Mikroelektrot Impalement yöntemi bir kanüle orta serebral arter membran potansiyelini kaydetmek için

Summary

Bu makalenin birincil amacı, mikroelektrot Kazığa oturtma yöntemini kullanarak orta serebral arter membran potansiyelinin (V_m) nasıl kaydetilme ayrıntılarını sağlamalıdır. Kanüle orta serebral arter miyojenik tonu elde etmek için dengelenmiş, ve damar duvarı yüksek direnç mikroelektrotları kullanılarak kazığa olduğunu.

Abstract

Membran potansiyeli (V_m) vasküler pürüzsüz kas hücrelerinin damar tonu ve böylece bir organ kan akışını belirler. Hastalık koşullarında V_m düzenleyen iyon kanalları ve elektrojenik pompalar ifade ve fonksiyon değişiklikleri potansiyel v_mdeğiştirebilir, vasküler ton, ve kan akışı. Böylece, Elektrofizyoloji temel bir anlayış ve doğru sağlıklı ve hastalıklı Devletler V_m kaydetmek için gerekli yöntemleri esastır. Bu yöntem v m 'yi geri yüklemek için farklı farmakolojik ajanlar kullanarak modül V_m izin verecektir. Her ne kadar çeşitli yöntemler vardır, her biri avantajları ve dezavantajları ile, bu makalede mikroelektrot Kazığa oturtma yöntemi kullanarak orta serebral arter gibi kanüllü direnç damarlarından V_m kaydetmek için protokoller sağlar. Orta serebral arterlerin bir miyografi odasında miyojenik tonu elde etmek için izin verilir, ve damar duvarı yüksek direnç mikroelektrotlar kullanılarak kazığa. V_m sinyali, Digitized ve analiz edilen bir elektrometre aracılığıyla toplanır. Bu yöntem, hücrelere zarar vermeden ve membran direncini değiştirmeden bir damar duvarının V_m 'nin doğru bir şekilde okunmasını sağlar.

Introduction

Bir hücrenin membran potansiyeli (V_m), plazma membranında iyonik şarjın göreceli farkını ve membranın bu iyonlara göreli geçirgenliğini ifade eder. V_m , iyonların diferansiyel dağılımı ile üretilir ve iyon kanalları ve pompaları ile korunur. K⁺, na⁺ve CL gibi Iyon kanalları, dinlenme V_m'ye önemli ölçüde katkıda bulunur. Vasküler pürüzsüz Kas hücreleri (VSMCs) dört farklı türde K⁺ kanal¹, iki tip gerilim-Gated CA^{2 +} kanal (Vgcc)², iki tip CL⁻ kanal^{3, 4 ,} <....

Protocol

Erkek fareler, laboratuvar hayvan bakımı (AAALAC) değerlendirme ve akreditasyon için dernek tarafından onaylanmış UMMC, hayvan bakım tesisinde yer aldı. Hayvanların çalışma boyunca yiyecek ve suya ücretsiz erişimi vardı. Hayvanlar kontrollü bir ortamda 24 ± 2 °C sıcaklıkta, 60 – 80% ve 12 saat ışık/karanlık Döngülerde nem seviyeleri ile korundu. Tüm protokoller UMMC hayvan bakımı ve kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. ekipmanların hazırlanması

1. Bir çift kanallı diferansiyel elektrometre amplifikatör yerleştirin ( malzeme tablosunabakın) gemi odasına yakın ve istenilen yerde.
2. A veya B amplifikat....

Results

Sunulan yöntem, kanüle edilen damarlarda V_m kaydetmek için güvenilir bir şekilde kullanılabilir. MCA 'yı beyinden nasıl yalıtmayı anlatan kısa bir prosedür Şekil 1a'da sunulmuştur. Beyni kafatasından ayırdıktan sonra, MCA dışarı disseke ve düşük kalsiyum PSS içeren bir petri çanak yerleştirilir. Bağlı olan bağ dokusunun bir kısmı da MCA ile birlikte, izolasyon sırasında MCA 'ya zarar vermemek için yay makas ve forseps kullanarak disseke oldu. Dikka.......

Discussion

Bu makalede, bir kanüle damar hazırlama V_m kaydetmek için keskin bir mikroelektrot Kazığa oturtma yöntemi kullanmak için gerekli adımları sağlar. Bu yöntem yaygın olarak kullanılır ve yüksek kaliteli, tutarlı bir dizi deneysel soruya cevap V_m kayıtları sunuyor.

Bazı kritik hususlar ve sorun giderme adımları, yöntemin başarısını sağlamak için burada açıklanmıştır. Mikroelektrot (netlik ve direnç) ve hücresel Proses kalitesi V_m'nin stabilitesini ve doğruluğunu et.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Diseksiyon aletleri
Aneshetic Vaporizatör	Parkland bilimsel	V3000PK
Diseksiyon mikroskobu	Nikon Instruments Inc., NY	Eclipse Ti-S
Kleine Giyotin Tip 7575	Harvard Aparatı, MA	73-198
Littauer Kemik Kesici	Güzel bilim araçları	16152-15
Moria MC40 Ultra İnce Forseps	Güzel bilim aletleri	11370-40
Cerrahi makas Keskin-Künt	İnce bilim aletleri	14008-14
Sütür	Harvard Aparatı	72-3287
Vannas Yaylı Makas	Güzel bilim aletleri	15018-10
Electrophysiology Instruments
Şarj bağlantılı cihaz kamerası	Qimaging, , BC	Retiga 2000R
Diferansiyel elektrometre amplifikatörü	WPI	FD223A
Hat içi basınç dönüştürücü	Harvard Aparatı, MA	MA1 72-4496
Mikromanipülatör	Thor laboratuvarları	PCS-5400
Mikroelektrotlar	Warner Instruments LLC, CT	G200-6,
Mikro Fil (Mikrofiber şırınga)	WPI	MF28G67-5
Mikroelektrot tutucu	WPI	MEH1SF
Miyograf	Yaşam Sistemleri Enstrümantasyonu, VT	CH-1-SH
Çektirme	Sutter Cihazı, San Rafael, CA	P-97
Titreşimsiz masa	TMC	3435-14
< güçlü > Yazılımlar< / güçlü >
Clampex 10	Moleküler cihazlar
p Kelepçe 10	Moleküler cihazlar
Görüntüleme yazılımı	Nikon, NY	NIS < elemanları
> güçlü Kimyasallar < / güçlü >
NaCl	Sigma	S7653
KCl	Sigma	P4504
MgSO4	Sigma	M7506
CaCl2	Sigma	C3881
HEPES	Sigma	H7006
Glikoz	Sigma	G7021
NaH2PO4	Sigma	S0751
NaHCO3	Sigma	S5761