Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sonraki Adım Taking: Bir Nöral Coaptation Ortotopic Hind Limb Transplant Modeli Sıçan Fonksiyonel Kurtarma Maksimize etmek

7.3K görüntülenme

DOI:

10.3791/60777

30 Ağustos 2020

Bu makalede

Özet

Bu protokol, immünoloji ve fonksiyonel iyileşme nin eşzamanlı çalışmasına yönelik sağlam, tekrarlanabilir vasküler kompozit allotransplant (VCA) modelini sunmaktadır. El dikilmiş vasküler anastomozlar ve nöral coaptation ile sağ orta uyluk arka ekstremite ortopik nakli titiz tekniği yatırım zaman fonksiyonel kurtarma çalışma yeteneği verir.

Özet

Özellikle ekstremite nakli ve genel olarak vaskülarize kompozit allotransplant (VCA) immünsupresif ve fonksiyonel nöromotor kurtarma mevcut sınırlamalar tarafından stymied edilmiştir geniş terapötik söz var. Birçok hayvan modelleri VCA benzersiz özellikleri incelemek için geliştirilmiştir, ama burada aynı anda mevcut VCA sınırlama her iki yönünü araştırmak için tasarlanmış sıçanlarda ortotopik arka ekstremite nakli sağlam bir tekrarlanabilir modeli mevcut: immünsupresyon stratejileri ve fonksiyonel nöromotor kurtarma. Modelin özünde titiz bir taahhüt dinleniyor, el dikilmiş vasküler anastomozlar ve femoral sinir ve siyatik sinir el dikilmiş nöral coaptation gibi zaman test mikrocerrahi teknikleri. Bu yaklaşım, rehabilitasyon, günlük faaliyetlerin devamı ve fonksiyonel testler yeteneğine sahip daha uzun ömürlü hayvanlar için izin dayanıklı ekstremite rekonstrüksiyonları verir. Konvansiyonel immünsupresif ajanların kısa süreli tedavisi ile, allotransplanted hayvanlar nakil sonrası 70 güne kadar hayatta, ve isotransplanted hayvanlar ameliyat sonrası 200 gün ötesinde uzun ömürlü kontroller sağlar. Nörolojik fonksiyonel iyileşme nin kanıtları ameliyat sonrası 30 gün mevcuttur. Bu model sadece VCA ve sinir rejenerasyonu için benzersiz immünolojik soruları sorgulamak için yararlı bir platform sağlar, ama aynı zamanda vca için özel olarak tasarlanmış yeni tedavi stratejileri in vivo test sağlar.

Giriş

Vaskülarize-kompozit allotransplant (VCA) veya kompozit doku allotransplant (CTA) daha geniş kategori altında ekstremite nakli henüz terapötik sözünü yerine getirmemiştir. Lyon, Fransa ve Louisville, Kentucky 1998 ve 1999 yılında ilk başarılı insan el nakli bu yana, 100'den fazla üst ekstremite nakli dikkatle seçilmiş hastalarda dünya çapında yapılmıştır1. Daha geniş uygulanabilirlik önemli immünsupresyon ve sınırlı fonksiyonel nöromotor kurtarma tarafından stymied olmuştur. Mevcut immünsupresyon stratejileri fırsatçı enfeksiyon2%77 insidansı karşısında akut ret% 85 insidansı ile sonuçlanır. Öte yandan, el nakli sonrası ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm deneyler Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na uygun olarak yapılmıştır ve Northwestern Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır. Belirli yordamlar IS00001663 protokolü altında gerçekleştirilmiştir.

NOT: İki sıçan suşları kullanıldı: Lewis sıçanları ve Ağustos Kopenhag x İrlandalı (ACI) sıçanlar. Hayvanlar üç tedavi grubuna ayrıldı: immün baskıolmadan allotransplant (ACI Lewis), konvansiyonel immün baskılama ile allotransplant (Lewis ACI) ve isotransplant (Lewis Lewis veya ACI ACI için). Lewis bir inbred gerginlik, ACI sıçanlar bir out-bred vahşi tip tems....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Sağkalım ve iyileşme titiz cerrahi tekniğe bağlıdır. Vasküler anastomozlara ve nöral anastomozlara dikkat edilmesi ve yukarıda açıklandığı gibi kemik uyumunun bu modelin başarısını en üst düzeye çıkarmak çok önemlidir. Operatif tasarım ve temsili anastomoz sonuçları Şekil 1'degösterilmiştir.

Genel mortalite immünsupresif stratejisine bağlı ydı ve izotransplante edilen hayvanların çoğunluğu Şekil 2'degörüldüğü gibi 100-200 ameliyat son.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Limb transplantasyonu, vaskülarize komponent allotransplantasyonu (VCA) daha geniş bir kategori altında, henüz yerine getirilmemiş olarak yaygın olarak uygulanabilir terapötik söz vardır. Ana barikatlar vca ve nöromotor kurtarma teknikleri şu anda kullanılan benzersiz çözülmemiş immünolojik sorunlar yatıyor. Yeni tekniklerin geliştirilmesi esnek, sağlam ve tekrarlanabilir hayvan modelleme bağlıdır.

VCA'da her biri özel avantajlara sahip4hayvan modeli kurulmuştur. İnsan .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma Frankel Vakfı ve Northwestern Memorial Hastanesi McCormick Grant (Operation RESTORE) tarafından finanse edilmiştir. Bu yayında bildirilen araştırma, T32GM008152 Ödül Numarası kapsamında Ulusal Sağlık Enstitüleri Ulusal Medicial Sciences Ulusal Enstitüsü tarafından desteklenmiştir. Bu çalışma Northwestern Üniversitesi Mikrocerrahi Çekirdek ve Davranışsal Fenotilik Core tarafından desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Anestezi makinesiVeteriner Ekipmanları911103
0.5cc şırıngaExel26018
18 gauge iğneBD305196
22 gauge iğneBD305156
24 gauge anjiyokateterSur-VetSROX2419V
25- ölçer iğneExel26403
3 cc şırıngaBD309657
5cc şırıngaExel26230
AlkolFisher ScientificHC-600-1GAL
Anestezi indüksiyon odasıVeteriner Ekipmanları941443
Anestezik gaz tutucu sistemiVeteriner Bipolar 931401
elektrokoterAura26-500
Acı Sprey SisiHenry Schein5553
Kemik mumuCP MedicalCPB31A
Solunum devresiVeteriner Ekipmanları921413
BuprenophineReckitt Benckiser12496075705
Castro-Viejos iğne sürücüleriRobozRS-6416
Akülü döner testereDremel8050-N/18
Pamuklu çubukFisher Scientific23-400-101Hemostaz için
DigiGait Uygulaması ve YazılımFare ÖzellikleriMSI-DIG, DIG-SOFT
Dumont forseps (#8RobozRS-4972
Dumont forseps (5Roboz RS-5035
EnrofloksasinNorbrookANADA 200-495
FK-506Astellas301601
Gazlı BezKendall1903
Gazlı BezCovidien8044
EldivenMicroflexDGP-350-M
Saç kesme makineleriOster078005-010-003
El tipi monopolar elektrokoterBovieAA00
Hargreaves AparatıUgo Basile S.R.L. Gemonio, İtalya37370
Isıtma yastığıWalgreens126987
HeparinFresenius Kabi42592K
Sıcak plakaCorningPC-351Resüsitasyon sıvısını ısıtmak için
IsofluranHenry Schein29405
Emzirilmiş zillerBaxter2B2074
Büyük petri kabıFisher ScientificFB0875713Soğutulmuş salin
MeloksikamHenry Schein49755
mikro Collin Hartmann ekartör
Mikro diseksiyon makasıRobozRS-5841
Mikrofibriller kollajen tozuBD1010590Hemostaz için
Mikrovasküler klipslerRobozRS-5420
Normal tuzluBaxter2F7124
Oftalmik yağDechraIS4398
RapmisinMedChem ExpressHY-10219
Küçük petri kabıFisher ScientificFB0875713AIsıtılmış resüsitasyon sıvısı için
Steril örtülerProAdvantageN207100
Cerrahi önlükKardinal Sağlık9511
Cerrahi maske3M1805
Cerrahi mikroskop, optik model OPMIMDZeiss169756
Cerrahi mikroskop, Universal S3Zeiss243188
Sütür 10-0 naylonCovidienN2512
Sütür 5-0 vicrylEthiconJ213H
Sütür 7-0 ipek kravatTeleflex103-S
Bant3M1530-1
Ultrasonik alet temizleyiciRobozRS-9911
Damar genişleme forsepsRobozRS-5047
1cc şırınga BD 309659 Ekipman) ) içindeyken donör grefti için su

Kaynaklar

  1. Elliott, R. M., Tintle, S. M., Levin, L. S. Upper extremity transplantation: current concepts and challenges in an emerging field. Current Reviews in Musculoskeletal Medicine. 7 (1), 83-88 (2014).
  2. Petruzzo, P., et al.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Vaskülarize Kompozit AllotransplantasyonNöral Koaptasyon TekniğiElle Dikilen Vasküler AnastomozFemoral Sinir OnarımıSiyatik Sinir AnastomozuMikrocerrahi Ekstremite TransplantasyonuSıçan Arka Ekstremite Modeliİmmünsupresyon StratejileriFonksiyonel Nöromotor İyileşme