Epilepsi araştırmalarının zorluk klasik tedavinin yetersiz kaldığı hastalarda yeni tedaviler geliştirmektir. Yeni bir protokol kullanarak-implante edilmiş bir ilaç teslim sistemi yardımıyla-epileptik odak içine GABA elektroforetik teslim tarafından anestezik fareler nöbetleri kontrol edebiliyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
, Γ-aminobutirik asit elektroforetik teslim (GABA) epileptik odaklama içine fareler nöbetleri önler
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Epilepsi dünya çapında milyonlarca insanı etkileyen nörolojik bozukluklar grubudur. Hastaların% 70 ' inde ilaçlarla tedavi yararlı olsa da, ciddi yan etkiler hastanın yaşam kalitesini etkiler. Dahası, epileptik hastaların yüksek bir yüzdesi ilaç dirençli; onların durumunda, Nöroşirürji veya nöronörolojik gereklidir. Bu nedenle, epilepsi araştırmalarının önemli amacı, ilaç geçirmez hastalarda epilepsi tedavisine ya da yan etkilere gerek kalmadan tedavi edebilecek veya tekrarlayan nöbetleri önlemenin yeni terapileri keşfetmektir. Nöromühendislik, epileptik hastaları risk altında tedavi etmek için daha iyi çözümler bulmak üzere yeni stratejiler ve teknolojiler kullanarak yepyeni yaklaşımlar sağlar.
Epilepsi akut fare modelinde yeni bir deneysel protokol gösterisi olarak, doğrudan situ elektroforetik ilaç teslim sistemi kullanılır. Yani, mikrofluidik iyon pompası (Μfıp) içeren bir nöral prob, isteğe bağlı ilaç teslimi için ve yerel sinir aktivitesinin eşzamanlı kaydı implante edilir ve 4-aminopyridin kaynaklı (4AP kaynaklı) nöbet gibi kontrol edebilme yeteneğine sahip olduğunu göstermiştir Etkinlik (SLE) etkinliği. Γ-aminobutirik asit (GABA) konsantrasyonu, nöbet odağı bir antiepileptik etkiye ulaşmak için GABA tesliminin hassas kontrolü ile fizyolojik aralıkta tutulur ama overinhibisyon kaynaklı rebound patlamaları neden değil. Bu yöntem, hem patolojik aktivitenin hem de müdahalenin tespiti ile doğrudan epileptik odaklamaya karşı inhibitör nörotransmitter sağlayarak nöbetleri durdurmayı sağlar.
Deneysel yöntemle gelişmelerin bir sonucu olarak, SLEs nöbet başlangıcında hassas ayarlı GABA teslimat tarafından nöbet kontrolü sağlayan bir son derece lokalize bir şekilde indüklenmiş olabilir.
Giriş
Epilepsi en yaygın dördüncü nörolojik bozukluktur: nüfusun yaklaşık% 1 ' i epilepsi muzdarip ve etkilenen kişinin üçte biri tekrarlayan nöbetlere sahiptir. Çoğu durumda, nöbetler ilaç ile kontrol edilebilir. Ancak, ilaç tedavisi, uygun dozajı1,2bulmak için yıllar sürebilir her hasta için ayrı olarak ayarlanması gerekir. Ayrıca, ilacın çoğu yaşam kalitesini azaltmak ciddi yan etkilere sahiptir3,4,5,6,7. Son olarak, olguların% 30 ' unda hastalar ilaçl....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm deneysel prosedürler Institut de Neurosciences des Systèmes 'in etik yönergelerine göre yapılmıştır ve yerel etik komiteler ve veteriner ofisleri tarafından onaylanmıştır.
Not: Deneylerde Seventeen yetişkin erkek OF1 fareler kullanıldı. Fareler, gıda ve su mevcut reklam libitum ile 12 h ışık/karanlık döngüsü için eğitildi.
1. anestezi
- İntraperitoneal ketamin ve xylazine karışımı enjekte (100 mg/kg vücut ağırlığı ve 10 mg/kg vücut ağırlığı, sırasıyla) hayvan anestezize.
- Solunum hızını gözlemlemek ve fırçalayarak ve ağrıya fare tepkisi kontrol ederek aneste....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Anestezik farelerde 4AP epilepsi modeli ile burada sunulan prosedürü kullanarak, epileptik nöbetlerin kontrolü Sara odaklı olarak elde edilebilir. İmplantların kesin lokalizasyonu (Şekil 2) hipokampal yerel alan potansiyelleri (LFPS, Şekil 4) kaydetmeye, küçük hipokampal nöbetleri sağlamak ve nöbet başlangıcında GABA teslim etmek için yardımcı oldu. İmplantların lokalizasyonu, her denemenin ardından post hoc histolojiye göre doğr.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Epilepsi akut fare modelinde yeni bir deneysel protokol geliştirerek, SLEs, epileptik odaklanarak implante edilen bir Μfıp yardımıyla başarılı bir şekilde kontrol edilebilir. Temporal ve uzamsal hassasiyetle GABA teslim kabiliyeti sayesinde, 4 AP kaynaklı SLEs nöbetlerin başlangıcında kontrol edildi. Epilepsinin tedavisi teorik olarak mümkündür eğer nöral ağ deşarj kontrolü nöbet başlangıcı yerine elde edilir. Sunulan protokol bu mümkün olduğunu kanıtladı eğer enjekte inhibitör nörotransmitter lokalizasyonu, GABA, zamanı.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Teşekkürler
C.M.P. Uluslararası Eğitim Enstitüsü tarafından yönetilen bir Whitaker uluslararası akademik hibe fon kabul eder. Ak, Marie Curie ıEF (No. 625372) tarafından desteklenmektedir. A.W., Avrupa Birliği 'nin Horizon 2020 araştırma ve yenilik programı (Grant anlaşması No. 716867) kapsamında Avrupa Araştırma Konseyi (ERC) ' den finansman kabul ediyor. A.W. Ayrıca Aix-Marseille Üniversitesi-A * MıDEX, Fransız "ınvestissements d 'Avenir" programının mükemmellik girişimi 'nin de kabul edildiğini belirtiyor. Yazarlar, Dr. Ilke uguz, Dr. sahika Inal, Dr. Vincenzo curto, Dr. Mary Donahue, Dr. Marc Ferro ve Zsófia Maglóczky 'yi verimli tartışmalara katılmaları için onaylar.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 4AP | Sigma | 275875 | |
| Alexa Fluor 488 | Abcam | ab15007 | |
| Amplifikatör | Neuralynx, Montana, ABD | Dijital Lynx 4SX | |
| Amplifikatör | Ampliplex | KJE-1001 | |
| Atlas Stereotaksi | Allen Atlas | 978-0470054086 | |
| Borosilika cam pipet | Sutter | BF120-69-15 | |
| Beyin Matrisi | WPI | RBMA-200C | |
| Kemik düzeltici | FST | 16109-14 | |
| Konfokal mikroskop | Zeiss | LSM 510 | |
| Konnektör | INSTECH | SC20/15 | |
| Koton tige | Monoprix | EMD 6107OD | |
| Kapak astarı | Menzel-Cam | 15747592 | |
| DiI Leke | Thermo Fisher | D282 | |
| DMSO | Sigma | 11412-11 | |
| Matkap | FOREDOM | K1070 | |
| Forseps | FST | 11412-11 | |
| GABA | Sigma | A2129 | |
| GFAP Monoklonal Antikor | Thermofisher | 53-9892-80 | |
| GOPS | Sigma | 440167-100M | |
| Hamilton serisi | Hamilton | 80330 | |
| Başlık Vidası | Bileşen Beslemesi | TX00-2FH | |
| Isıtma yastığı | Harvard | aparatı 341446 | |
| Enjeksiyon Pompası | WPI | UMP3-3 | |
| Keithley | Tektoronix | 216A | |
| Ketamin | Renaudin | 5787419 | |
| Manyetik tutucu | Supertech Instruments | MH-1 | |
| Fareler | Charles River | 612 | |
| Motorlu manipülatör | Scientifica, İngiltere | IVM | |
| Na2HPO4 | Sigma | 255793 | |
| NaH2PO4 | Sigma | 7558807 | |
| NeuroTrace Tanımı | Thermofisher | N22880 | |
| Kağıt havlu | KIMBERLY CLARK | 7552000 | |
| PB | Sigma | P4417 | |
| PEDOT: PSS | CLEVIOS | ||
| PFA | Acros Organik | 30525-89-4 | |
| Rektal sıcaklık probu | Harvard cihazı | 521591 | |
| Ropivakain | KABI | 1260216 | |
| Tuzlu | Sigma | 7982 | |
| Neşter | F.S.T | AUST | |
| Beze | BD Medical | 324826 | |
| Serrefine kelepçe | FST | 18050-28 | 4 önerilir |
| Silikon prob | NeuroNexus, Michigan, ABD | A2x16-10mm-50-500-177 veya A1x16-5mm-150-703 | |
| Stereotoksik çerçeve | Çalmak | 51733U | |
| Superfrost Slide | ThermoScientific | J38000AMNZ | |
| Boru | INSTECH | LS20 | |
| Vazelin | Laboratoire Gilbert | 3518646126611 | |
| Vectashield DAPI | Vektör Laboratuvarları, California, ABD | H-1200-10 | |
| Vibratom, Leica VT1200S | Leica Microsystems | 1491200S001 | |
| Ksilazin | Bayer | 4007221032311 | |
| Silikon probu | Neuromicrosystems Ltd | A1x32_dbl_5.0_50_0_176_50 |
Kaynaklar
- Kwan, P., Palmini, A. Association between switching antiepileptic drug products and healthcare utilization: A systematic review. Epilepsy & Behavior. 73, 166-172 (2017).
- Belleudi, V., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
