene dönüştürücü karın üzerinde daha düşük. Tarama/donma Başlat/Durdur, Cine depolamak basın cine döngü depolamak ve basın kare görüntüleri depolamak için çerçeve depolamak için görüntüleme için tuşuna basın.
      2. Gebelik kesesi uzunluğu (GS), fetal taç kıç uzunluğu (CRL), biparietal çapı (BPD), karın çevresi (AC), plasenta çapı (PD) ve plasental kalınlığı (PT) çözümlemek için ölçü birimi düğmesini tıklatın.
    4. PW-Doppler görüntüleme ve çözümleme
      Not: Film 1bakın.
      1. İstimal ayni projeksiyon inceden inceye gözden geçirmek, PW düğmesini tıklatın, örnekleme birimi kutusu umbilikal arter ortasına yerleştirin ve görüntüleme başlatmak için Tarama/donma tuşuna basın. Umbilikal arter görüntüleri toplamak için Cine depolamak tıklatın.
      2. Umbilikal arter en yüksek hız (UA) hesaplamak için ölçü birimi düğmesini tıklatın.
    5. Renkli Doppler modunu görüntüleme ve çözümleme
      1. İstimal ayni projeksiyon inceden inceye gözden geçirmek, renk düğmesini tıklatın ve fetal kalp görüntüleri elde etmek için dönüştürücü pozisyonunu ayarlayýn. Görüntüleme ve görüntüleri toplamak için Cine Mağaza başlatmak için tarama/donma tuşuna basın.
      2. Fetal kalp hızı (HR) hesaplamak için ölçü birimi düğmesini tıklatın.

4. HPLC analiz

  1. Doku hazırlık
    1. Hamile fareler geç gebelik MNPs veya plCSA-MNPs (1 mg/kg MTX eşdeğeri) tek bir doz enjekte (Örn., E14.5) 3.1.3 adımda anlatıldığı gibi.
    2. 24 saat sonra farelerin 240 μg/vücut ağırlığı (g) avertin mayi bir iğne ile anestezi. Fareler tam anestezi doğrulamak için bir ayak çimdik yanıt sağlamak.
    3. Göğüs bölgesinde % 75 etanol ile sprey. (Sağ kulakçık kesme ve sol ventrikül sıvı) kardiyak perfüzyon gerçekleştirmek daha önce ayrıntılı19,20 ile 50 mL buz gibi % 0,9 serum ilişkisiz nano tanecikleri kaldırmak 10 dakika içinde açıklandığı gibi.
    4. Baraj ötenazi. Fetus ve plasenta Graefe pens, makas ve Graefe doku forseps, anatomi kullanarak toplamak için sezaryen gerçekleştirmek ve doku analizi önce-80 ° C'de depolayın.
    5. Homojenizasyon çözüm (% 10 perklorik asit) hazırlamak ve buz üzerinde tutun. Yaklaşık 200 mg doku toplamak ve her örnek için 500 μL homojenizasyon çözüm ekleyin. Bir homogenizer tam hızda 30 s ve tekrar kullanarak örnekleri homojenize bu yordamı iki kez.
    6. 14.000 × g 4 ° C'de 20 dk için de örnekler santrifüj kapasitesi Süpernatant (yaklaşık 300 μL) 0,45 mikron şırınga filtre ile filtre ve elde edilen sıvı bir HPLC şişe aktarın. Örnek şişeleri enjeksiyon için Otomatik Örnekleyici tepsisini yerleştirin.
  2. Standartların hazırlanması
    1. Ertesi gün eriyik için mobil faz hazırlamak: 40 mM potasyum fosfat dibasic (pH 4.5) ve Asetonitril (88:12, v/v). Çözüm 0,45 mikron gözenek boyutu şırınga filtre ile filtre ve elde edilen sıvı temiz HPLC rezervuar biberondan aktarın.
      Not: pH 0,1 M fosforik asit ile ayarlayın. Ultrasonik titreşim 15dk için kullanmak için mobil faz her zaman önceden degas için kullanın.
    2. MTX 10 mg içine bir 1,5 mL santrifüj tüpü tartın. 1 mL 1 M sodyum hidroksit ekleyin.
    3. Girdap MTX tamamen eriyene kadar yüksek hızda.
      Not: Bu birincil stok ve -20 ° C'de birkaç ay saklanabilir.
    4. İkincil MTX hisse senedi (500 μg/mL) oluşturmak için mobil faz 950 μL birincil stokunun 50 μL oranında seyreltin.
      Not: buzda kullanmak kadar saklamak ve taze günlük hazırlamak. Örnek enjeksiyon sonra farklı çözümler karıştırma kaynaklanan doruklarına önlemek için standartların hazırlanması için mobil faz kullanmak önemlidir.
    5. Başka dilutions standartları (Tablo 1) oluşturmak için yapmak. Standartları buza depolamak ve taze günlük hazırlamak. Standartları serisi deneysel örnekleri ile çalışır.
NumarasıSon konsantrasyonu (μg/mL)500 μg/mL standart, μLTelefon phase(μL)
10,51999
212998
32.55995
41020980
52550950
650100900
7100200800

Tablo 1. MTX için standart eğri hazırlayın. MTX standart çözüm son konsantrasyonu 0.5-100 olduğunu μg/mL.

  1. HPLC araçları ve çalışma parametreleri
    Not: Solvent pompa ile bir UV spektrofotometrik dedektörü donatılmış bir HPLC sistemi örnekleri analiz edildi (313 nm) ve bir C18 sütun (250 × 4.6 mm, 5 mikron partikül büyüklüğü).
    1. Hava sistemden kaldırmak için HPLC degasser açın. Sütun ile temel gürültüyü azaltmak 30 dk için mobil faz sıcaklığına akışını açın.
    2. Sütun sıcaklık 25 ° C'ye ayarlayın, 20 μL örnek birimleri 1 mL/dk akış hızında enjekte ve Yöntem çalıştırma Analizi başlatmak için tıklatın.
    3. El ile çalışan tamamlandığında, mobil faz HPLC sınıf Asetonitril için değiştirin. Sistemi korumak yaklaşık 15 dakika çalıştırın.
      Not: önerilen süre takip bu adımı gerçekleştirmek için başarısızlık için sütun zarar görmesine neden olabilir.
    4. Kantitatif analiz için faiz HPLC sistemi yazılımı kullanarak standart MTX doruklarına altında alanlarda hesaplayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu makale, nano tanecikleri MTX (plCSA-MNPs) veya ICG (plCSA-INPS) ile yüklenen plCSA BP Birleşik intravenöz hamile fareler enjekte edildi. İn vivo görüntüleme plCSA-INP enjeksiyon sonra rahim 30 dk bölgesinde güçlü ICG sinyaller saptandı. INPS esas olarak karaciğer ve dalak bölgesi (Şekil 1A) için yerelleştirilmiş. PlCSA-INP enjeksiyon sonra 48 h hamile fareler, ICG sinyalleri sadece yok sinyallerle plasenta fetus (Şekil 1B

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu makale, plCSA-BP-güdümlü nano tanecikleri plasenta uyuşturucu teslimini hedefleme için verimli bir araç olup olmadığını belirlemenize için üç yöntem sistem anahat. Kızılötesi floresan ICG sinyal izlemek için Imaging vivo içinde kullanımı plCSA-BP. kullanma plasental hedefleme özgüllük teyit HFUS ve HPLC, biz gösterdi plCSA BP Birleşik nano tanecikleri etkili bir şekilde sadece MTX sunabilirsiniz Plasenta hücreleri, fetus için değil.

Deneyler Imaging vivo içinde floresans i...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

X.F. ve B.Z. mucitler plasenta özgü ilaç teslim yöntemi kapsar SIAT tarafından patent başvurusu PCT/CN2017/108646 gönderilmiş ve uygulama vardır. Diğer yazarlar onlar rakip hiçbir ilgi alanlarına sahip bildirin.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu eser hibe Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81771617) ve doğal Bilim Vakfı, Guangdong için X.F. layık il (2016A030313178) tarafından desteklenen; bir hibe Shenzhen temel araştırma X.F için ödül fonu (JCYJ20170413165233512); Eunice Kennedy Shriver Ulusal Enstitüsü Çocuk Sağlığı ve Ulusal Sağlık Enstitüleri Ödülü numarası R01HD088549 altında insan gelişimi (içeriği yalnızca yazarlar sorumludur ve mutlaka resmi temsil etmiyor Ulusal Sağlık Enstitüleri kez) için N.N.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
CD-1 farelerBeijing Vital River201Dişi (8-12 hafta)
İnsülin şırıngasıIV enjeksiyonu içinBD328421
Nanopartikül sentezi içinmutlakSinopharm Chemical10009218
Soya fasulyesi lesitiniAvanti Polar Lipidsnanopartikül sentezi için441601
DSPE-PEG-COOHAvanti Polar LipidsNanopartikülsentezi için 880125 Nanopartikül sentezi için
PLGASigma-Aldrich719897
Nanopartikül sentezi içinultrasonik işlemciSonicsVCX130
Nanopartikül sentezi içinmetotreksat (MTX)Sigma-AldrichV900324
İndosiyanin yeşili (ICG)Sigma-Aldrich1340009 fosfat
tamponlu salin (PBS)görüntüleme HiklonSH30028.01
IVIS spektrum cihazıPerkin Elmerin vivo görüntüleme için
Ultrason iletim jeliGuanggongZC4252418bakımı için
izofluranLunan İlaçI0040
Tüy dökücü kremNairKürk çıkarmak içinTMG001
40 MHz dönüştürücügörüntüleme içinVisualSonicsMS550S
Ultrason görüntüleme için yüksek frekanslı ultrason görüntüleme sistemiUltrasongörüntüleme içinVevo2100
Anestezi içinAvertinSigma-AldrichT48402
Şırınga pompasıMindraySK-500IIIiçinkardiyak perfüzyon
Kardiyak perfüzyon için% 0.9 tuzlu su çözeltisiMeilunbioMA0083
1.5 mL Polipropilen tüplerAXYGENMCT-150-C-80
° C dondurucuThermo Fisher Scientific88600V
SantrifüjCenceH1650R
Perklorik asitSigma-Aldrich311421protein
homojenizatörü içinSCIENTZSCIENTZ-48dokuyu homojenleştirmek için
Şırınga filtresi (0.45 μ m)MiliporeSLHV033RS01
Sodyum hidroksitMTXSinopharm Chemical10019763
HPLC içinsu670650620
Potasyum fosfat dibazikSinopharm Chemical20032117HPLC
için AsetonitrilJKchemical932537HPLC
C18 kolonSuları için kimyasalHPLC için186003966
HPLC sistemiHPLC içinShimadzu
etanol İn vivo için Anestezi Ultrason Avertin HPLC şişelerini çözmek için

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rodger, M. A., et al. The Association of Factor V Leiden and Prothrombin Gene Mutation and Placenta-Mediated Pregnancy Complications: A Systematic Review and Meta-analysis of Prospective Cohort Studies. PLOS Medicine. 7 (6), e1000292(2010).
  2. Rodger, M. A., et al. Inherited thrombophilia and pregnancy complications revisited. Obstetrics & Gynecology. 112 (2 Pt 1), 320-324 (2008).
  3. Brenner, B., Aharon, A. Thrombophilia and adverse pregnancy outcome. Clinics in Perinatology. 34 (4), 527-541 (2007).
  4. Fisk, N. M., McKee, M., Atun, R. Relative and absolute addressability of global disease burden in maternal and perinatal health by investment in R&D. Tropical Medicine & International Health. 16 (6), 662-668 (2011).
  5. Fisk, N. M., Atun, R. Market failure and the poverty of new drugs in maternal health. PLOS Medicine. 5 (1), e22(2008).
  6. Kaitu'u-Lino, T. uJ., et al. Targeted nanoparticle delivery of doxorubicin into placental tissues to treat ectopic pregnancies. Endocrinology. 154 (2), 911-919 (2013).
  7. King, A., et al. Tumor-homing peptides as tools for targeted delivery of payloads to the placenta. Science Advances. 2 (5), e1600349(2016).
  8. Beards, F., Jones, L. E., Charnock, J., Forbes, K., Harris, L. K. Placental Homing Peptide-microRNA Inhibitor Conjugates for Targeted Enhancement of Intrinsic Placental Growth Signaling. Theranostics. 7 (11), 2940-2955 (2017).
  9. Cureton, N., et al. Selective Targeting of a Novel Vasodilator to the Uterine Vasculature to Treat Impaired Uteroplacental Perfusion in Pregnancy. Theranostics. 7 (15), 3715-3731 (2017).
  10. Paul, J. W., et al. Drug delivery to the human and mouse uterus using immunoliposomes targeted to the oxytocin receptor. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 216 (3), e281-e283 (2017).
  11. Zhang, B., et al. Placenta-specific drug delivery by trophoblast-targeted nanoparticles in mice. Theranostics. 8 (10), 2765-2781 (2018).
  12. Fan, X., et al. Noninvasive monitoring of placenta-specific transgene expression by bioluminescence imaging. PloS One. 6 (1), e16348(2011).
  13. Murata, M., Tahara, K., Takeuchi, H. Real-time in vivo imaging of surface-modified liposomes to evaluate their behavior after pulmonary administration. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 86 (1), 115-119 (2014).
  14. Ito, A., et al. New whole-body multimodality imaging of gastric cancer peritoneal metastasis combining fluorescence imaging with ICG-labeled antibody and MRI in mice. Gastric Cancer. 17 (3), 497-507 (2014).
  15. Mazza, M., et al. Liposome-Indocyanine Green Nanoprobes for Optical Labeling and Tracking of Human Mesenchymal Stem Cells Post-Transplantation In Vivo. Advanced Healthcare Materials. 6 (21), (2017).
  16. Greco, A., et al. High frequency ultrasound for in vivo pregnancy diagnosis and staging of placental and fetal development in mice. PloS One. 8 (10), e77205(2013).
  17. Spurney, C. F., Leatherbury, L., Lo, C. W. High-frequency ultrasound database profiling growth, development, and cardiovascular function in C57BL/6J mouse fetuses. Journal of the American Society of Echocardiography. 17 (8), 893-900 (2004).
  18. Zhang, B., et al. Synthesis and characterization of placental chondroitin sulfate A (plCSA) -targeting lipid-polymer nanoparticles. Journal of Visualized Experiments. , (2018).
  19. Devraj, K., Guerit, S., Macas, J., Reiss, Y. An In Vivo Blood-brain Barrier Permeability Assay in Mice Using Fluorescently Labeled Tracers. Journal of Visualized Experiments. (132), (2018).
  20. Beeton, C., Chandy, K. G. Isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with EAE. Journal of Visualized Experiments. (10), 527(2007).
  21. Watson, E. D., Cross, J. C. Development of structures and transport functions in the mouse placenta. Physiology. 20 (3), 180-193 (2005).
  22. Frangioni, J. V. In vivo near-infrared fluorescence imaging. Current Opinion in Chemical Biology. 7 (5), 626-634 (2003).
  23. Flores, L. E., Hildebrandt, T. B., Kuhl, A. A., Drews, B. Early detection and staging of spontaneous embryo resorption by ultrasound biomicroscopy in murine pregnancy. Reproductive Biology and Endocrinology. 12, 38(2014).
  24. Khankin, E. V., Hacker, M. R., Zelop, C. M., Karumanchi, S. A., Rana, S. Intravital high-frequency ultrasonography to evaluate cardiovascular and uteroplacental blood flow in mouse pregnancy. Pregnancy Hypertension. 2 (2), 84-92 (2012).
  25. Phoon, C. K. Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development. Pediatric Research. 60 (1), 14-21 (2006).
  26. Pallares, P., Gonzalez-Bulnes, A. Non-invasive ultrasonographic characterization of phenotypic changes during embryo development in non-anesthetized mice of different genotypes. Theriogenology. 70 (1), 44-52 (2008).
  27. Parvani, J. G., Gujrati, M. D., Mack, M. A., Schiemann, W. P., Lu, Z. -R. Silencing β3 integrin by targeted ECO/siRNA nanoparticles inhibits EMT and metastasis of triple-negative breast cancer. Cancer Research. 75 (11), 2316-2325 (2015).
  28. Zhang, B., et al. Targeted delivery of doxorubicin by CSA-binding nanoparticles for choriocarcinoma treatment. Drug Delivery. 25 (1), 461-471 (2018).
  29. Jenkins, D. E., et al. Bioluminescent imaging (BLI) to improve and refine traditional murine models of tumor growth and metastasis. Clinical & Experimental Metastasis. 20 (8), 733-744 (2003).
  30. Keelan, J. A., Leong, J. W., Ho, D., Iyer, K. S. Therapeutic and safety considerations of nanoparticle-mediated drug delivery in pregnancy. Nanomedicine. 10 (14), 2229-2247 (2015).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Nanopartik l Ta y c Sistemn Vivo G r nt lemeY ksek Frekansl UltrasonY ksek Performansl S v KromatografisiMetotreksat iletimiPlasental Kondroitin S lfat Ba lanmasEmbriyonik G n 14 5 FareFetal Plasental Geli imNanopartik l Enjeksiyon Protokol

İlgili makaleler