Burada, bir Yağ dokusundan elde edilen stromal vasküler fraksiyonu ve osteoartrit olan insan hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından diz işlevlerini geliştirmek için uygulama üretmek için bir protokol mevcut.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Burada, bir Yağ dokusundan elde edilen stromal vasküler fraksiyonu ve osteoartrit olan insan hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından diz işlevlerini geliştirmek için uygulama üretmek için bir protokol mevcut.
Osteoartrit (OA) en yaygın zayıflatıcı bozuklukları biridir. Son zamanlarda, sayısız girişimde mezenkimal kök hücrelerin (MSCs) farklı formları kullanarak diz fonksiyonlarını geliştirmek için yapılmıştır. Kore, kemik iliği konsantreleri ve kordon kan kaynaklı kök hücre Kore Gıda ve ilaç yönetimi (KFDA) tarafından kıkırdak rejenerasyon için onaylanmıştır. Buna ek olarak, bir Yağ dokusundan elde edilen stromal vasküler fraksiyonu (SVF) tarafından KFDA insan hastalarda eklem enjeksiyonları için izin. Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF yanı sıra mezenkimal kök hücre hücre dışı matriks (ECM) içerir. ECM, hyaluronik asit (HA) ve trombosit açısından zengin plazma kalsiyum klorür karışımından aktif (PRP) ile birlikte MSCs kıkırdak yeniden ve diz işlevlerini geliştirmek için yardımcı olabilecek çeşitli sitokinlerin excretes. Bu makalede, biz OA insan hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici tarafından diz işlevlerini geliştirmek için bir protokol sundu. Protokol sonucu ilk birkaç ek yayınları tarafından takip 2011 yılında bildirildi. Protokol collagenase ile karışık otolog lipoaspirates elde etmek için liposuction içerir. Bu lipoaspirates-collagenase karışımı daha sonra kesme ve iğne kadar enjeksiyon sırasında yapışmasına neden büyük fibröz doku kaldırmak için homojenize. Daha sonra karışımı Yağ dokusundan elde edilen SVF elde etmek için inkübe. Hem Yağ dokusundan elde edilen MSCs ve ECM, kalıntıları içeren elde edilen Yağ dokusundan elde edilen SVF diz HA ile birlikte hastaların içine enjekte edilir ve kalsiyum klorür PRP harekete geçirmek. Diz ağrısı, şişkinlik ve MRI kanıt hiyalin kıkırdak benzeri doku birlikte hareket aralığını iyileştirme sonuçlanan bizim protokolü ile tedavi edilen hastaların üç kasa bulunmaktadır.
Mezenkimal kök hücre (MSCs) kıkırdak1,2,3,4,5,6yeniden yeteneğine sahip olduğu bilinmektedir. Onlar kolayca çeşitli kaynaklardan elde edilebilir: kemik iliği, kordon kanı ve yağ dokusu diğerleri arasında. Bu kaynaklar arasında yağ dokusu nerede MSCs yeterli sayıda klinik ayarları7,8kıkırdak yeniden oluşturmak için herhangi bir kültür genişleme olmadan elde edilebilir tek kaynağıdır. Otolog Kemik iliği stromal vasküler kesir (SVF) kolayca de elde edilebilir. Ancak, kök hücre kültürü olmayan genişletilmiş iliğinde bulunan çok düşük7,8sayısıdır. Kordon kanı MSCs yeterli sayıda içerebilir. Ancak, kordon kanı otolog SVF hazır bir kaynak değildir.
İşleme yağ dokusu SVF elde etmek için birçok yöntem klinik uygulamaları için uygundur. Bunlar MSCs collagenase, kullanarak Yağ dokusundan elde etme yöntemi arasında geliştirilen ve Zuk vd tarafından onaylandı 5 , 6, çok iyi kabul edilir. Collagenase kullanarak bu yöntem ortopedi klinik uygulamalar için değiştirildi. Klinik ayarları için uygulanması için sistemi kolaylık tutarken kısırlık korumak için kapalı bir sistem olması gerekir. Bu makalede sunulan bir belirli değişiklik lipoaspirates homojenizasyon içerir. Küçük ölçekli lipoaspirates nispeten yağ dokusu düzensiz dağılımı sonuçlanan büyük olanlar daha hızlı sindirilir. Ayrıca, bu daha büyük ölçekli lipoaspirates eklem enjeksiyonları9,10gerçekleştirirken yapışmasına neden olabilir şırınga ve iğne kadar fibröz doku üretebilir. Bu sorunları önlemek için lipoaspirates tarafından kesim ve lipoaspirates collagenase ile kuluçka önce kıyma homojenize. Elde edilen Yağ dokusundan elde edilen SVF homojenize11olmayan lipoaspirates göre daha düzgün hücre dışı matriks (ECM) içerebilir. SVF içinde bulunan kırık dökük ECM iskele12olarak çalışabilir.
2009 yılında, Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF Kore Gıda ve ilaç yönetimi (KFDA) en az işlemi olan bir tıbbi tesis içinde bir hekim13tarafından işlendiğinen tarafından izin verilmiş. Daha sonra Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF potansiyel olarak kıkırdak benzeri doku10,14,15 Yenileyici tarafından Osteoartrit (OA) hastalarda diz işlevlerini geliştirmek için potansiyel bir aracı olarak kullanılmaktadır , 16 , 17 , 18 .
2011 yılında Pak ilk kez Yağ dokusundan elde edilen kök hücreler (ASCs) Yağ dokusundan elde edilen SVF bulunan potansiyel olarak trombosit açısından zengin ile enjekte edildiğinde insan OA hastalarda kıkırdak benzeri doku Yenileyici diz işlevlerini artırabilir gösterdi plazma (PRP) 14. Buna ek olarak, Pak et al. 2013 maddelerle ilgili 91 hastalarda güvenlik veri bildirdin. Bu Emanet verilerde bildirilen kaba etkinliği oranı % 67'si15oldu. Daha sonra bir menisküs gözyaşı chondromalacia patellae10,ve16,17 olan hastalarda kıkırdak benzeri doku yenilenmesi nedeniyle potansiyel olarak geliştirilmiş diz işlevleri Pak et al. tarafından ek çalışmalar gösterdi ,18. Rapor makaleler göre bu kök hücreleri 100 gr yağ dokusu Bu makalede sunulan protokolü tarafından işlenen yer alan 1.000.000-40.000.000 bağlı olarak hastaların özellikleri8, arasında değişen bilinmektedir 19 , 20 , 21 , 22 , 23.
Burada, bir klinik protokol insan diz OA HA ve kalsiyum klorür ile aktive PRP ile Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF kullanarak mevcut. Kısırlık, korumak için kapalı, el ile bir sistem içeren bu klinik protokolünün ilk sürümünü 201114' te bildirildi. Aynı protokol optimize edildi, kısırlık, bakımı ve 2013 ve 201610,15' olduğu bildirildi. Burada, en iyi duruma getirilmiş Protokolü sundu. Protokol şematik bakış Şekil 1' de sunulmuştur.

Şekil 1: protokol şematik bakış. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Onay ve olgu sunumları takiben rapor için kullanıcıdan Myongji Üniversitesi Kurumsal değerlendirme komitesi Komitesi (MJUIRB) tarafından feragat. Daha fazla, bu klinik protokol KFDA Helsinki Bildirgesi ve düzenleme yönergeleri ile uyumlu oldu. Yordamlar için Hastalardan bilgilendirilmiş izinlerin elde edilmiştir.
1. liposuction
Not: steril tekniği ile gerçekleştirin.
2. steril kapalı sistem ile ASC/ECM karışımı hazırlanması
3. PRP hazırlık steril tekniği ile
4. ASC/ECM karışımı dayalı tedavi
5. tedavi sonrası takip
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
3 hasta (87 yaşında kadın ile sahne 3 OA, bir 68 yaşındaki erkek ile birinci aşama 3 OA ve bir 60-year-old kadınla sahne 3 OA) tıbbi geçmiş kalıcı diz ağrısı klinik için sunulan ve istenen herhangi bir önemli geçmiş potansiyel için olmadan Otolog yağ dokusundan elde edilen SVF tedavi. Tüm üç hasta ortopedik cerrah tarafından muayene onların diz vardı ve total diz değiştirme (TKR) için teklif edildi ve ameliyat olmak istekli değildi. Önce yordamı, steroidler ve HA birden çok enjeksiyonlari...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
2001 yılında Zuk ve ark. kollajen matris collagenase6ile aşağı kırarak Yağ dokusundan izole kök hücre. Daha sonra Grup, bu kök hücre kaynaklı mezenkimal kanıtlayan bu kök hücrelerin Yağ dokusundan izole kıkırdak ve mesoderm kökenli, diğer dokuların içine dönüştürebilir gösterdi.
Aynı şekilde, yordamın bu makalede sunulan benzer yöntem insan hastalara uygulamak için değiştirilmiş bir protokoldür. Protokol ana değişiklik elde etme ve lipoaspirates yordamı gerçekl...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar ifşa gerek yok.
Yazar, Mipro tıbbi klinik ve Jaepil/David Lee tarafından şekil tasarım personelinden destek kabul eder. Bu eser araştırma hibe biyo & Tıbbi teknoloji geliştirme programı (sayı NMG-2017M3A9E4078014); MSIT tarafından finanse edilen NMG tarafından desteklenmiştir ve Ulusal Araştırma Vakfı, Kore (ICT (numaraları NMG-2017R1A2B4002315 ve NATO Mukabele Gücü-2016R1C1B2010308) ve Bilim Bakanlığı tarafından finanse edilen NMG).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Malzeme< / güçlü> | |||
| % 5 Betadine (povidon-iyot) | Firson Co., Ltd. | ||
| %2 Lidokain | Daehan İlaç A.Ş. | ||
| Şişen çözelti | Myungmoon Ecz. Ltd. Şti. | N01BB01 | Çözelti 500 mL normal salin, 40 mL %2 lidokain, 20 mL %0.5 markain ve 0.5 mL epinefrin 1:1000'den oluşuyordu. |
| Liberase TL ve TM araştırma notu | Roche Uygulamalı Bilimler | 5401020001 | |
| D5LR | Dahan Ecz. Co., Ltd. | 645101072 | Laktasyonlu Ringer solüsyonunda %5 dekstroz |
| Antikoagülan sitrat dekstroz çözeltisi | Fenwal, Inc. | NDC: 0942-0641 | Çözelti %0.8 sitrik asit, %0.22 sodyum sitrat ve %0.223 dekstrozdan oluşuyordu. |
| %3 (a/h) Kalsiyum klorür | Choongwae İlaç A.Ş. | ||
| % 0,5 (a/h) HA (Hyaluronik asit) | Dongkwang eczane Co., Ltd. | ||
| %0,25 Ropivakain | Huons Co., Ltd. | 670600150 | |
| Ekipman | |||
| 3.0 mm Kanül | WOOJU Tıbbi Aletler A.Ş. | ||
| ML30200 60 mL Luer-Lock şırınga | BD (Becton Dickinson) | ||
| Santrifüj Namlu Kiti | CPL Co., Ltd. | 30-0827044 | |
| Bıçak içeren doku homojenizatörü | CPL Co., Ltd. | 30-0827045 | |
| Döner inkübatör karıştırıcı | Medikan Co., Ltd | MS02060092 | |
| Santrifüj | Hanil Scientific Inc. | CE1133 | |
| Manyetik Rezonans Görüntüleme | Philips Medikal Sistemler A.Ş. | 18068 | |
| Ultrason Görüntüleme Sistemi | Samsung Medison co., Ltd | CT-LK-V10-ICM-09.05.2007 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste