Burada, nöropati gelişimini görüntülemek için bir immünopetik ıCR (Kanser Araştırma Enstitüsü) merkezi sinir sistemi enfeksiyonu murine modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Akut viral ensefalitik bozuklukların aynı hastalık puanları ile izlenmesi, Dang virüse bağlı nöropati içinde vivo göstermek için gerçekleştirilebilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Dang humması virüs kaynaklı akut viral Ensefalitis-benzeri hastalık bir Murine modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Ritim virüsü (DENV), sivrisinekler tarafından iletilen bir artthropod kaynaklı virüs,, plazma kaçağı nedeniyle ölümcül komplikasyonlar ile karakterize Dang Hemorajik ateş olarak bilinen şiddetli hastalığa neden olabilir, asit, plevral efüzyon, solunum sıkıntısı, şiddetli kanama ve organ bozukluğu. DENV enfeksiyonu birkaç olgu nörolojik belirtiler mevcut; Ancak çalışmalar DENV kaynaklı neuropathogenesis 'i daha fazla araştırmadı. Bu çalışmada, orta sinir sistemi (CNS) enfeksiyonu ile DENV indüksiyonu araştırılması için immünoteksel bir outbred ıCR (kanser araştırması Enstitüsü) fare kullanmak için bir protokol sunuyoruz, akut viral ensefalitis gibi progresyon takip Hastalığı.
Giriş
Flaviviridae ailesinin bir artthropod kaynaklı virüsü olan denv, üç viral yapısal proteini (capsid, premembran ve zarf) ve yedi viral yapısal olmayan PROTEINLERE (ns1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B) kodlayan pozıtıf anlamda RNA genomu içerir. ve NS5). Denv dört serotipleri (DENV1-4), hangi yaklaşık 390.000.000 kişi yıllık enfekte, hükümetler sivrisinek vektör ve hastalık kontrolü doğru önemli çabaları yönetmiş olsa bile küresel bir yük neden1. Şu anda, koruyucu aşılar ve terapötik antiviral ilaçlar geliştirilmesi altında ve daha uzun vadeli doğrulama gerektirir2. Klinik uygulamada, CNS enfeksiyonu olan bir Dang ha....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan etüdünün deneysel protokolleri, Tayvan bilim ve Teknoloji Bakanlığı tarafından kurulan yönergelere göre, ulusal savunma Tıp Merkezi 'nin (ıAUC numarası: 16-261) Kurumsal hayvan bakımı ve Kullanıcı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. enfeksiyon prosedürü
- Adapte olmayan DENV2 (strain PL046) stokları9 (aslen 2,5 x 107 ile 1 x 109 PFU/ml arasında değişen Tayvan 'da hastalık kontrolü merkezlerinden elde edilir).
- 1 x 106 PFU Ile Roswell Park Memorial Enstitüsü (RPMI) 1640 orta 40 μL toplam hacmine virüs stok seyreltmeli.
- 10 μL (2,5 x 105 PFU....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Dang patogenezi için hastalarda şiddetli Dang humması ile ilişkili nörolojik komplikasyonlar bildirilmiştir4. Bu vakalar klinikte nadir olmasına rağmen, DENV enfeksiyonunun immünoyetenekli bir duvar modeli oluşturmak sadece immünopatogenezi incelemek için değil, aynı zamanda CNS enfeksiyonu, nöroinflamasyon, nörotoksisite ve akut viral ensefalitis benzeri bir hastalık. Bu çalışmada, mevcut modelimize göre9,10
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Şiddetli Dang hastalığı hastalarının CNS 'inde denv enfeksiyonu tespit edilmiştir3,17, Dang patogenezi sırasında akut viral ensefalitin tezahürü olasılığını düşündürmektedir. Burada, özellikle DENV kaynaklı akut viral ensefalitis benzeri hastalıklara odaklanarak, şiddetli Dang CNS disfonksiyonunun katılımı ile ilgili olarak DENV enfeksiyonunun bir in vivo murine modelini bildiriyoruz. Önceki modeller ile karşılaştırıldığında, özellikle tek rota enfeksiyonu için (.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Bu çalışmada bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST107-2321-B-038-001) ve Intramural finansman 106TMU-CIT-01-2, Taipei, Tayvan hibe tarafından desteklenmektedir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Roswell Park Memorial Institute 1640 orta (RPMI) | Gibco | 11875-085 | Seyreltici virüs |
| 0.3 mL İnsülin Şırıngası | BD Ultra-FineII | 328838 | İntraserebral ve intraperitoneal enjeksiyon |
| Mikro terazi | METTLER TOLEDO'nun LabX | AL104 | Ağırlık faresi |
| Uyarlanmamış DENV2 (suş PL046) | Tayvan Hastalık Kontrol | Merkezleri-Enfekte fare | |
| Kanser Araştırmaları Enstitüsü (ICR) emziren fare | BioLASCO Taiwan Co., | Ltd-Fare | modelimiz |
Kaynaklar
- Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. Dengue infection. Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055(2016).
- Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities. Lancet Infectious Diseases. 17
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
